Drosophila melanogaster (Taufliege)

Aufgrund ihrer Größe und relativ einfachen Organisation sind Drosophila-Ammenzellen ideal für Lebendzell-Bildgebungsstudien geeignet. Dieses Video beschreibt eine Mikroinjektionsmethode für die Verabreichung exogener Verbindungen in die Zellen, und das vorgestellte Protokoll demonstriert das Verfahren mit fluoreszierenden Oligonukleotidsonden, den sogenannten Molecular Beacons (MBs), die zur Visualisierung endogener mRNA-Transkripte verwendet werden.

Der Drosophila-Embryo ist von schützenden äußeren Membranen umgeben. Um Zugang zum Embryo zu erhalten, wird oft das Chorion – die äußerste der Membranen – entfernt. Dieses Video beschreibt eine häufig verwendete Methode der Dechorionierung mit Natriumhypochlorit. Das Beispielprotokoll demonstriert das Verfahren unter Anwendung steriler Techniken, die für die axenische oder gnotobiotische Tieraufzucht erforderlich sind.

Die Immunfärbung von Drosophila-Eizellen im späten Stadium kann sich aufgrund der umgebenden Membranen der Eizellen als schwierig erweisen. Dieses Video beschreibt eine Hochdurchsatzmethode zur Gewinnung von Eizellen, deren Fixierung und Entfernung von Membranen für die Immunfärbung. Das vorgestellte Protokoll demonstriert diese Techniken mit Eizellen im Spätstadium, die zur Visualisierung verschiedener Stadien der Meiose verwendet werden.

Dieses Video beschreibt eine Methode zur mechanischen Entfernung der Chorion- und Vitellinmembranen von zuvor fixierten reifen Drosophila-Eizellen. Das vorgestellte Protokoll zeigt eine detaillierte Demonstration des Verfahrens, das Eizellen liefert, die mit fluoreszierenden In-situ-Hybridisierungsassays kompatibel sind.

Dieses Video beschreibt, wie man Mikroinjektionen durchführt, die Reagenzien in lebende Drosophila-Embryonen einbringen. Forscher können diese Methode nutzen, um exogene Verbindungen wie Nukleinsäuren und Proteine in den frühen Stadien der Embryonalentwicklung einzuführen. Das vorgestellte Protokoll zeigt, wie das Verfahren für die Injektion eines löslichen Reagenzes eingerichtet und durchgeführt wird – hier ein fluoreszierendes Protein für Live-Imaging-Experimente.

Source:Siddarth Gunnala1, Nafisa M. Jadavji2,3,41Department of Biomedical Sciences, Midwestern University, Glendale, AZ, USA2Division of Integrative and Molecular Physiology, Department of Biomedical Sciences, Southern University of Illinois, Carbondale, IL, USA3Department of Child Health, College of Medicine Phoenix, University of Arizona, Phoenix, AZ, USA4Department of Neuroscience, Carleton University, Ottawa, ON, CanadaThis video demonstrates hypoxia-induced climbing behavior in Drosophila...

Dieses Video zeigt eine Methode, um Hypoxie bei Drosophila-Larven zu testen, indem ihre Grab- und Tunnelfähigkeiten bewertet werden. Mit dieser Technik können Forscher Larven mit Sauerstoffmangel von solchen mit Entwicklungsdefiziten unterscheiden. Das Beispielprotokoll veranschaulicht den Aufbau für diesen Assay.

Bei der Färbung von Drosophila-Imaginalscheiben wird oft eine grobe Dissektion durchgeführt, bei der die Scheiben freigelegt werden, aber am Körper haften. Nach dem Färben werden die interessierenden Discs isoliert und montiert. Das Beispielprotokoll demonstriert ein Verfahren zum Disparieren und Montieren von Flügel-Imaginalscheiben.

