Visualisierung cyanobakterieller extrazellulärer Vesikel mittels Transmissionselektronenmikroskopie

Abstract

Quelle: Biller, S. J., et al. Isolierung und Charakterisierung cyanobakterieller extrazellulärer Vesikel. J. Vis. Exp. (2022)

Dieses Video zeigt die Präparation von extrazellulären Cyanobakterienvesikeln für die Transmissionselektronenmikroskopie durch Negativfärbung, die eine hochauflösende Visualisierung der Vesikelmorphologie, -größe und -reinheit für strukturelle und vergleichende Analysen ermöglicht.

Protocol

1. Charakterisierung der isolierten Vesikel

1. Führen Sie eine negative Färbungs-Transmissionselektronenmikroskopie durch (siehe Materialtabelle) (TEM - Transmissionselektronenmikroskopie; Partikelgröße, Struktur, Reinheit).
   1. Um die Bildqualität zu verbessern, wird die Oberfläche eines ehemals beschichteten TEM-Gitters mit Hilfe eines Glimmentladungssystems nach den Richtlinien des Herstellers (siehe Materialtabelle) entglichen.
   2. ~5 μl der Vesikelprobe vorsichtig auftragen und 5 Minuten ruhen lassen
      >HINWEIS: Proben mit Vesikelkonzentrationen >10^{9 ....}

Materials