Durchführung der intratrachealen bakteriellen Verabreichung in einem Mausmodell

Zusammenfassung

Quelle: Venuprasad, K., et al. Intratracheale Verabreichung von Haemophilus influenzae in Mausmodellen zur Untersuchung von Atemwegsentzündungen. J. Vis. Exp. (2016)

Dieses Video zeigt die intratracheale Verabreichung eines lungenpathogenen bakteriellen Inokulums an eine anästhesierte Maus, um eine Infektion der unteren Atemwege zu modellieren.

Protokoll

Alle Verfahren, an denen Tiermodelle beteiligt sind, wurden vom örtlichen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss von JoVE überprüft.

1. Intratracheale (i.t.) Instillation

1. Injizieren Sie der Maus intraperitoneal (i.p.) 0,1 ml/10 g Körpergewicht der Maus mit 150 mg/ml Ketamin + 20 mg/ml Xylazinlösung. Der Eingriff sollte in der Haube mit einer Lichtquelle durchgeführt werden, um das Tier warm zu halten.
2. Drücken Sie den Interdigitalraum der Maus zusammen, um sicherzustellen, dass die Maus ausreichend betäubt ist.
3. Platzieren Sie die Maus auf der Rückseite. Rasieren Sie den ventralen Bereich des Halses und desinfizieren Sie mit Chlorhexidin und 70%igem Ethylalkohol.
4. Heben Sie die Haut des oberen ventralen Teils des Halses mit einer Rattenzahnzange an. Machen Sie mit einem Skalpell einen kleinen Schnitt (0,5-1,0 cm) über dem Thymus und präparieren Sie den Muskel vorsichtig, um die Luftröhre freizulegen.
   1. Injizieren Sie mit einer 1-ml-Spritze und einer 27-G-Nadel langsam 0,05 ml Luft, gefolgt von 0,05 ml nicht typisierbarem Haemophilus influenzae (NTHi) oder Kochsalzlösung als Kontrolle, gefolgt von weiteren 0,05 ml Luft. Halten Sie das Tier ca. 1 Minute lang senkrecht.
5. Verschließen Sie den Schnitt mit chirurgischem Kleber. Halten Sie die Maus seitlich liegend und warm für ca. 10 min.

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
Geschickte schnelle Lösung	Sigma	GS500-500ML
Spritzennadel 20/26 G	BD	REF305115/175
1 mL Spritze	BD	REF-309602
Präparierschere, gerade, 10 cm lang	Kentwissenschaftlich	INS600393
Irispinzette, gezahnt, 10 cm lang	Kentwissenschaftlich	INS650915
Pinzette 5 Edelstahl, 11 cm lang	Kentwissenschaftlich	INS600095