Die Drosophila Neuromuscular Junction (NMJ) wird als Modell verwendet, um die Morphologie und Funktion von Synapsen zu untersuchen. Dieses Video beschreibt wichtige Merkmale, die Forscher quantifizieren, um das NMJ zu charakterisieren. Das Beispielprotokoll demonstriert eine Software, die in der Lage ist, die Quantifizierung automatisch durchzuführen.

Dieses Video beschreibt die Zwei-Photonen-Laserablation von Axonen in einer Drosophila melanogaster-Larve und ein Beispielprotokoll zur Induktion von Verletzungen und zur Abbildung der Verletzungsstelle.

Dieses Video beschreibt, wie Larvenfilets präpariert werden, die zur Visualisierung von Neuronen der sensorischen dendritischen Arborisation (da) und den zugehörigen Epidermiszellen verwendet werden. Das vorgestellte Protokoll zeigt im Detail, wie Muskelgewebe aus der Körperwand entfernt werden kann, während die Morphologie der Zellen erhalten bleibt, was die Immunfärbung und die Visualisierung der sonst verdeckten da-Neuronen und Epidermiszellen verbessert.

Die Drosophila-Hämolymphe dient sowohl als Blut als auch als interstitielle Flüssigkeit und zirkuliert während des Larven- und Erwachsenenstadiums durch den Körper. Dieses Video beschreibt ein Protokoll zur Entnahme von Hämolymphlarven, um die zirkulierenden Zellen zu quantifizieren.

Drosophila-Larven sind lichtempfindlich und reagieren auf Veränderungen des Umgebungslichts. Dieses Video beschreibt einen Assay, der ihre Fähigkeit testet, Licht zu vermeiden, den sogenannten Lichtfleck-Assay. Das vorgestellte Protokoll zeigt, wie der Assay mit einer Blaulicht-LED eingerichtet wird, und zeigt, wie das Verhalten des Tieres als Reaktion auf die Lichtbegegnung aufgezeichnet wird.

Dieses Video beschreibt die Drosophila-Ringdrüse, eine komplexe endokrine Struktur, die für die Biosynthese und Sekretion von Ecdysteroiden und anderen Hormonen wichtig ist. Das vorgestellte Protokoll demonstriert die Dissektion, Fixierung und Immunfärbung.

Drosophila-Larven haben dedizierte sensorische Neuronen - Nozizeptoren -, deren Reaktion auf potenziell schädliche thermische Reize aversives – oder sogenanntes "nozifensives" – Verhalten im Tier auslöst. Dieses Video beschreibt eine Methode zur Beurteilung der thermischen Nozizeption durch Aufzeichnung des Larvenverhaltens als Reaktion auf die lokale Anwendung einer Wärmesonde auf die Nagelhaut. Diese Methode wird daher als lokaler Wärmesonden-Assay bezeichnet.

Drosophila-Fruchtfliegen können kleine Temperaturänderungen erkennen und daher Umgebungen mit günstigen thermischen Bedingungen auswählen. Dieses Video beschreibt einen Verhaltensassay, der die Temperaturpräferenz von Drosophila-Larven auf einem linearen thermischen Gradienten testet.

Dieses Video beschreibt die Drosophila-Lymphdrüse – die primäre Stelle der Hämatopoese in der Fliegenlarve – und zeigt ein Beispielprotokoll zum Sezieren und Montieren des Organs für Immunhistochemie und Fluoreszenzbildgebung.

Dieser Artikel beschreibt eine Technik, um die Puppe eines Insekts zu entfernen, während die innere Puppe intakt bleibt und daher für weitere Untersuchungen geeignet bleibt. Das Beispielprotokoll zeigt die Vorgehensweise mit Drosophila guttifera; Diese Technik ist jedoch auch auf andere Drosophila-Arten anwendbar.

Dieses Video beschreibt, wie man den Auge-Hirn-Komplex aus Drosophila-Puppen präpariert und isoliert. Das vorgestellte Protokoll zeigt, dass das Verfahren qualitativ hochwertiges Gewebe liefert, das beispielsweise mit Immunfärbung und anderen Genexpressionsexperimenten kompatibel ist.

