Präzise und Hochdurchsatzanalyse des Bakterienwachstums mit einem Mikroplattenleser

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Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Quelle: Kurokawa, M., et al. Präzise, Hochdurchsatzanalyse des Bakterienwachstums. J. Vis. Exp. (2017)

Dieses Video demonstriert die Hochdurchsatzquantifizierung des Bakterienwachstums mit einem Mikroplattenleser. Er beschreibt die Schritte, die bei der Kulturvorbereitung, der optischen Dichtemessung und der Analyse der Wachstumsdynamik erforderlich sind.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Echtzeit-Aufzeichnung des Wachstums
1. Zeichnen Sie ein 96-Well-Platten-Piktogramm (8 × 12-Tabelle), um die Positionen der inokulierten Kulturproben auf der 96-Well-Platte anzuzeigen. Druck die Tabelle aus und nutze sie als Referenz für das Experiment.
  ANMERKUNG: Die an den Rändern der Mikroplatte liegenden Brunnen sollten aufgrund der Verdunstung nur ein leeres Medium enthalten.
2. Setzen Sie eine sterilisierte 96-Wellen-Mikroplatte mit flachem Boden und Deckel, P-1000, 1000-μL-Pipettenspitzen, P-200- und 200-μL-Pipettenspitzen, mehrere 1,5-mL-Mikroröhren, eine 8-Mehrkanal-Pipette, ein sterilisiertes Re....

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Materials

List of materials used in this article
Name	Company	Catalog Number
Dikaliumphosphat	Wako	164-04295
Monokaliumphosphat	Wako	166-04255
Ammoniumsulfat	Wako	019-03435
Magnesiumsulfat-Heptahydrat	Wako	138-00415
Thiamin-HCl	Wako	201-00852
Traubenzucker	Wako	049-31165
Hcl	Wako	080-01066
Eisen(II)-Sulfatheptahydrat	Wako	094-01082
KOH	Wako	168-21815
Glycerin	Wako	075-00611
Pipettenspitzen, 200 μL	WATSON	110-705Y
Pipettenspitzen, 1.000 μL	WATSON	110-8040
Mikroröhre (1,5 ml)	WATSON	131–715C
8-Mehrkanal-Pipette	WATSON	NT-8200
Pasorina-Rührer	ALS EINHEIT	2-4990-02
Glaszylinder (200 mL)	ALS EINHEIT	1-8562-07
Präzisions-pH-Messgerät	ALS EINHEIT	AS800 / 1-054-01
Pipetman P-200	GILSON	1-6855-05
Pipetman P-1000	GILSON	1-6855-06
Mikroröhrenständer	BM-Biografie	801-02Y
Wirbel	BM-Biografie	BM-V1
Corning Costar 96-Well-Mikroplatte mit Deckel (flacher Boden, klar)	Sigma-Aldrich	Corning, 3370
Corning Costar Reagenzreservoir (50 mL)	Sigma-Aldrich	Corning, 4870
EPOCH2	BioTek	2014-EP2-002 / EPOCH2T
BIO Clean Bench	Panasonic	MCV-B131F
Bakterienstämme	Organisation der Stammbank; Nationales Bio-Ressourcen-Projekt (NBRP) in Japan

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