Quelle: Jung, A. L. et al. Legionella pneumophila äußere Membranvesikel: Isolierung und Analyse ihres proinflammatorisken Potenzials bei Makrophagen. J. Vis. Exp. (2017)Dieses Video demonstriert die Isolierung von äußeren Membranvesikeln (OMVs) aus Legionella pneumophila mittels sequentieller Zentrifugation, steriler Filtration und Ultrazentrifugation. Die gereinigten OMVs, angereichert mit Membranproteinen und Lipopolysacchariden, eignen sich für Studien zur Wirts-Pathogen-Interaktion.
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Bakterielle Pathogenese und Wirtsinteraktionen
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Praxis und Theorie für jedes Experiment
Inhaltsverzeichnis
Bakterielle Pathogenese und Wirtsinteraktionen
Beginnen Sie mit Röhren, die das nicht replizierende persistente oder NRP-Stadium von Mycobacterium tuberculosis enthalten, das eine verdickte äußere Schicht aufweist.Fügen Sie Glasperlen in ein Rohr und schütteln Sie es, um die äußere Schicht der Mykobakterien mechanisch zu zerstören und so die Durchlässigkeit zu erhöhen.Als Nächstes wird die mit Perlen geschlagene mykobakterielle Suspension in ein frisches Rohr gegeben.Fügen Sie fluoreszenzmarkiertes Rifampicin, ein...
Video Duration: 1 minute and 35 secondsBeginnen Sie mit einer Suspension des vogelpathogenen E. Coli oder APEC im Wachstumsmedium.APEC ist ein gramnegatives Bakterium, das Geflügel infiziert, indem es durch die Atemwege eindringt.Nach dem Durchbruch der Schleimhaut haftet APEC an Epithelzellen, vermehrt sich lokal und stört die Epithelbarriere, um in den Blutkreislauf zu gelangen. Die Bakterien breiten sich dann auf mehrere Organe aus und verursachen systemische Infektionen.Fügen Sie jedem Brunnen einer Mehrfachbrunnenplatte mit...
Video Duration: 1 minute and 31 secondsQuelle: Spiesz, E. M. et al., Dreidimensionales Mustern von Engineered Biofilms mit einem Do-it-yourself-Bioprinter. J. Vis. Exp. (2019)Dieses Video demonstriert eine Methode zum Vergleich von 3D-gedruckten Alginatmustern, die entweder Kontroll- oder gentechnisch veränderte Bakterienstämme enthalten. Der Teststamm bildet bei der Induktion Curli-Fasern, die die Alginat-Hydrogelstruktur verstärken. Nach der Behandlung mit einer calcium-chelierenden Lösung bleibt nur das Testmuster erhalten, was...
Video Duration: 2 minutes and 11 secondsQuelle: Tay, S. B., et al. Antivirulente Störung pathogener Biofilme mit Engineered Quorum-Quenching Lactonasen. J. Vis. Exp. (2016)Das Video demonstriert eine Methode zur Quantifizierung der Biofilmbiomasse in einem pathogenen Bakterium, indem unbehandelte Kontrollen mit Proben verglichen werden, die mit einem Quorum-Abschreckungsenzym behandelt wurden. Das Enzym stört die bakterielle Signalübertragung während der frühen Inkubation und verringert so die Zelladhäsion. Nach dem Waschen und...
Video Duration: 3 minutes and 38 secondsQuelle: Schlafer, S, und Frost Kristensen, M. Überwachung des extrazellulären pH-Werts in Reichsübergreifenden Biofilmen mittels Konfokalmikroskopie. J. Vis. Exp. (2020)Dieses Video demonstriert die Kultivierung von Streptococcus mutans- und Candida albicans-Reichs-Biofilmen unter oralähnlichen Bedingungen, um bakteriel-pilz-Interaktionen zu modellieren und so die Untersuchung mikrobieller Synergie, glucanvermittelter Adhäsion und acidogener Virulenz in der oralen Pathogenese zu untersuchen.
Video Duration: 3 minutes and 51 secondsQuelle: Kurz, D. L., et al. Mikrofluidische Plattform zur Untersuchung von Bioverstopfungen in porösen Medien. J. Vis. Exp. (2022)Das Video demonstriert den Einsatz eines mikrofluidischen Geräts zur Untersuchung der Biofilmbildung. Eine bakterielle Suspension wird in den Mikrokanal eingeführt, gefolgt von einer Inkubation, um die Entwicklung von Biofilmen zu ermöglichen. Anschließend wird der Fluss wieder aufgenommen, und Drucküberwachung zusammen mit Bildgebung wird eingesetzt, um...