Die Drosophila-Flugmuskeln werden als Modellsystem für Muskelentwicklung und Physiologie verwendet. Dieses Video beschreibt die Flugmuskulatur von Erwachsenen und zeigt ein Protokoll zur Dissektion der sich entwickelnden indirekten Flugmuskulatur, die für die RNA-Sequenzierung von Puppen geeignet ist.

Dieses Video beschreibt einen klassischen Konditionierungstest, der das Lernen und das Gedächtnis in Drosophila testet, die sogenannte Balzkonditionierung. Der Assay basiert auf der Verringerung der männlichen Balz nach einer Abstoßung durch ein nicht empfängliches präpaariges Weibchen. Das Beispielprotokoll zeigt einen Aufbau für das Verfahren, mit dem das Kurz- und Langzeitgedächtnis bewertet werden kann.

Dieses Video beschreibt eine einfache Methode zur Quantifizierung der Fortbewegung von Fliegen und zeigt den durchgeführten Kletter-Assay. Der Fly-Climbing-Assay ist ein allgemeiner Test der motorischen Funktion, der auf einer negativen Geotaxis-Reaktion beruht.

Dieses Video beschreibt die Dissektion der akzessorischen Drüsen von männlichen Fliegen und zeigt ein Beispiel, in dem die isolierte Drüse in eine einzellige Suspension dissoziiert wird.

Dieses Video beschreibt die allgemeine Anatomie des Drosophila-Eierstocks und zeigt eine Methode zum Präparieren von Eierstöcken für Live- oder fixierte Bildgebung.

Dieser Artikel beschreibt die Dissektion der vorderen Malpighischen Tubuli (MT) von einer weiblichen Drosophila-Fliege und ein Beispielprotokoll von Rossano et al. (2017), in dem die MTs für die Live-Bildgebung in einer Perfusionskammer vorbereitet werden.

Dieses Video beschreibt den Insel-Assay, eine Verhaltensmethode, die zur Untersuchung der Fortbewegung von Drosophila verwendet wird. Das Probenprotokoll verfügt über einen Aufbau für den Assay, der mit der halbautomatischen Bildanalyse kompatibel ist.

Wissenschaftler verwenden das Drosophila-Lebensdauerprotokoll, um zu messen, wie verschiedene experimentelle Bedingungen die Langlebigkeit von Fliegen beeinflussen, und erstellen dabei Überlebenskurven, um die experimentellen Ergebnisse zu quantifizieren. Das Probenprotokoll zeigt, dass der Assay angewendet wird, um die Auswirkungen auf die Langlebigkeit zu untersuchen, die sich aus der Exposition gegenüber unterschiedlichen Konzentrationen von endokrinen Disruptorchemikalien (EDCs) wie...

Dieses Video beschreibt einen Fütterungstest für Fruchtfliegen, bei dem farbiges Futter verwendet wird, um die Fütterung und die Wirkung zugesetzter Verbindungen auf die Fressaktivität zu überwachen. Das Beispielprotokoll testet die Wirkung verschiedener endokrin wirksamer Chemikalien (EDC).

Dieses Video beschreibt eine Methode, um intakte Gehirne von erwachsenen Fliegen unter eine Brückenrutsche zu montieren und zeigt das Protokoll, das an immungefärbten Gehirnen für die Fluoreszenzmikroskopie durchgeführt wurde.

Dieses Video beschreibt eine Screening-Methode zur Identifizierung transgener Drosophila-Fliegen, deren Genom mit CRISPR-Cas9 modifiziert wurde. CRISPR-Cas9 ist ein leistungsstarkes Genom-Editing-Tool, das die Art und Weise, wie Wissenschaftler das Genom eines Organismus manipulieren können, revolutioniert hat. Im Beispielprotokoll werden wir sehen, wie CRISPR-generierte Mutanten identifiziert werden können, bei denen eine Insertion einer Transaktivierungssequenz das erste Exon des...

