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Methodenartikel

Störung der Nagelhaut: Eine Methode zum Sammeln von Hämolymphe aus Drosophila-Larven

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30. April 2023

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Quelle: Reimels, T. A. und Pfleger, C. M. Methoden zur Untersuchung der Lymphdrüse und der Hämozyten in Drosophila-Larven. J. Vis. Exp. (2016).

Die Drosophila-Hämolymphe dient sowohl als Blut als auch als interstitielle Flüssigkeit und zirkuliert während des Larven- und Erwachsenenstadiums durch den Körper. Dieses Video beschreibt ein Protokoll zur Entnahme von Hämolymphlarven, um die zirkulierenden Zellen zu quantifizieren.

Protokoll

Dieses Protokoll ist ein Auszug aus Reimels und Pfleger, Methoden zur Untersuchung der Lymphdrüse und der Hämozyten in Drosophila-Larven, J. Vis.(2016).

1. Zirkulierende Hämozytenkonzentration

  1. Um Larven mit ungefähr dem gleichen Entwicklungsstadium für diesen Test zu erhalten, beschränken Sie die Eizellentnahme, indem Sie den Weibchen erlauben, Eier für einen festgelegten Zeitraum von 2 - 6 Stunden zu legen.
  2. Sammeln Sie die Larven in Präparierschalen, die mit 1x phosphatgepufferter Kochsalzlösung (PBS) gefüllt sind.
  3. Für jede Larve werden 10 μl 1x PBS in ein Mikrozentrifugenröhrchen auf Eis u....

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
PBS-TablettenMP Biomedizin2810305
PräparierschaleCorning7220-85
Mikrozentrifugen-RöhrchenDenvilleNr. C2170
Silikon-Präparierpad, hergestellt aus Sylgard 184 KitKrayden (vertrieben über Fisher)NC9644388 (Fisher-Katalognummer)Hergestellt in der Petrischale durch Mischen der Komponenten des Sylgard-Elastomer-Kits gemäß den Anweisungen des Herstellers.
stereomikroskopMorrell Instruments (Nikon-Händler)MNA42000, MMA36300Nikon-Modelle SMZ1000 und SMZ645
Tuch für TaschentücherVWRNr. 82003-820
ZangeElektronenmikroskopie72700-DZ
P200 PipetteEppendorf3120000054
Gräfin Automatisierter ZellzählerInvitrogenNr. C10227
Countess Zellzählkammer ObjektträgerInvitrogenNr. C10283
HämozytometerHausser Scientific3200
Trypanblaue BeizeLebenstechnologienNr. T10282

Tags

HämolymphsammlungHämocytenzählungVerwendung des HämozytometersPräparierkissenMikrozentrifugenröhrchenPBS-PufferPinzettentechniklarvales Kreislaufsystem