Video Duration: 4 minutes and 35 secondsQuelle: Perinbam, K., und Siryaporn, A. Ein schneller, bildbasierter bakterieller Virulenztest mit Amöben. J. Vis. Exp. (2018)Dieses Video demonstriert eine schnelle, bildbasierte Methode zur Beurteilung der bakteriellen Virulenz, indem Amöben mit oberflächengebundenen oder planktonischen Bakterien inkubiert, ein Calcein-Acetoxymethylester (Calcein-AM) Agarose-Pad angewendet und Fluoreszenz bildgeblich zur Erkennung von Wirtszellschäden durchgeführt wird.
Video Duration: 2 minutes and 33 secondsQuelle: Bucher, T. et al. Methodologien zur Untersuchung von B. subtilis-Biofilmen als Modell zur Charakterisierung kleiner Molekül-Biofilminhibitoren. J. Vis. Exp. (2016)Dieses Video demonstriert einen Pellicle-Formationsassay mit Bacillus subtilis zur Bewertung von Kleinmolekülinhibitoren, die die Matrixsynthese und die Entwicklung von Biofilmen stören, und bietet ein Modell zur Screening von Verbindungen, die selektiv oberflächenassoziiertes Wachstum hemmen, ohne frei schwebende Zellen zu...
Video Duration: 2 minutes and 57 secondsQuelle: Bucher, T. et al. Methodologien zur Untersuchung von B. subtilis-Biofilmen als Modell zur Charakterisierung kleiner Molekül-Biofilminhibitoren. J. Vis. Exp. (2016).Dieses Video zeigt, wie die Integrität der Biofilmmatrix die bakterielle Resistenz gegen Ethanol beeinflusst, indem es koloniebildende Einheiten in unbehandelten und inhibitorgestörten Biofilmen vergleicht. Reduzierte CFUs in inhibitorbehandelten Proben zeigen, dass die extrazelluläre Matrix unerlässlich ist, um...
Video Duration: 3 minutes and 23 secondsQuelle: Beaudoin, T., et al. Visualisierung der Auswirkungen von Sputum auf die Biofilmentwicklung mit einem Kammer-Coverglass-Modell. J. Vis. Exp. (2016)Dieses Video demonstriert die Verwendung eines kammerbasierten Deckglases zur Untersuchung der Auswirkungen von Patienten durch Mukoviszidose abgeleiteten Spötterwirtsfaktoren auf die Entwicklung bakterieller Biofilme.
Video Duration: 2 minutes and 34 secondsBeginnen Sie mit einer bakteriellen Suspension in einem Nährstoffmedium.Fügen Sie die Federung auf eine Mehrfachbrunnenplatte hinzu und inkubieren Sie.Die Nährstoffe im Medium fördern das Wachstum und die Bindung von Bakterien.Die haftenden Bakterien sezernieren extrazelluläre polymere Substanzen, die aus Polysacchariden, Proteinen und DNA bestehen, um eine Biofilmschicht zu bilden.Waschen Sie mehrmals mit Puffer, um ungebundene Bakterien zu entfernen.Wenden Sie die Platte um, um die...
Video Duration: 1 minute and 19 secondsQuelle: Hu, Y. et al. Analyse der Wechselwirkungen zwischen Endobiotika und menschlicher Darmmikrobiota mittels In-vitro-Badefermentationssystemen. J. Vis. Exp. (2019)Dieses Video demonstriert den Einsatz der Dünnschichtchromatographie (TLC) zur Bewertung des Abbaus von Exopolysacchariden (EPS) durch die menschliche Kokalmikrobiota. EPS-Fragmente in Fermentationssupernatanten werden anhand von Größe und Polarität mittels TLC getrennt und dann nach kohlenhydratspezifischer Färbung als farbige...
Video Duration: 2 minutes and 23 secondsQuelle: Schumacher, D., und Sogaard-Andersen, L. Fluoreszenz-Lebendzellbildgebung des vollständigen vegetativen Zellzyklus des langsam wachsenden sozialen Bakteriums Myxococcus xanthus. J. Vis. Exp. (2018)Dieses Video demonstriert die Verwendung von Live-Zell-Bildgebung zur Verfolgung fluoreszenzmarkierter Chromosomenursprünge während der bakteriellen Zellteilung. Es erfasst die Dynamik der Chromosomensegregation mittels Zeitraffer-Phasenkontrast und Fluoreszenzmikroskopie.
Video Duration: 6 minutes and 21 secondsQuelle: Tokunou, Y. et al., Elektrochemische Detektion des Deuterium-kinetischen Isotopeneffekts auf den extrazellulären Elektronentransport in Shewanella oneidensis MR-1. J. Vis. Exp. (2018)Dieses Video demonstriert den Zusammenbau und Betrieb eines elektrochemischen Reaktormodells, das zur Simulation der Biofilmbildung auf Elektrodenoberflächen entwickelt wurde. Kontrollierte elektrochemische Stimulation fördert die mikrobielle Adhäsion, was zur allmählichen Entwicklung eines bakteriellen...
