Fütterungstest: Erfassung der Fresspräferenzen bei Drosophila melanogaster

Zusammenfassung

Quelle: Bovier, T. F., et al. Methoden zum Testen der endokrinen Störung bei Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2019).

Dieses Video beschreibt einen Fütterungstest für Fruchtfliegen, bei dem farbiges Futter verwendet wird, um die Fütterung und die Wirkung zugesetzter Verbindungen auf die Fressaktivität zu überwachen. Das Beispielprotokoll testet die Wirkung verschiedener endokrin wirksamer Chemikalien (EDC).

Protokoll

Dieses Protokoll ist ein Auszug aus Bovier et al., Methods to Test Endocrine Disruption in Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2019).

1. Fütterungs-Assay

HINWEIS: Dieser Assay wird empfohlen, um zu testen, ob das Vorhandensein des ausgewählten EDC im Medium die Fütterung von Fliegen beeinflussen könnte.

1. Geben Sie 15 junge Fliegen in Fläschchen mit Maismehlmedium (CM), das mit unterschiedlichen Konzentrationen des ausgewählten EDC und einem färbenden Futter ergänzt wurde. Lassen Sie die Fliegen 1 Tag lang auf dem Medium fressen.
   HINWEIS: Verwenden Sie zum Beispiel den roten Farbstoff Nr. 40 (1 mg/ml).
2. Geben Sie 15 junge Fliegen in Fläschchen mit CM, die nur mit dem Lösungsmittel und einem färbenden Futter zur Bekämpfung ergänzt wurden. Lassen Sie die Fliegen 1 Tag lang auf dem Medium fressen.
3. Betäuben Sie jede Gruppe von Fliegen einzeln mit Äther.
   1. Übertragen Sie die Fliegen jeder Gruppe in einen zylindrischen Glasbehälter (Etherizer) mit einem Trichter, der in das offene Ende eingesetzt wird, drehen Sie das Fläschchen über den Trichter und klopfen Sie die beiden Behälter vorsichtig aneinander, damit die Fliegen in den Etherizer fallen.
      HINWEIS: Der Trichter verhindert, dass sie aus dem Etherizer herauskommen.
   2. Schlage Fliegen nieder, indem du den Ätherizer vorsichtig auf eine weiche Oberfläche, wie z. B. ein Mauspad, klopfst, und ersetze den Trichter schnell durch einen in Äther getränkten Watte- und Mullstopfen.
   3. Warten Sie ca. 1 Minute, bis die Fliegen auf den Boden fallen und sich nicht mehr bewegen.
      HINWEIS: Überschreiten Sie nicht die Zeit, sonst sterben die Fliegen.
4. Legen Sie immobilisierte Fliegen unter ein Stereomikroskop und vergleichen Sie die Bauchfärbung jeder Behandlungsgruppe im Vergleich zur Kontrollgruppe.

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
17α-Ethinylestradiol	Sigma	Nr. E4876-1G
Agar für Drosophila medium	BIOSIGMA	789148
Bisphenol A	Sigma	Artikel-Nr.: 239658-50G
Bisphenol AF	Sigma	90477-100MG
Maismehl	CA' BIANCA
Diethylether	Sigma
Drosophila-Fläschchen	BIOSIGMA	789008	25 mm x 95 mm
Drosophila-Fläschchen	BIOSIGMA	789009	29 mm x 95 mm
Drosophila-Fläschchen	Kaltek	Nr. 187	22 mm x 63 mm
Ethanol	FLUKA	Nr. 2860
Etherizer	Kunsthandwerk		Zylindrischer Glasbehälter mit einem Wattestopfen
Stabmixer Pimmy	Ariete		Küchenmaschine
Instant Success Hefe	ESKA		Hefepulver
Roter Farbstoff Nr. 40	Sigma	Artikel-Nr.: 16035
Stereomikroskop mit LED-Leuchten	Leica		S4E