一种用于雌性C57BL/6J小鼠精神疾病研究的多重整合社会应激模型

本研究旨在通过建立一种多因素整合的社会应激模型，揭示慢性社会应激如何导致雌性小鼠出现精神疾病症状。目前大多数可用的精神疾病动物模型均基于雄性动物构建。本方案介绍了一种专为研究雌性小鼠精神疾病而设计的新型小鼠模型。该研究已开发出一种可靠的动物模型，使我们能够探究雌性小鼠精神疾病背后的神经生理学机制。

[旁白] 首先，在雌性受试小鼠和胜者候选小鼠的每只鼠笼中放置一根长10厘米、内径26毫米的亚克力管，让小鼠适应并学习在三天内穿过管道。为训练小鼠进行管内竞争实验，轻轻抓住每只小鼠的尾巴，将其放置在桌面上。然后，用手指捏住小鼠尾巴，将其从管道一端放入。当小鼠进入管道后松开尾巴，使其自愿穿过管道。接着，将小鼠从管道另一端放入，重复相同操作。整个过程再重复一次后，将小鼠放回其原居住鼠笼。对于胜者筛选，准备一根长30厘米、内径26毫米的亚克力管，并在管中央画一条清晰的中线。分别抓住两只胜者候选小鼠的尾巴，将它们从管道两端同时放入。让小鼠自行进入并在中点相遇，随后同时松开尾巴并启动计时器。将率先将对方推出管道的小鼠判定为胜者，并记1分。测试结束后将两只小鼠均放回其原居住鼠笼。根据各小鼠的总得分进行排名。对于CD1攻击者筛选，将一只C57雄性小鼠直接放入CD1雄性小鼠的居住鼠笼中，持续3分钟。记录首次攻击的潜伏期、攻击次数以及3分钟内攻击行为的持续时间，作为攻击性的指标，并在后续两天中重复该筛选程序。对于社会竞争失败模型，将一只多重整合社会应激（MISS）小鼠和一只胜者小鼠分别从管道两端放入，使它们向前行走并在中点相遇。MISS小鼠会被胜者小鼠推出管道。随后交换两只小鼠的位置，重复一次交互过程。之后将MISS小鼠和胜者小鼠均放回其原居住鼠笼。在改良的替代性社会挫败应激建模中，将一只雌性MISS小鼠置于CD1攻击者小鼠的鼠笼内，使其位于带孔的亚克力罩下方，以便间接观察攻击性互动过程。随后将一只雄性C57入侵小鼠引入该鼠笼，使其遭受CD1小鼠的直接身体攻击，持续10分钟。10分钟后移除入侵雄性小鼠，让雌性MISS小鼠继续接受CD1小鼠的感官刺激5分钟。5分钟后，将CD1小鼠替换为另一只新的雄性C57入侵小鼠，并重复整个程序共三次。之后将MISS小鼠放回其原居住鼠笼。接下来，为建立不可逃避的过度拥挤应激模型，在标准鼠笼内的垫料中放置一个不透明套管。每天将12至15只雌性小鼠（全部为MISS小鼠或混合其他雌性小鼠）放入套管中，持续30分钟。在社会隔离阶段，当MISS小鼠未经历社会竞争失败、替代性挫败应激或过度拥挤应激时，在为期10天的建模期间将其单独饲养。蔗糖偏好测试通过测量对甜溶液相对于水的偏好来评估快感缺失，结果显示，与未经处理的对照组小鼠相比，经历MISS的小鼠蔗糖偏好显著降低。在蔗糖偏好测试中，总液体摄入量（包括水和蔗糖溶液）在MISS小鼠与对照组小鼠之间无显著差异，表明蔗糖偏好的降低并非由液体摄入量改变所致。尾悬测试通过测量被动不动时间来评估行为绝望，结果显示，经历MISS的小鼠不动时间显著长于对照组小鼠。此外，旷场测试用于通过测量在开阔区域中心停留时间来评估焦虑水平，结果显示，经历MISS的小鼠在中心区域停留的时间显著少于对照组小鼠。高架十字迷宫通过测量对开放臂的回避行为来评估焦虑，结果显示，经历MISS的小鼠在开放臂中停留的时间显著少于对照组小鼠。