Video Duration: 3 minutes and 3 secondsQuelle: Naji, A. et al. Untersuchung des oxidativen Stress, der durch die Mitisgruppe Streptokokken in Caenorhabditis elegans verursacht wird. J. Vis. Exp. (2019)Dieses Video demonstriert die Verwendung von grün fluoreszierendem Protein markierten SKN-1 in C. elegans zur Überwachung oxidativen Stresses durch Verfolgung der grünen Fluoreszenz. Würmer, die S. gordonii ausgesetzt waren, zeigen eine starke nukleare Fluoreszenz, was pathogeninduzierten Stress bestätigt, während diejenigen, die mit E.
Video Duration: 3 minutes and 12 secondsQuelle: Nielsen, T. B., et al., Murine Oropharyngeal Aspiration Model of Beatmator-assoziierte und im Krankenhaus erworbene bakterielle Pneumonie. J. Vis. Exp. (2018)Dieses Video demonstriert das Verfahren, bei dem Bakterien über den Oropharynx in die Lunge einer anästhesierten Maus geleitet werden, um eine Lungeninfektion auszulösen und eine Immunantwort auszulösen.
Video Duration: 3 minutes and 6 secondsQuelle: Zhao, K. et al. Ein In-vitro-Modell zur Untersuchung der Wirkung der 5-Aminolevulinsäure-vermittelten photodynamischen Therapie auf den Biofilm von Staphylococcus aureus . J. Vis. Exp. (2018)Das Video demonstriert ein photodynamisches Therapieprotokoll zur Bewertung antibakterieller Effekte auf Gram-positive bakterielle Biofilme. Biofilme werden in vier Gruppen unterteilt: Zwei erhalten einen Photosensibilisierer-Vorläufer, zwei erhalten einen Puffer. Alle werden im Dunkeln inkubiert,...
Video Duration: 2 minutes and 59 secondsSource: Escudero, J. A., et.al. Testing the Role of Multicopy Plasmids in the Evolution of Antibiotic Resistance. J. Vis. Exp. (2018)This video demonstrates how escalating cefazidime exposure is used to compare the survival of three E. coli strains with different copies of the ampicillin resistance gene. It shows that only the strain with a multicopy plasmid survives at higher drug levels, highlighting how increased gene copy number accelerates resistance evolution.
Video Duration: 3 minutes and 14 secondsSource: Saragliadis, A., et al. Producing Gene Deletions in Escherichia coli by P1 Transduction with Excisable Antibiotic Resistance Cassettes. J. Vis. Exp. (2018)This video demonstrates the phage-mediated transfer of donor DNA carrying an excisable antibiotic resistance cassette into Escherichia coli. The integrated cassette replaces the target gene via homologous recombination, resulting in a stable gene deletion.
Video Duration: 3 minutes and 36 secondsSource: Claes, J., et al, In Vitro and In Vivo Model to Study Bacterial Adhesion to the Vessel Wall Under Flow Conditions. J. Vis. Exp. (2015).This video demonstrates a method for studying host-pathogen interactions using a micro-parallel plate flow chamber seeded with human primary endothelial cells. Following endothelial cell activation by an ionophore and perfusion with fluorescently labeled bacteria, the cells release von Willebrand factor (VWF), which binds bacterial adhesins under shear...
Video Duration: 3 minutes and 10 secondsSource: Holt-Torres, P. S. et al. Evaluation of Antimicrobial Activities of Nanoparticles and Nanostructured Surfaces In Vitro. J. Vis. Exp. (2023)This video demonstrates the use of the focused-contact exposure method to evaluate the antibacterial activity of nanostructured surfaces. It outlines the steps involved in establishing direct contact between bacteria and the nanostructured surface, incubation, bacterial collection, and colony counting to assess viability.
Video Duration: 2 minutes and 52 secondsSource: Dubois, V., et al. Identification of Virulence Markers of Mycobacterium abscessus for Intracellular Replication in Phagocytes. J. Vis. Exp. (2018)This video demonstrates the procedure of co-culturing amoebae with mutant bacterial strains to evaluate their intracellular survival and identify virulence markers through differences in colony counts.
Video Duration: 4 minutes and 15 secondsQuelle: Nagre, N., et al. Phagozytose und Bakterienbeseitigung der Alveolaren Makrophagen bei Mäusen. J. Vis. Exp. (2019).Dieses Video zeigt die Bewertung der komplementrezeptorvermittelten Phagozytose mit roten Blutkörperchen von Schafen, die mit IgM und Komplement opsonisiert sind, gefolgt von deren Aufnahme durch Mausmakrophagen. Das Ausmaß der Phagozytose wird quantifiziert, indem ein blaues chromogenes Produkt gemessen wird, das durch hämoglobinkatalysierte Oxidation von Diaminofluoren...
