Verfolgung frei laufender Fliegen: Eine Methode zur Beurteilung der Fortbewegung bei Drosophila

Zusammenfassung

Quelle: Sun, M. und Chen, L. L. Eine neuartige Methode zur Modellierung der chronischen traumatischen Enzephalopathie bei Drosophila. J. Vis. Exp. (2017).

Dieses Video beschreibt, wie man frei laufende Fliegen verfolgen kann, um ihre allgemeine Fortbewegungsfähigkeit zu beurteilen. Das vorgestellte Protokoll demonstriert die Einrichtung des Assays und die Datenanalyse mit Hilfe von Video-Tracking-Software.

Protokoll

Dieses Protokoll ist ein Auszug aus Sun und Chen, A Novel Method to Model Chronic Traumatic Encephalopathy in Drosophila, J. Vis. Exp. (2017).

1. Videogestützte Bewegungsverfolgung

1. Füllen Sie eine Petrischale mit einem Durchmesser von 6 cm mit transparentem Silikonelastomer, um die Tracking-Arena herzustellen. Lassen Sie zwischen dem Silikon und dem Schalendeckel einen Abstand von 3 mm, damit die Fliegen frei laufen, aber nicht fliegen können.
2. Betäuben Sie jedes Mal vier Fliegen aus der Schein- oder der behandelten Gruppe und platzieren Sie sie in der Arena. Lassen Sie die Fliegen 1 h bei 22 °C stehen.
3. Positionieren Sie eine CCD-Kamera (Charge-Coupled Device) über den Arenen und nehmen Sie 5 Minuten lang auf.
4. Analysieren Sie die aufgezeichneten Bewegungstrajektorien mit der Ctrax-Software (kostenlos von Caltech erhältlich). Exportieren Sie die verfolgten Daten in ein mit einer Programmiersprache (z. B. Matlab) kompatibles Format und analysieren Sie die Daten basierend auf der zurückgelegten Strecke pro Frame. Berechnen Sie die mittlere Gehstrecke für jede Fliege und kombinieren Sie sie mit allen anderen aufgezeichneten Fliegen/Gruppen, um eine mittlere kumulative Strecke zu erhalten, die von der Population der Dateien in derselben Gruppe zurückgelegt wird.

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
60 mm Petrischalen	Fisher Scientific	FB0875713A	Wird als Tracking-Arena verwendet
Durchflussregler	Genesee Scientific	59-122WC
Feiner Pinsel	Genesee Scientific	Nr. 59-204
Flypad	Genesee Scientific	Nr. 59-114
Sylgard Silikon-Elastomer	Dow Corning	4019862
CCD-Kamera	Microsoft	HD-5000
Ctrax Walking Fliegentracker	Caltech	Ctrax 0.2.11
MATLAB-Toolbox für die Bildverarbeitung	MATLAB (Englisch)	Nr. R2015b