Die Kenntnis der zugrunde liegenden molekularen Mechanismen Geschmacks Transduktion hat kürzlich bedeutende Fortschritte genossen, vor allem aufgrund der Verwendung von Tiermodellen. Doch die große Vielfalt in Geschmack Sensitivität und Spezifität bei Säugetieren Optionsscheinen Studien in menschlichem Gewebe. Wir beschreiben eine Biopsie-Technik auf lebende Geschmack Zellen aus der Papillen auf die menschliche Zunge zu sammeln.
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Methodenartikel
Technik zu pilzförmigen (Taste) Papillen aus menschlichen Zunge sammeln
* These authors contributed equally
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Der Geschmackssinn ist von entscheidender Bedeutung für das menschliche Leben. Er informiert den Körper über die Qualität von Lebensmitteln, die möglicherweise verschluckt werden und regt Stoffwechselprozesse, die den Verdauungstrakt Vorbereitung für die Verdauung. Stetige Fortschritte auf dem Weg zu Verständnis der frühen biochemischen und molekularen Ursachen Geschmack Transduktion (für eine Übersicht, Breslin und Spector, 2008 1) hergestellt. Allerdings hat die bisherigen Fortschritte im Wesentlichen aus Tiermodellen geführt. Doch, da deutliche Unterschiede in der Rezeptor-Spezifität und Rezeptor-Dichte zwischen den Arten variieren, wird die menschliche Geschmack Transduktion nur mit menschlichen Geschmack Gewebe verstanden werden. Hier beschreiben wir eine Biopsie-Technik für die menschliche pilzförmigen Papillen, sichtbar als runde rosa vorderen Strukturen, etwa 0,5 mm im Durchmesser zu sammeln, die Geschmacksknospen enthalten. Diese biopsiert Papillen sind für verschiedene Zwecke einschließlich der Trennung von lebensfähigen Geschmacksknospe Zellen in situ Hybridisierung, Immunhistochemie und durch Techniken der Molekularbiologie, die Identifizierung des Geschmacks-spezifische neuartige Proteine verwendet.
Protokoll
1. Einführung und Allgemeines
Das allgemeine Verfahren umfasst örtlicher Betäubung eine kleine (1 cm 2) Gebiet der dorsalen Oberfläche der vorderen Zunge, durch Entfernung einer Anzahl (6-8) des pilzförmigen (Geschmacks-) Papillen aus, dass anästhesierten Bereich mit einer gekrümmten Feder micro gefolgt -Schere (McPherson-Vannas Art # SR 5603, Roboz, Rockville, MD). Die entfernten pilzförmigen Papillen sind etwa 0,25 mm 3 je. Es gibt sehr wenig nicht-Papillen (Geschmack) Epithelgewebe zusammen mit jeder Papille entfernt. New Papillen bilden in diesem Bereich nach 3 bis 5 Wochen und wieder funktionierende Geschmacksknos....
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Diskussion
Ein bemerkenswerter Vorteil der Verwendung von menschlichen Zellen ist ihre Spezifität. Das Verfahren hier im Detail beschrieben bietet Zunge Gewebe für die Isolierung des Geschmacks-Rezeptor-Zellen aus Mensch. Diese Geschmacks-Zellen können für molekulare Studien eingesetzt werden, suche, um Moleküle wichtig für die Transduktion des Geschmacks Informationen zu entdecken, und für die Kalzium-Imaging-Studien, die Geschmack-Zell-Aktivität zu überwachen, um Reize. Darüber hinaus kann die Zunge Gewebe durch dieses Verfahren.......
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Offenlegungen
Keine Interessenskonflikte erklärt.
Danksagungen
Diese Arbeit wurde vom NIH R21 DC03969-01 (zu JGB) unterstützt. Wir danken Herrn Dr. Fritz Lischka für die Erfassung von einzelnen Geschmacksknospe Zellen, Dr. Tauf Huque für die Durchführung der RT-PCR in Abbildung 4B und Herr D. Bayley und Frau S. Alarcon für die technische Unterstützung gezeigt. M. Yanina Pepino ist ein Kerl von einem NIDAT32 DA07313 Washington University School of Medicine, St. Louis, MO (Cottler, LB PI) unterstützt.
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Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| McPherson-Vannas. Gekrümmte, scharfe Schneidkante 5 mm. Kamm, Spitzenbreite 0,2 mm, Gesamtlänge 3" | Roboz Surgical Instruments Co. | RS-5603, Roboz | |
| Kleine Dumont-Pinzette | Roboz Surgical Instruments Co. | RS-4915, Roboz |
Referenzen
- Breslin, P. A., Spector, A. C. Mammalian taste perception. Curr Biol. 26 (4), R148-R155 (2008).
- Miller, I. Anatomy of the peripheral taste system. Handbook of Olfaction and Gustation. Doty, R. I., Dekker, M. , Marcel Dekker. New York. 521-547 (1995).
- Figure 12.67.
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Nachdrucke und Genehmigungen