Video Duration: 3 minutes and 22 secondsQuelle: Zhang, S. et al. Intrakranieller subarachnoidaler Infektionsweg zur Untersuchung der Rollen von Streptococcus suis-Biofilmen bei der Meningitis in einem Mausinfektionsmodell. J. Vis. Exp. (2018).Dieses Video demonstriert die Detektion der Zielgenexpression in einem bakteriell infizierten Mausgehirn. RNA wird extrahiert, mit einem DNA-abbauenden Enzym behandelt und rückwärts in cDNA transkribiert. Die cDNA wird durch thermischen Kreislauf mit genspezifischen Primern amplifiziert, während...
Video Duration: 4 minutes and 2 secondsQuelle: Radulovic, K., et al. Injektionen von Lipopolysaccharid in Mäuse, um das Eindringen mikrobieller Produkte nach dem Durchbruch der Darmbarriere nachzuahmen. J. Vis. Exp. (2018)Dieses Video demonstriert ein Schritt-für-Schritt-Verfahren zur intraperitonealen Injektion von Lipopolysaccharid (LPS) in Mäuse, um systemische Entzündungen zu induzieren.
Video Duration: 2 minutes and 34 secondsNehmen Sie Schweine-Nierenzellkulturen, wobei eine Kultur mit einem Inhibitor vorbehandelt wurde, der den lysosomalen pH-Wert erhöht und so den autophagisch-lysosomalen Abbau beeinträchtigt.Fügen Sie pathogene Bakterien und Zentrifugen hinzu, um den Kontakt zwischen Wirt und Erreger zu verbessern.Inkubieren, um bakterielle Invasion und Internalisierung in endozytische Vesikel zu ermöglichen.Die internalisierten Bakterien verbrauchen Wirtsnährstoffe, um sich zu vermehren, was den...
Video Duration: 1 minute and 33 secondsNehmen Sie eine adhärente Kultur von Maus-Makrophagen.Behandle den Test gut mit einem Puffer, der Wnt5A, ein Signalmolekül, enthält, und die Kontrolle nur mit einem Puffer.Mit einem bakteriellen Erreger infizieren und inkubieren.In den Testzellen aktiviert Wnt5A eine Signalkaskade, die die Umstrukturierung des Zytoskeletts fördert und die bakterielle Aufnahme in Phagosomen fördert, während Kontrollzellen ohne dieses Signal weniger Bakterien internalisieren.Waschen Sie, um nicht internalisierte...
Video Duration: 1 minute and 36 secondsQuelle: In J. G. et al. Humane Colonoid-Monoschichten zur Untersuchung von Wechselwirkungen zwischen Krankheitserregern, Kommmensalen und dem intestinalen Epithel des Wirts. J. Vis. Exp. (2019).Dieses Video demonstriert das Verfahren zur Kultivierung von Colon-abgeleiteten Epithelzellen auf einem kollagenbeschichteten Transwell-System, um eine schleimproduzierende Monoschicht zu erzeugen, die die Darmbarriere modelliert und Wirts-Pathogen-Interaktionsstudien ermöglicht.
Video Duration: 2 minutes and 4 secondsQuelle: Luukinen, H., et al. Modellierung von Tuberkulose bei Mycobacterium marinum-infizierten erwachsenen Zebrafischen. J. Vis. Exp. (2018).
Video Duration: 2 minutes and 54 secondsQuelle: Sigal, N., et al. RNA-Reinigung aus intrazellulär gezüchteten Listeria monocytogenes in Makrophagenzellen. J. Vis. Exp. (2016)Dieses Video demonstriert die RNA-Extraktion aus Listeria monocytogenes , die aus infizierten Maus-Makrophagen isoliert wurden. Das Protokoll konserviert RNA, lysiert Zellen mittels Phenol-Chloroform und Wärme und trennt RNA durch Zentrifugation. Salz und Ethanol, kombiniert mit der Kaltinkubation, fördern die RNA-Ausfällung. Die resultierende RNA erfasst die vom...
Video Duration: 3 minutes and 36 secondsQuelle: Vonaesch, P. et al., Immunfluoreszenzanalyse der Stressgranulatbildung nach bakterieller Herausforderung von Säugetierzellen. J. Vis. Exp. (2017)Dieses Video demonstriert die Infektion von Epithelzellen mit dem pathogenen Bakterium Shigella flexneri und die daraus resultierende zelluläre Reaktion des Wirts. Bakterielle Effektorproteine stören die Wirtstranslation und lösen die Bildung membranloser Organellen aus, sogenannte Stressgranulate, die die adaptive Reaktion der Zelle auf...
