Zwei-Photonen-Laser-induzierte neuronale Verletzung: Eine Methode zur Beobachtung der Axondegeneration und -regeneration bei Drosophila-Larven

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Quelle: Li, D., et al. Ein Drosophila In-vivo-Verletzungsmodell zur Untersuchung der Neuroregeneration im peripheren und zentralen Nervensystem. J. Vis. Exp. (2018).

Dieses Video beschreibt die Zwei-Photonen-Laserablation von Axonen in einer Drosophila melanogaster-Larve und ein Beispielprotokoll zur Induktion von Verletzungen und zur Abbildung der Verletzungsstelle.

Protokoll

Dieses Protokoll ist ein Auszug aus Li et al., A Drosophila In Vivo Injury Model for Studying Neuroregeneration in the Peripheral and Central Nervous System, J. Vis. Exp. (2018).

1. Zwei-Photonen-Verletzung und konfokale Bildgebung

Aufbau des Mikroskops
HINWEIS: Für dieses Experiment wurde ein konfokales Laser-Scanning-Mikroskop mit einem Zwei-Photonen-Laser verwendet, aber auch andere Systeme mit einem gleichwertigen Aufbau reichen aus. Der Zwei-Photonen-Laser (930 nm) wurde für die Verabreichung von Verletzungen und ein Argon-Laser (488 nm) für die konfokale Bi....

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Ergebnisse

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Abbildung 1: Die Regeneration von Neuronenaxonen in der Peripherie zeigt Klassenspezifität. (A und B) Schematische Zeichnung, die die Position der Larven zeigt. (C) Schematische Zeichnung von Neuronen der Klasse III da. (D) Axone der Klasse-III-da-Neuronen ddaF, markiert mit 19-12-Gal4, UAS-CD4-tdGFP, repo-Gal80/+, wachsen nicht nach. (E) Schematische.......