Intravenöse Verabreichung von therapeutischen Nanopartikeln in einem murinen Glioblastommodell

Zusammenfassung

Quelle: Kim, B. D., et al. Nanopartikel-Abgabe einer Oligonukleotid-Nutzlast in einem Glioblastom-Multiforme-Tiermodell. J. Vis. Exp. (2024)

Dieses Video zeigt die intravenöse Injektion von therapeutischen Nanopartikeln in eine Glioblastom-tragende Maus. Die Methode ermöglicht eine gezielte Verabreichung über die Blut-Hirn-Schranke und unterstützt die nicht-invasive Bildgebung zur Bewertung der Bioverteilung von Nanopartikeln und der therapeutischen Wirksamkeit bei Hirntumoren.

Protokoll

Alle Verfahren, an denen Tiermodelle beteiligt sind, wurden vom örtlichen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss von JoVE überprüft.

1. Verabreichung von MN-anti-miR10b

HINWEIS: In dieser Studie wurden die Injektionen ab 7 Tagen nach der Implantation einmal pro Woche für 6 Wochen durchgeführt, aber das gleiche Protokoll kann für verschiedene Injektionshäufigkeiten verwendet werden.

1. Wiegen Sie die Maus und berechnen Sie das Volumen von MN (magnetisches Nanopartikel)-Anti-miR10b, das der Maus verabreicht werden soll. Die Dosen von MN-anti-miR10b betragen 20 mg Fe (Eisen)/kg in murinen GBM-Modellen (Glioblastoma multiforme). Zum Beispiel erhält eine 20-g-Maus eine 80-μl-Dosis von 5 mg Fe/ml MN-anti-miR10b. Kontrollmäuse erhalten ein gleiches Volumen an PBS (phosphatgepufferte Kochsalzlösung), das diesem Dosierungsschema entspricht.
2. Bereiten Sie eine 28-G-Spritze mit der Dosis MN-anti-miR10b vor und stellen Sie sicher, dass sich keine Blasen in der Injektionslösung befinden.
3. Anästhesieren Sie die Maus unter 2 % -4 % Isofluran für die Induktion und 1,5 %-2 % für die Wartung mit einer Flussrate von 1,5 l/min in einer Induktionsbox. Bewegen Sie die Maus auf einen Nasenkegel und verabreichen Sie die Narkose weiter. Überprüfen Sie die Narkosetiefe und tragen Sie Tierarztsalbe auf.
4. Sterilisieren Sie den Schwanz mit einem 70%igen Isopropanoltuch und lassen Sie überschüssigen Alkohol trocknen.
5. Drehe den Schwanz, um die seitlichen Schwanzvenen oben am Schwanz zu positionieren. Zielen Sie dann auf die Vene, führen Sie die Nadel in den Schwanz ein und stellen Sie ein Vakuum her, indem Sie den Kolben zurückziehen.
6. Führen Sie die Nadel ein, bis Blut in die Spritze eindringt, was auf einen erfolgreichen Eintritt in die Vene hinweist.
7. Injizieren Sie langsam MN-anti-miR10b und ziehen Sie die Nadel nach vollständiger Abgabe zurück. Üben Sie mit Gaze Druck auf die Injektionsstelle aus, bis die Blutung aufhört.
8. Entfernen Sie die Maus aus dem Nasenkonus. Überwachen Sie die Maus, bis sie sich vollständig erholt und gehfähig ist.
   HINWEIS: Die Bolusverabreichung von Nanopartikeln kann Atemnot verursachen. Überwachen Sie die Maus sorgfältig und wenden Sie sofort leichte Herzdruckmassagen an, wenn Anzeichen von Atemnot auftreten.

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
Athyme nackte "J:NU"-Mäuse	Jackson Laboratory RRID	:IMSR_JAX:007850	Immungeschwächtes Mausmodell
70% Isopropoylalkohol-Tuch	Cardinal	MW-APL	Topisches antiseptisches Tuch für Tumorimplantation und Schwanzveneninjektion
Isofluran	Covetrus	11695067772	Anethesia
Isofluran-Verdampfer	SOMNI Scientific	VS6002	Anästhesiegerät
Insulinspritze 1CC 29G X 1/2"	Becton, Dickinson	324704	Spritze für die D-Luciferin-Injektion und die Schwanzveneninjektion von Nanopartikeln