Überwachung des bakteriellen Wachstums in unterschiedlichen Medienformulierungen mit einem automatisierten Mikrobioreaktor

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Quelle: Hemmerich, J., et al. Protokoll zur Optimierung der heterologen Proteinproduktion unter Verwendung automatisierter Mikrobioreaktortechnologie. J. Vis. Exp. (2017).

Dieses Video demonstriert den Einsatz eines automatisierten Mikrobioreaktors zur Überwachung des Bakterienwachstums und der Sekretion fluoreszierender Proteine als Reaktion auf unterschiedliche Medienformulierungen. Ein gentechnisch verändertes Bakterium, das ein sekretorisches fluoreszierendes Protein exprimiert, wird unter Antibiotikaselektion kultiviert und in nährstoffvariierte Brunnen impft. Echtzeit-optische Messungen der Zelldichte und Fluoreszenz ermöglichen eine vergleichende Analyse der Proteinproduktion unter verschiedenen Wachstumsbedingungen.

Protokoll

1. Vorbereitung von Materialien und Definitionsverfahren
ANMERKUNG: Es wird empfohlen, die experimentellen Methoden auf detaillierter Ebene zu definieren und festzulegen. Diese Standardisierung stellt sicher, dass unterschiedliche Ergebnisse auf intrinsische biologische Variabilität oder unterschiedliche Medienzusammensetzungen zurückzuführen sind.
ANMERKUNG: Medienstock-Lösungen: Bereiten Sie individuelle Lagerlösungen für alle untersuchten Medienkomponenten vor. Bereiten Sie hochkonzentrierte Bestände vor, um die Verdünnung verschiedener Volumina für alle Komponenten zu ermöglichen. Das bedeutet, dass nach d....

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Ergebnisse

Abbildung 1: Screenshot aus der Volumenpipettenliste zur Sensitivitätsanalyse. Einträge in der ersten Spalte weisen allen Bänden einer Zeile eine eindeutige Kennung zu; diese Identifizierung ist die MTP-Bohrlochnummer des Zielkultivierungs-.......