Eine Technik ist für die in-vivo-Sammlung der interstitiellen Flüssigkeit Proben aus relevanten Gewebe Seiten (hier experimentell entzündete Haut) für die Messung von Biochemikalien Vermittlung von Schmerzen und Entzündungen vor.
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Methodenartikel
Menschliche In-Vivo Bioassay für die Tissue-Specific Messung von nozizeptiven und Entzündungsmediatoren
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Diese in-vivo menschlichen Bioassay kann zur menschlichen Probanden und Patienten zu untersuchen. Die Proben werden von einschlägigen Gewebe-Sites wie die Haut über aseptisch eingefügt Mikrodialyse-Katheter (Dermal Dialyse, Erlangen, Deutschland) gesammelt. Illustrated in diesem Beispiel ist die Sammlung der interstitiellen Flüssigkeit aus experimentell entzündete Haut in menschlichen Freiwilligen. Probenentnahme kann mit anderen experimentellen Untersuchungen kombiniert werden. Zum Beispiel bietet die gleichzeitige Beurteilung von lokal freigesetzt Biochemikalien und subjektive Empfindlichkeit auf Schmerzreize in experimentell entzündete Haut der kritischen biochemischen Verhaltens-Link, um Biomarker von Schmerzen und Entzündungen zu identifizieren. Präsentiert Assay im lebenden menschlichen Organismus ermöglicht mechanistische Einblicke in Gewebe-spezifischen Prozessen zugrunde liegenden Schmerzen und / oder Entzündung. Das Verfahren ist auch gut geeignet, um die Wirksamkeit der bestehenden oder neuen Interventionen zu untersuchen - wie neue Wirkstoffkandidaten - gezielt zur Behandlung von schmerzhaften und / oder entzündlichen Zuständen. Dieser Artikel wird eine detaillierte Beschreibung über die Verwendung der Mikrodialyse-Techniken für die Erhebung der interstitiellen Flüssigkeit aus experimentell entzündete Haut Läsion des menschlichen Probanden liefern. Interstitiellen Flüssigkeit Proben sind in der Regel mit Hilfe von Multiplex-Bead Immunoassays ermöglicht Testen von bis zu 100 Analyten in Proben so klein im Volumen von 50 Mikroliter verarbeitet.
Protokoll
Induktion der experimentellen Entzündung:
- Eine Verwandte ersten Grades Sonnenbrand ist in nicht-gegerbten Haut eines Oberschenkels mit Hilfe eines kalibrierten, UV-B-Quelle (Saalmann Multitester SBB LT 499, Saalmann GmbH, Hereford, Deutschland) induziert. Der Sonnenbrand ist 24 Stunden vor Beginn einer Mikrodialyse Experiment, indem die dreifache Menge an UVB-Licht notwendig, um vollständige Rötung der Haut ausgesetzt, oder Dreifache der minimalen Erythem-Dosis (MED) verursachen induziert. Die MED ist in jedem Fach vor Beginn der Studie bestimmt. Genaue Lieferung von Energie ist mit versichert, ein UV-Messgerät (RM 12, Dr. Grobel UV-Electronic GmbH, Ettlin....
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Diskussion
Der kombinierte Einsatz von Mikrodialyse Techniken und Multiplex-Immunoassay-Technologie ist eine wertvolle real-time, in-vivo-Bioassay Menschen einen Einblick in biochemische Vorgänge in Gewebe von Interesse. Kombiniert mit Verhaltenstests wie Schmerzen Tests erlaubt das Verfahren die Untersuchung der komplexen Wechselwirkungen von Biochemikalien Vermittlung von Schmerzen und Entzündungen. Die Methode ist für 1 vielversprechend) identifiziert Gewebe spezifische Biomarker Vermittlung von Schmerzen und Entzündungen, 2) die Bereitstellung mec.......
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Offenlegungen
Die Autoren haben nichts offenzulegen.
Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare | |
|---|---|---|---|---|
| Microdialyseskatheter | Werkzeug | Dermale Dialyse | NA | |
| Pumpe 22 | Werkzeug | Harvard Apparatus | 552219 | |
| Saalmann Multitester SBB LT 400 | Werkzeug | Saalmann GmbH | NA | |
| RM-12 IP-65 Radiometer | Werkzeug | Dr. Grobel UV Elektronik GmbH | 82120000/81112100 | |
| Vollständiger Proteaseinhibitor | Reagenz | Roche-Gruppe | 11836145001 | |
| Mikrozentrifugenröhrchen | Werkzeug | E&K Scientific | 380150-X | |
| Albumin 5 % | Reagenz | ZLB Behring | NA | |
| Ringer-Laktatlösung | Reagenz | Hospira Inc. | NA | |
| Xylocain-MPF | Sonstiges | AstraZeneca | NA | |
| Spritze 1 mL | Werkzeug | BD Biosciences | 309602 |
Referenzen
- Angst, M. S., Clark, J. D., Carvalho, B., Tingle, M., Schmelz, M., Yeomans, D. C. Cytokine profile in human skin in response to experimental inflammation, noxious stimulation and administration of a COX-inhibitor: A microdialysis study. Pain. 139, 15-27 (2008).
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Nachdrucke und Genehmigungen