Die Rasterelektronenmikroskopie (REM) ist ein leistungsfähiges Werkzeug, um – in erster Linie – die Oberflächenmerkmale einer biologischen Probe abzubilden. Die richtige Probenvorbereitung ist jedoch entscheidend für die Erzielung hochwertiger Bilder. Dieses Video konzentriert sich auf die Dehydratisierungs- und Trocknungsschritte bei der Vorbereitung intakter adulter Drosophila für das REM.

Dieses Video beschreibt, wie man Drosophila-Köpfe in Paraffin einbettet, indem man die Kragenmethode verwendet, eine Technik, die Fliegenköpfe für das serielle Schneiden vorbereitet. Paraffinschnitte werden für histologische Untersuchungen der Anatomie des Gehirns und zur Beurteilung der Neurodegeneration verwendet. Das vorgestellte Protokoll zeigt, wie mehrere Fliegen in einem Präparat verarbeitet werden können, wodurch die Zeiteffizienz erhöht und experimentelle Artefakte minimiert werden.

Dieses Video beschreibt, wie eine Injektion von lebenden erwachsenen Fliegen durchgeführt wird und enthält ein Beispielprotokoll, in dem markierte Partikel und Trypanblau in den Bauch von Fliegen injiziert werden, um die Phagozytose zu testen.

Dieses Video beschreibt den Geschmackspräferenz-Assay, eine Verhaltensmethode, die verwendet wird, um die Anziehungskraft oder Vermeidung von farbigen Lösungen, die anders schmecken, zu messen, indem die Bauchfärbung der Fliege nach der Einnahme der bevorzugten Substanz bewertet wird. Das vorgestellte Protokoll demonstriert das Verfahren, mit dem die Präferenz von Fliegen für Lösungen mit unterschiedlichen Saccharosekonzentrationen gemessen wird.

Dieses Video beschreibt den CApillary FEeder oder CAFE-Assay, eine Verhaltensmethode, die die Nahrungsaufnahme und -präferenz von ungezügelten Fruchtfliegen misst. Das vorgestellte Protokoll zeigt, wie der Assay mit minimaler Verdunstung aus den flüssigkeitsgefüllten Kapillaren durchgeführt wird, die zur Abgabe der Nahrung und zur Verfolgung ihrer Aufnahme verwendet werden.

Dieses Video beschreibt, wie man das erwachsene Drosophila-Gehirn präpariert und isoliert – ein Verfahren, das notwendig ist, um das Organ sichtbar zu machen, das sonst von der Nagelhaut, dem Auge und dem Luftröhrengewebe verdeckt wird. Das Beispielprotokoll zeigt eine detaillierte Demonstration, die zu hochwertigen Präparaten führt, die für Immunfärbungen und bildgebende Verfahren in der Neurobiologie von Drosophila verwendet werden können.

Drosophila-Mikrobiota beeinflusst die Entwicklung, Immunität und Physiologie des Tieres. Dieses Video beschreibt eine Methode zur Quantifizierung von Bakterien aus Fliegen durch Bestimmung der koloniebildenden Einheiten aus Ganzkörperpräparaten. Das vorgestellte Protokoll demonstriert die Technik mit Fliegen, die unter gnotobiotischen Bedingungen unter Verwendung von vier Bakterienarten aufgezogen werden.

Dieses Video beschreibt eine Methode, um das erwachsene Bein von Drosophila zu präparieren, zu reparieren und zu montieren, während seine Neuromuskulatur für die bildgebende Analyse intakt bleibt.

Dieses Video beschreibt, wie man frei laufende Fliegen verfolgen kann, um ihre allgemeine Fortbewegungsfähigkeit zu beurteilen. Das vorgestellte Protokoll demonstriert die Einrichtung des Assays und die Datenanalyse mit Hilfe von Video-Tracking-Software.