Video Duration: 2 minutes and 51 secondsBeginnen Sie mit einer Immunzellkultur, die mit pathogenen Bakterien infiziert ist, die intrazelluläre Inklusionskörper bilden.Die bakterielle Infektion beeinträchtigt den Antigenpräsentationsweg in den Immunzellen.Nimm eine uninfizierte Kultur als Kontrolle.Als Nächstes gib du ein Modell-Proteinantigen hinzu und inkubiere.Immunzellen internalisieren, verarbeiten und präsentieren die Modell-antigen-abgeleiteten Peptide auf MHC-I-Molekülen.Nach der Inkubation werden die Zellen gewaschen, um...
Video Duration: 1 minute and 29 secondsQuelle: Chetrit, D., et al. Anwendung von Live-Zell-Bildgebung und Kryo-Elektronen-Tomographie zur Auflösung raumzeitlicher Merkmale des Sekretionssystems Legionella pneumophila dot/icm. J. Vis. Exp. (2020).Dieses Video demonstriert die Herstellung und Bildgebung fluoreszierend markierter pathogener Bakterien. Agarose-Pads werden zunächst vorbereitet und in einem klebrigen Rahmen positioniert. Eine Suspension von genetisch veränderten Bakterien, die ein fluoreszierendes Protein exprimieren,...
Video Duration: 3 minutes and 15 secondsQuelle: Winston, J. A. et al. Cefoperazon-behandeltes Mausmodell des klinisch relevanten Clostridium difficile Stamms R20291. J. Vis. Exp. (2016)Dieses Video demonstriert das Verfahren zur Inokulation von antibiotika-vorbehandelten Mäusen mit Clostridium difficile-Sporen , um ein murines Infektionsmodell zur Untersuchung von Pathogenese und Wirtsreaktionen zu etablieren.
Video Duration: 2 minutes and 27 secondsQuelle: Winston, J. A. et al. Cefoperazon-behandeltes Mausmodell des klinisch relevanten Clostridium difficile Stamms R20291. J. Vis. Exp. (2016)Dieses Video demonstriert die Quantifizierung von Clostridium difficile in Fäkalproben aus einem infizierten Mausmodell mittels selektiver Kulturtechniken. Es beschreibt die Verfahren zur Probenentnahme, anaeroben Verarbeitung, serieller Verdünnung und Koloniezählung, um die bakterielle Besiedlung und die Wirts-Pathogen-Interaktionen zu bewerten.
Video Duration: 3 minutes and 8 secondsSource: Berens, C. et al. Applying an Inducible Expression System to Study Interference of Bacterial Virulence Factors with Intracellular Signaling. J. Vis. Exp. (2015)This video demonstrates the use of immunoblotting to assess apoptosis inhibition by the bacterial effector protein CaeB in human cells. It outlines the steps for detecting apoptotic markers following doxycycline-induced expression of pro-apoptotic proteins in host cells expressing the effector.
Video Duration: 2 minutes and 58 secondsSource: Yuan, Z., et al. Bronchoalveolar Lavage Exosomes in Lipopolysaccharide-induced Septic Lung Injury. J. Vis. Exp. (2018)This video demonstrates an in vivo mouse model for inducing and analyzing acute lung injury (ALI) using intraperitoneal administration of bacterial lipopolysaccharide. The inflammatory cascade triggered by alveolar macrophages and neutrophils leads to epithelial and endothelial barrier disruption, allowing fluid and immune cells to accumulate in the alveoli. Alveolar...
Video Duration: 2 minutes and 38 secondsSource: Li, T., et al. Studying Effects of Cigarette Smoke on Pseudomonas Infection in Lung Epithelial Cells. J. Vis. Exp. (2020).This video demonstrates how cigarette smoke extract weakens antimicrobial defense in lung epithelial cells by reducing AMP production, leading to increased bacterial invasion. The procedure measures intracellular bacterial load to assess the impact of smoke exposure on host-pathogen interactions.
Video Duration: 3 minutes and 15 secondsSource: Ahn, J. J., et al., Experimental Infection with Listeria monocytogenes as a Model for Studying Host Interferon-γ Responses. J. Vis. Exp. (2016)This video demonstrates the preparation of mouse splenocyte cultures from Listeria monocytogenes-infected mice for downstream cytokine analysis. It includes ex vivo bacteria-derived antigen stimulation and sample processing to study T cell responses.
Video Duration: 3 minutes and 2 secondsSource: Barbero, A. M., et al. Fluorescence Assays for the Study of Mycobacterium tuberculosis Interaction with the Immune Receptor SLAMF1. J. Vis. Exp. (2025)This video demonstrates the procedure for labeling host immune receptors that bind bacterial surface antigens, enabling their detection through flow cytometry.
