Vorbereitung einer Streptococcus-mitis-Kultur für Wirt-Pathogen-Interaktionsstudien

Zusammenfassung

Quelle: Naji, A., et al. Untersuchung des oxidativen Stresses, der durch die Streptokokken der Mitisgruppe bei Caenorhabditis elegans verursacht wird. J. Vis. Exp. (2019).

Dieses Video zeigt die Methode zur Kultivierung von Streptococcus mitis unter mikroaerophilen Bedingungen unter Verwendung von Todd-Hewitt-Hefeextrakt oder THY-Agar-Medium, um Bakterienkulturen für Wirt-Pathogen-Interaktionsstudien vorzubereiten.

Protokoll

1. Vorbereitung von Streptokokken der Mitisgruppe auf eine Infektion

1. Streichen Sie die gewünschten Streptokokkenstämme auf dem 100 mm x 15 mm großen THY-Agar (Todd-Hewitt-Hefeextrakt) aus (wenn die Platten bei 4 °C gelagert wurden, wärmen Sie die Platten auf 37 °C vor, bevor Sie die jeweiligen Stämme streifen), inkubieren Sie die Platten dann über Nacht bei 37 °C (~18 h) in einem Kerzenglas, um eine mikroaerophile Umgebung für das Wachstum der Streptokokken zu schaffen (die gestreiften Platten können eine Woche lang bei 4 ° gelagert werden). C).
2. Zur Vermehrung klinischer Isolate von Streptokokken verwenden Sie tryptischen Sojablutagar. Inkubieren Sie die Platten bei 37 °C in einem Kerzenglas über Nacht (~18 h).
3. Am nächsten Tag nehmen Sie die Platten aus dem Kerzenglas und entnehmen Sie isolierte Kolonien mit einer sterilen Schlaufe. Beimpfen Sie 15 mL sterile konische Röhrchen mit 2 mL THY-Brühe. Zur Vermehrung klinischer Isolate von Streptokokken ist die THY-Bouillon mit 5 % v/v Schafsblut zu ergänzen. Verschließen Sie die Verschlüsse fest und inkubieren Sie die Röhrchen bei 37 °C unter statischen Bedingungen.

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
BD Bacto Todd Hewitt Brühe	Fisher Scientific	DF0492-17-6
Hefeextrakt	Fisher Scientific	Nr. BP1422-500
Serologische Einwegpipetten aus Polystyrol 10 mL	Fisher Scientific	07-200-574
Serologische Einwegpipetten aus Polystyrol 25 mL	Fisher Scientific	07-200-575
Falcon Bakteriologische Petrischalen mit Deckel (35 mm x 10 mm)	Fisher Scientific	Tel.: 08-757-100A
Petrischale mit durchsichtigem Deckel (60 mm x 15 mm)	Fisher Scientific	FB0875713A
Petrischalen mit klarem Deckel (100 mm x 15 mm)	Fisher Scientific	FB0875712
S. mitis ATCC 49456
Agar