Visualisierung der Harnwegsinfektion in einem Mausmodell mittels Biolumineszenz

Abstract

Quelle: Luyts, N., et al. Longitudinale Nachbeobachtung von Harnwegsinfektionen und deren Behandlung bei Mäusen mittels Biolumineszenzbildgebung. J. Vis. Exp. (2021).

Dieses Video demonstriert die Induktion und Verfolgung einer Harnwegsinfektion in einem Mausmodell unter Verwendung biolumineszenter E. coli, die in die Blase injiziert wird, wo bakterielle Adhäsion, Invasion und intrazelluläre Replikation stattfinden. Das vom biolumineszente Operon ausgesendetes Licht dient als Echtzeit-Marker für die Bakterienbelastung während des Infektionsverlaufs.

Protocol

Alle Verfahren, die Tiermodelle betreffen, wurden vom örtlichen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem JoVE veterinärmedizinischen Überprüfungsausschuss überprüft.

1. Impfung der Tiere

1. Vorbereitung der Tiere
   1. Wählen Sie den gewünschten Mausstamm je nach Forschungsfrage und Verfügbarkeit von Knock-out-Linien, experimentellen Details und Unterschieden in der UTI-Anfälligkeit. Beachte, dass die transurethrale Katheterisation bei weiblichen Mäusen einfacher ist. Verwenden Sie keine Tiere jünger als 8 Wochen, da sie immunologisch unreif sind. Hier wurden 12 Wochen alte weibliche C57Bl/6J-Mäuse verwendet.
   2. Bes....

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Anästhesie-Verdampfer	Harvard-Apparat begrenzt	N/A	https://www.harvardapparatus.com/harvard-apparatus-anesthetic-vaporizers.html
Baytril 100 mg/mL	Bayer	N/A	Enrofloxacin
BD Insyte Autoguard 24 GA	BD	382912	Gelber Angiokatheter, verwenden Sie sterile Kunststoffspitze zur Instillation
C57Bl/6J-Mäuse	Janvier	N/A
Zentrifuge 5804R	Eppendorf	EP022628146
Dropsense 16	Unchained Labs	Trinean	um eine OD von 600 nm zu messen
Dulbeccos phosphatgepufferte Kochsalzlösung, Gibco	ThermoFisher Scientific	REF 14040-083
Ethanol 70 % denaturiertes 5L	VWR international	85825360
Falcon 14ml Rundboden Polystyrolröhre, Schnappskappe	Corning	352057
Falcon 50ml Cellstart	Greiner	227285
Hamilton GASDICHTE Spritze, PTFE-Schlurverriegelung, 100 μL	Sigma-Aldrich	26203	um eine langsame bakterielle Instillation von 50 μL zu gewährleisten.
Inokulationsschleife	Roth	6174.1	Halter: Kunst. Nr. 6189.1
Iso-Vet 1000 mg/g	Dechra Veterinärprodukte	N/A	Isoflurane
IVIS-Spektrum In vivo Bildgebungssystem	PerkinElmer	REF 124262	Bildgebungsgerät