Muskeltransplantation als chirurgische Strategie zur Wiederherstellung der Durchblutung des Mäusegehirns nach einem Schlaganfall

Zusammenfassung

Quelle: Paro, M. R., et.al. Ein Modell für die Behandlung von Enzephalomyosynangiose nach einem Schlaganfall bei Mäusen, die durch einen Verschluss der mittleren Hirnarterie verursacht wurden. J. Vis. Exp. (2022).

Dieses Video zeigt einen chirurgischen Eingriff zur Transplantation eines vaskularisierten Muskels auf die Gehirnoberfläche nach einem vorübergehenden Verschluss der mittleren Hirnarterie. Das Transplantat fördert die Bildung neuer Blutgefäße im ischämischen Bereich und verbessert so die Sauerstoff- und Nährstoffversorgung. Im Laufe der Zeit unterstützt der integrierte Muskel das neuronale Überleben und hilft bei der Genesung nach einem Schlaganfall.

Protokoll

Alle Verfahren, an denen Tiermodelle beteiligt sind, wurden vom lokalen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss von JoVE überprüft.

1. Enzephalomyosynangiose (EMS) surgery
   1. Nach 60 Minuten Verschluss der mittleren Hirnarterie (MCAo) randomisieren Sie die Mäuse in MCAo-only- oder MCAo + EMS-Gruppen. Führen Sie eine EMS 4 h nach MCAo (MCAo + EMS-Gruppe) oder eine Scheinoperation für ausgewählte Experimente (nur EMS-Gruppe) durch. Ziehen Sie vor der Operation ein neues Paar sterile OP-Handschuhe an.
      HINWEIS: Die Mäuse erholten sich nach 60 Minuten MCAo von der Narkose und wurden vor der EMS-Operation erneut betäubt.
   2. Bei Gruppen, die EMS erhalten (MCAo + EMS oder Nur-EMS-Gruppen), machen Sie mit einer Schere einen 10-15 mm breiten Hautschnitt, der sich von 1-2 mm rostral bis zum rechten Ohr bis 1-2 mm kaudal bis zum rechten Auge erstreckt.
      HINWEIS: Es wurde eine sterile Schere verwendet, um eine versehentliche Beschädigung der darunter liegenden Schläfenmuskulatur zu verhindern.
   3. Ziehen Sie Hautlappen mit Klammern zurück und identifizieren Sie visuell den Schläfenmuskel und den Schädel.
   4. Präparieren Sie den Schläfenmuskel stumpf vom Schädel weg mit einer Schere mit einer Spreiztechnik. Führen Sie eine 2-3 mm Myotomie durch, die ventral entlang des kaudalen Randes des Muskels gerichtet ist, um die ventrale Reflexion zu erleichtern.
   5. Führen Sie eine Kraniotomie mit einem Durchmesser von ~5 mm am Schädel unterhalb des reflektierten Schläfenmuskels mit einem Mikrobohrer durch.
   6. Entfernen Sie die Dura mater mit einer Pinzette, um die Pialoberfläche des Gehirns freizulegen. Seien Sie äußerst vorsichtig, um versehentliche Verletzungen des Gehirns zu vermeiden.
   7. Nähen Sie den dorsalen Rand des Musculus temporalis mit 6-0 monocrylen Filamenten an das subkutane Gewebe des dorsalen Hautlappens, so dass er bündig mit der freiliegenden Großhirnrinde
   abschließt.
   8. Verschließen Sie den Hautschnitt mit einer monofilen Naht 6-0. Setzen Sie die Maus wieder in ihren Käfig ein und überwachen Sie sie, bis sie sich von der Narkose erholt hat. Bringen Sie die Maus in ihre Gehäuseeinrichtung zurück.

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
6-0 monocryl Naht	Ethilon	697G
70% Ethanol zur Desinfektion der Operationsfläche	Walgreen
Bupivacaine 0,25% Lösung	Midwest Vet
Klemmen für die Geweberetraktion	Roboz
Doccal Naht mit Nylonbeschichtung	Doccal Corporation Sharon MA	602145PK10Re
Elektrisches Heizkissen für die Operationsoberfläche
Isofluran-Anästhesie	Piramal Critical Care Inc
Isofluran-Verabreichungsgerät	-- B6Surgivet (Isotech 4)
Mikrobohrer	Harvard Apparat
Mikrodisparierpinzette, gebogen x2	Piramal Critical Care Inc
Maus Angiogenese-Panel arrat	F & E Biotech	ARY015
Nadeltreiber	Ethilon
Betrieb Mikroskop	Olympus
Operationsfläche	Olympus Chirurgische
Schere	Roboz