Dieses Video beschreibt eine Methode zum Bau eines Fliegensaugers, mit dem Insekten ohne Betäubung zwischen Gehegen transportiert werden können. Der Aspirator im Beispielprotokoll wurde für ein Experiment zur Quantifizierung des individuellen Pflegeverhaltens...

Dieses Video beschreibt die In-vivo-Calcium-Bildgebung in Drosophila-Neuronen mit GCaMP. Der vorgestellte Protokollclip zeigt, wie Veränderungen der GCaMP-Fluoreszenz von Pilzkörperneuronen während eines olfaktorischen Konditionierungsexperiments aufgezeichnet werden können.

Fruchtfliegen haben ein komplexes Geruchssystem, können Hunderte von Geruchsstoffen unterscheiden und ihren Geruchssinn nutzen, um Verhaltensentscheidungen zu treffen. Dieses Video beschreibt den Vier-Wege-Olfaktometer-Assay, eine Methode zur Untersuchung olfaktorischer Verhaltensreaktionen bei Fliegen. Der vorgestellte Protokollclip zeigt, wie man mit Testfliegen umgeht und was die kritischen Schritte bei der Durchführung des Assays sind.

Aggression ist ein angeborenes Verhalten und frühere Kampferfahrungen beeinflussen die Kampfstrategie und den Ausgang späterer Wettkämpfe in Fliegen. Dieses Video beschreibt einen Assay, der zur Untersuchung des aggressiven Verhaltens von Drosophila verwendet wird. Das Beispielprotokoll zeigt den Assay in einem Setup, das den Umgang mit Fliegen eliminiert und somit den Stress für die Tiere reduziert, der sich sonst auf die Leistung der Probanden auswirken würde.

Dieses Video beschreibt eine Methode zum Testen des olfaktorischen Erkundungsverhaltens bei der Fruchtfliege, das sogenannte Y-Labyrinth. Der vorgestellte Protokollclip zeigt, wie der Assay eingerichtet und durchgeführt wird.

Dieses Video beschreibt das Drosophila-Aktivitätsmonitor-System (DAM), das zur Verfolgung der Bewegungsaktivität verwendet wird. Die Forscher verwenden Aktivitätsdaten, die vom DAM gesammelt wurden, um den zirkadianen Rhythmus bei Fruchtfliegen zu untersuchen. Der vorgestellte Protokollclip zeigt, wie man Fliegen in das Gerät lädt und Aktivitätsdaten für zirkadiane Experimente aufzeichnet.

Optogenetik ermöglicht die Verwendung von Licht, um Neuronen zu manipulieren, die gentechnisch so verändert wurden, dass sie spezifische Opsine exprimieren – lichtempfindliche Proteine, deren Lichtaktivierung eine Veränderung des Zustands des Neurons auslöst. Hier beschreiben wir einen optogenetischen Ansatz in Drosophila unter Verwendung des Opsins Channelrhodopsin2. Das Beispielprotokoll enthält einen Optogenetik-Assay, um die neuronalen Schaltkreise hinter dem Fluchtverhalten der Fliege zu...

In diesem Video zeigen wir eine Sektion des adulten Drosophila-Darms und eine Sammlung von Mitteldärmen, die für die Einzelzelldissoziation und FACS geeignet sind, um Darmstammzellen zu isolieren.

Dieses Video beschreibt das erwachsene Herz der Fliege, oder auch Drosophila dorsales Gefäß genannt. Das vorgestellte Protokoll zeigt ein Präparierverfahren für Lebendherzpräparate.

Drosophila-Weibchen wählen zwischen Substraten und wählen Standorte, die für die Eiablage attraktiv sind. Dieses Video beschreibt einen Verhaltensassay, der ihre Entscheidungsfindung testet, den sogenannten Eiablage-Präferenz-Assay. Der vorgestellte Clip demonstriert das Verfahren mit einem speziell angefertigten Setup, das es den Forschern nicht nur ermöglicht, das Verhalten vieler Weibchen gleichzeitig zu testen, sondern auch mit Videoaufzeichnungen und optogenetischen Setups kompatibel ist.