Video Duration: 2 minutes and 26 secondsSource: Zhang, C. et al. Development and Assessment of Intracellular Infection Models for Staphylococcus aureus. J. Vis. Exp. (2025)This video demonstrates the quantification of intracellular survival of a methicillin-resistant bacterial pathogen in mouse peritoneal macrophages. It outlines the steps involved in infection, extracellular bacterial clearance, host cell lysis, and colony enumeration to assess bacterial survival within host macrophages.
Video Duration: 3 minutes and 14 secondsSource: Gutiérrez, S., et al., Isolation of Salmonella typhimurium-containing Phagosomes from Macrophages. J. Vis. Exp. (2017)This video demonstrates the magnetic isolation of phagosomes containing biotin–streptavidin bead–coated bacteria from infected macrophages. The protocol includes buffer treatments, cell disruption, magnetic separation, and washing to yield purified phagosomes for analysis.
Video Duration: 3 minutes and 37 secondsQuelle: Mills, B., et al., Optische Screening neuartiger bakteriespezifischer Sonden auf ex vivo menschlichem Lungengewebe mittels konfokaler Laserendomikroskopie. J. Vis. Exp. (2017)Dieses Video demonstriert die Echtzeitbildgebung fluoreszierend markierter Staphylococcus aureus in Suspension und Lungengewebe mittels faserbasierter konfokaler Fluoreszenzmikroskopie.
Video Duration: 2 minutes and 42 secondsQuelle: Ng, K. M., Tropini, C. Visualisierung der Darmmikrobiota-Wirt-Interaktionen mittels Fluoreszenz in situ Hybridisierung, Lektinfärbung und Bildgebung. J. Vis. Exp. (2021).Dieses Video demonstriert das Verfahren der Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung (FISH), um die Darmmikrobiota im Darmgewebe der Maus zu färben, indem fluoreszierende Sonden mit bakterieller rRNA (Ribosomal-Ribonukleinsäure) hybridisiert und die Wirtsstrukturen für mikroskopische Analysen gegenfärben werden.
Video Duration: 3 minutes and 42 secondsQuelle: Siva-Jothy, J. A. et al., Orale bakterielle Infektion und Ausscheidung bei Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2018)Dieses Video demonstriert das Verfahren zur Überwachung der bakteriellen Ausscheidung bei Drosophila, indem eine infizierte Fliege über mehrere nahrungshaltige Röhren übertragen, abgeschiedene Bakterien wiedergewonnen und lebensfähige Kolonien durch serielle Verdünnung und Panzerung quantifiziert werden.
Video Duration: 2 minutes and 2 secondsQuelle: de Vries, C. R., et al., Ein verzögertes Impfungsmodell der chronischen Wundinfektion von Pseudomonas aeruginosa . J. Vis. Exp. (2020).Dieses Video demonstriert eine biolumineszente Bildgebungstechnik zur Überwachung des Verlaufs bakterieller Infektionen in einem lebenden Mausmodell. Pathogene Bakterien, die mit dem luxABCDE-Reportersystem konstruiert wurden, senden Licht an der Infektionsstelle aus, was die Visualisierung metabolisch aktiver Bakterien ermöglicht. Durch die Abbildung...
Video Duration: 2 minutes and 2 secondsQuelle: Shi, J. et al. Screening und Identifizierung von RNA-Silencing-Suppressoren aus sekretierten Effektoren pflanzlicher Krankheitserreger. J. Vis. Exp. (2020)Dieses Video demonstriert einen Co-Infiltrationstest zur Identifizierung von Pathogen-Effektorproteinen, die die RNA-Silencing in Nicotiana benthamiana 16c unterdrücken. Ein fluoreszierender Reporter und ein Kandidat-Effektorgen werden über Agrobacterium in Pflanzenblätter abgegeben. Normalerweise degradiert RNA-Silencing die...
Video Duration: 2 minutes and 12 secondsQuelle: Niu, L., et al. Visualisierung des Makrophagen-lytischen Zelltodes während einer mykobakteriellen Infektion in Zebrafisch-Embryonen mittels intravitaler Mikroskopie. J. Vis. Exp. (2019)Dieses Video demonstriert den Einsatz der intravitalen konfokalen Mikroskopie, um den Makrophagen-lytischen Zelltod in Zebrafischembryonen nach einer Mycobacterium marinum-Infektion zu visualisieren.
Video Duration: 2 minutes and 29 secondsQuelle: Seman, B. G., et.al. Neonatales Bildgebungsmodell der gramnegativen bakteriellen Sepsis. J. Vis. Exp. (2020)Dieses Video demonstriert die Isolierung von Neutrophilen und entzündlichen Monozyten aus neonatalen Mausmilzen und deren Anwendung in einem leuchtenden bakteriellen Tötungsassay. Es behandelt mechanische Dissoziation, rote Blutkörperchenlyse, magnetische perlenbasierte Zellanreicherung, bakterielle Inkubation und Antibiotikaschutz. Zeitgesteuerte Lumineszenzmessungen zeigen eine...
