XTT Assay: Ein kolorimetrischer Assay zur Beurteilung der Zellviabilität und der mitochondrialen Aktivität

Zusammenfassung

Trendowski, M., et al. Erzeugung und quantitative Analyse von gepulstem niederfrequentem Ultraschall zur Bestimmung der Schallempfindlichkeit von unbehandelten und behandelten neoplastischen Zellen. J. Vis. Exp. (2015)

Dieser Artikel beschreibt das Protokoll für den XTT-Assay, einen kolorimetrischen Assay zur Beurteilung der Zellviabilität und der mitochondrialen Aktivität.

Protokoll

1. XTT-Assay zur Bestimmung der Zellviabilität und mitochondrialen Aktivität von behandelten U937- und THP1-Zellen

1. Vor den XTT-Assays züchten Sie U937- und THP1-Zellen unter den gleichen Bedingungen. Die Zellen werden vor der Beschallung 30 Minuten lang mit dem gleichen Konzentrationsbereich wie MeβCD vorbehandelt. Verwenden Sie die gleichen Ultraschallparameter wie zuvor, mit der Ausnahme, dass die Zellen jetzt mit einem Bereich von 1-3 Impulsen pro Sekunde im Abstand von einer Sekunde beschallt werden, um einen Schadensbereich zu entwickeln, den das XTT-Kit beurteilen kann.
   Anmerkung: Viele dieser Schritte stammen direkt aus dem X....

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
Iscove's Modified Dulbecco's Medium mit NaHCO3 & 25mM Hepes	Lebenstechnologien	12440079
Branson SLPe 40kHz Zelldisruptor mit 3" (25mm) Cuphorn	Branson Ultraschall	Tel.: 101-063-726	Beschallung Gerät
Tip One 100 μl und 1.000 μl Filterspitzen	USA Wissenschaftlich	Tel.: 1120-1840, 1126-7810
100 μl Mikropipette	Wheaton	851164
1000 μl Mikropipette	Wheaton	851168
Forma Scientific Zweikammer-Wasser Inkubator mit Mantel	Forma Scientific	Nr. 3131
XTT Zellproliferations-Assay-Kit	ATCC	30-1011K
96-Well-Mikroplatten-Reader	Cole-Palmer	Artikel-Nr.: EW-13055-54
U937 Humane monozytäre Leukämiezellen	ATCC	CRL1593.2
THP1 humane monozytäre Leukämiezellen	ATCC	TIB-202