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Touch Habituation Assay: Eine Methode zur Untersuchung des nicht-assoziativen Lernens bei C. elegans

30. April 2023

In diesem Artikel

Zusammenfassung

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Quelle: Mersha, M. D., et al. Langfristige Verhaltens- und Fortpflanzungsfolgen der embryonalen Exposition gegenüber niedrig dosierten Giftstoffen. J. Vis. Exp. (2018).

Dieses Video stellt den Tastgewöhnungstest vor, eine Verhaltensmethode von C. elegans zur Beurteilung der Mechanoempfindung und zur Quantifizierung der Zeit bis zur Gewöhnung.

Protokoll

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Das folgende Protokoll ist ein Auszug aus Mersha et al. Langfristige Verhaltens- und Fortpflanzungsfolgen der embryonalen Exposition gegenüber niedrig dosierten Giftstoffen, J. Vis. exp. (2018)

  1. Assay zur Gewöhnung an die vordere Berührung
    1. Übertragen Sie ca. 10 synchronisierte junge adulte Würmer mit einem feuersterilisierten 30-G-Platindrahtpickel auf neue, nicht ausgesäte NGM-Platten. Lassen Sie die Würmer 5 Minuten lang ungestört, damit sie Zeit haben, sich an die neue Platte zu gewöhnen.
    2. Verwenden Sie für die Gewöhnungsreaktion ein Augenbrauenhaar, das am Ende eines Holzspießes oder Zahnstochers befestigt ist, und sterilisieren Sie es, indem Sie es in 70% Ethanol tauchen. Wischen Sie mit einem sauberen, fusselfreien Tuch ab und warten Sie 1 Minute, bis das Ethanol verdunstet ist. Berühren Sie den Wurm vorsichtig am Kopf (vor dem Rachenkolben) mit den Augenbrauenhaaren. Wiederhole die Berührungen und lasse 10 Sekunden zwischen den Berührungen, damit sich der Wurm erholen kann.
    3. Berühren Sie weiter (mit 10 s Interstimulus-Intervallen), bis sich der Wurm nicht mehr rückwärts bewegt. Zu diesem Zeitpunkt hat sich der Wurm an den Reiz gewöhnt. Notieren Sie die Anzahl+mehr der Berührungen, die der Wurm benötigt, um sich daran zu gewöhnen.
    4. Analysieren Sie die Differenz zwischen den mittleren Gewöhnungsraten der behandelten und unbehandelten Kontrollen mit Hilfe der unidirektionalen ANOVA, gefolgt von Tukeys Post-hoc-Test.

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
EtOHSigma-Aldrich64-17-5
N2 (Wildtyp C. elegans) WürmerCGCRepositorium an der Universität von Minnesota
Platinum DrahtpickelGenesee Scientific59-AWP
PetriplattenFischerTel.: 07-202-011
DissektionsmikroskopAmScope (Englisch)SM-2TYY

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Schlagwörter

MechanosensationAnterior TouchReversal ResponseInterstimulus IntervalNGM PlatesSynchronized WormsGentle Touch

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