Video Duration: 3 minutes and 42 secondsQuelle: Choi, Y. S., et al. In-situ-Nachweis von Bakterien in paraffineingebetteten Geweben mit einer digoxin-markierten DNA-Sonde, die auf 16S-rRNA abzielt. J. Vis. Exp. (2015).Dieses Video demonstriert die In-situ-Detektion von Bakterien in Maus-Zahnfleischgewebeschnitten mit digoxin-markierten DNA-Sonden, die auf bakterielle DNA abzielen. Der Abschnitt wird mit der Sonde inkubiert. Alkalische Phosphatase-konjugierte Antikörper, die spezifisch für Digoxin sind, werden hinzugefügt. Endogene...
Video Duration: 4 minutes and 46 secondsQuelle: Valentine, M. E. et al., Erzeugung von In-Frame-Gen-Deletionsmutanten in Pseudomonas aeruginosa und Tests auf Virulenzabschwächung in einem einfachen Mausmodell der Infektion. J. Vis. Exp. (2020)Dieses Video demonstriert die Anwendung eines biolumineszenzbasierten Bildgebungsansatzes zur Überwachung bakterieller Infektionen in einem Live-Mausmodell. Sequentielle biolumineszente und Röntgenbildgebung ermöglicht eine Echtzeitvisualisierung und anatomische Lokalisierung der Infektion, die...
Video Duration: 2 minutes and 12 secondsQuelle: Luyts, N., et al. Longitudinale Nachbeobachtung von Harnwegsinfektionen und deren Behandlung bei Mäusen mittels Biolumineszenzbildgebung. J. Vis. Exp. (2021).Dieses Video demonstriert die Induktion und Verfolgung einer Harnwegsinfektion in einem Mausmodell unter Verwendung biolumineszenter E. coli, die in die Blase injiziert wird, wo bakterielle Adhäsion, Invasion und intrazelluläre Replikation stattfinden. Das vom biolumineszente Operon ausgesendetes Licht dient als Echtzeit-Marker für...
Video Duration: 3 minutes and 14 secondsQuelle: O'Brien, V. P., et al., Rezidivierende Escherichia coli Harnwegsinfektion ausgelöst durch Gardnerella vaginalis Blasenexposition bei Mäusen. J. Vis. Exp. (2020)Dieses Video demonstriert den Einsatz der Rasterelektronenmikroskopie, um bakterielle Besiedlung und Wirts-Pathogen-Interaktionen im Blasenepithel eines vorinfizierten Mausmodells zu visualisieren.
Video Duration: 5 minutes and 23 secondsQuelle: Bernut, A., et al., Entschlüsselung und Bildgebung der Pathogenese und Cording von Mycobacterium abscessus in Zebrafisch-Embryonen. J. Vis. Exp. (2015).Dieses Video demonstriert ein Protokoll zur Isolierung und Quantifizierung des Mycobacterium abszescessus aus einem infizierten Zebrafischembryo. Das Verfahren umfasst Embryonen-Euthanasie, Gewebelyse und Homogenisierung zur Freisetzung der Bakterien, gefolgt von Zentrifugation und Resuspension in einem Tensidpuffer. Abschließend wird...
Video Duration: 2 minutes and 29 secondsQuelle: Bernut, A. et al. Entschlüsselung und Bildabbildung der Pathogenese sowie der Sicherung von Mycobacterium abscessus in Zebrafischembryonen. J. Vis. Exp. (2015)Dieses Video demonstriert ein Protokoll, das transgene Zebrafischembryonen verwendet, die fluoreszierende Makrophagen exprimieren und mit fluoreszierendem Mycobacterium abscessus rough strain infiziert sind, um Wirts-Pathogen-Interaktionen zu visualisieren. Es zeigt, wie extrazelluläre Korde die Immunausweichung ermöglichen,...
Video Duration: 2 minutes and 18 secondsBeginnen Sie mit einer kontaminierten Wasserprobe, die wahrscheinlich fäkale Coliforme, einschließlich E. coli, enthält.Führen Sie eine serielle Verdünnung in destilliertem Wasser durch, um Trübung und mikrobielle Belastung zu reduzieren.Mische die gewünschte verdünnte Probe mit dem Nährmedium und fülle sie in einen mikrofluidischen Chip.Verwenden Sie Vakuumfiltration, um Bakterien auf einer Membran innerhalb des serpentinischen Kanals des Chips einzufangen.Fügen Sie dem oberen Kammer Nährstoff...
