Virusvermittelter Gentransfer in den dorsalen Cochlea-Kern der Maus zur lichtinduzierten auditiven Stimulation

Zusammenfassung

Quelle: Kozin, E. D., et.al. Direkte Visualisierung des dorsalen Cochlea-Kerns der Maus zur optogenetischen Stimulation der Hörbahn. J. Vis. Exp. (2015)

Dieses Video zeigt den virusvermittelten Gentransfer in den dorsalen Cochlea-Kern (DCN) der Maus, um eine lichtinduzierte auditive Stimulation zu ermöglichen. Ein viraler Vektor, der für Opsin, einen lichtempfindlichen Ionenkanal, kodiert, wird nach einer Kraniotomie und Kleinhirnaspiration in das DCN injiziert, um einen direkten Zugang zu erhalten. Die exprimierten Opsine ermöglichen es, Neuronen durch Licht zu aktivieren, was ein Modell für die Untersuchung von Reaktionen auf Hörbahnen mit Hilfe der Optogenetik darstellt.

Protokoll

Alle Verfahren, an denen Tiermodelle beteiligt sind, wurden vom örtlichen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss von JoVE überprüft.

1. Zerebelläre Aspiration

1. Mit einer 5-French-Saugkraft aspirieren Sie den äußersten Teil des linken Kleinhirns, der über dem DCN liegt, bis das DCN sichtbar ist (Abbildung 1, rechtes Bild). Entfernen Sie etwa 1/4 bis 1/3 des linken Kleinhirns. Das wichtigste Wahrzeichen neben dem DCN ist die Ampulle des oberen Bogengangs.
   HINWEIS: Die Aspiration des Kleinhirns ist der wichtigste Schritt des Protokolls. Die ger....

Ergebnisse

Abbildung 1: Die partielle Kleinhirnaspiration zeigt den Zugang zum dorsalen Cochlea-Kern. Linkes Bild: Nachdem die Maus in die Halterung eingesetzt wurde, wird ein Schnitt vertikal durch die Haut und das Weichgewebe entlang der hinteren Seite d.......

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
Stereotaxic holder	Stoelting	51500
5 French Suction	Symmetry Surgical	2777914
Dental Points	Henry Schein	100-8170
Knochenrongeur	Feine chirurgische Werkzeuge	16020-14
10 μl Hamilton syringe	Hamilton	7633-01
34 gauge, needle	Hamilton	207434
Rongeurs	Feine chirurgische Werkzeuge	16021-14