Video Duration: 1 minute and 28 secondsQuelle: Makowski, Ł., et al. Lebendzellbildgebung des Lebenszyklus des bakteriellen Räubers Bdellovibrio bacteriovorus mittels Zeitrelapse-Fluoreszenzmikroskopie. J. Vis. Exp. (2020)Dieses Video zeigt Zeitraffer-Fluoreszenzbildgebung von Bdellovibrio bacteriovorus , der sich auf immobilisierten E. coli unter einem Agarose-Pad ernährt, was eine Echtzeitvisualisierung intrazellulärer Replikation und Nachkommenfreisetzung ermöglicht, um bakterielle Prädation und Wirt-Pathogen-Interaktionen zu...
Video Duration: 3 minutes and 21 secondsQuelle: Tay, S. B., et.al. Antivirulente Störung pathogener Biofilme mit Engineered Quorum-Quenching Lactonasen. J. Vis. Exp. (2016)Dieses Video demonstriert den Prozess der Hemmung der Biofilmbildung, indem ein Enzym eingeführt wird, das die Signalübertragung der bakteriellen Zellen stört. Das Enzym verhindert, dass die Bakterien extrazelluläre polymere Substanzen produzieren, wodurch die Biofilmentwicklung auf einer Glasboden-Mikroschüssel reduziert wird. Abschließend wird die...
Video Duration: 3 minutes and 47 secondsQuelle: Collins, A. J. et al., Etablierung stabiler binärer Kulturen symbiotischer Saccharibakterien aus der Mundhöhle. J. Vis. Exp. (2021)Dieses Video demonstriert den Einsatz der Polymerase-Kettenreaktion (PCR) zur Nachweisung von Saccharibakterien in einer binären Kultur mit Actinomyces. Das Protokoll beschreibt DNA-Amplifikation und Gelelektrophorese, um eine stabile Wirts-Parasiten-Interaktion zu bestätigen.
Video Duration: 2 minutes and 6 secondsQuelle: Matthysse, A. G. Die Haftung von Bakterien an Pflanzenoberflächen, gemessen im Labor. J. Vis. Exp. (2018).Dieses Video demonstriert die Bewertung der bakteriellen Anhaftung an Pflanzenwurzeln mittels Phasenkontrastmikroskopie. Wurzelproben von mit Bakterien inkubierten Setzlingen werden zunächst montiert, um freie Bakterien zu überprüfen. Die Proben werden dann gewaschen, um lose angesetzte Bakterien zu entfernen, und mit einem geeigneten Deckdeckel wieder montiert, um Schäden zu...
Video Duration: 2 minutes and 14 secondsQuelle: Matthysse, A. G. Die Haftung von Bakterien an Pflanzenoberflächen, gemessen im Labor. J. Vis. Exp., (2018)Dieses Video demonstriert ein Protokoll zur Messung der Wurzelbesiedlung von Tomatensämlingen durch Wildtyp- und cellulosearme pathogene Bakterien. Lebensfähige Zählungen eng haftender Bakterien zeigen eine stärkere Haftung und Mikrokoloniebildung durch den Wildtyp-Stamm, was die Rolle von Cellulose bei der stabilen Wurzelbesiedlung unterstreicht.
Video Duration: 2 minutes and 30 secondsQuelle: Brown, A. O., und Orihuela, C. J. Visualisierung von Streptococcus pneumoniae in kardialen Mikroläsionen und anschließende kardiale Remodellierung. J. Vis. Exp. (2015)Das Video demonstriert die Immunfärbung chemisch fixierter kardialer Mausschnitte, um pathogene Bakterien zu visualisieren, die in infektionsinduzierten Mikroläsionen lokalisiert sind. Der Prozess umfasst Gewebewäsche, Membranpermeabilisierung, Blockieren unspezifischer Stellen, Antikörpermarkierung, nukleare Gegenfärbung...
Video Duration: 3 minutes and 2 secondsQuelle: Specker, J. T. et al. Untersuchung der mikrobiellen Kooperation mittels bildgebender Massenspektrometrieanalyse von Bakterienkolonien, die während der Infektion auf Agar und im Gewebe gewachsen sind. J. Vis. Exp. (2022)Dieses Video demonstriert die Verwendung der matrixunterstützten Laser-Desorption/Ionisationsmassespektrometrie (MALDI), um die Aminosäureverteilung im Darmgewebe von Mäusen zu visualisieren, die mit Clostridioides difficile infiziert sind, allein oder in Kombination mit...
Video Duration: 1 minute and 45 secondsQuelle: Bucher, T., et al., Methodologien zur Untersuchung von B. subtilis-Biofilmen als Modell zur Charakterisierung kleiner Molekül-Biofilminhibitoren. J. Vis. Exp.(2016)Dieses Video demonstriert die Vorbereitung ausgewachsener bakterieller Biofilmkolonien für hochauflösende Bildgebung. Es behandelt Fixierung, Dehydration, Montage und Metallbeschichtungsschritte, um die Biofilmmorphologie zu erhalten und zu visualisieren.
Video Duration: 3 minutes and 54 secondsQuelle: Beaudoin, T., et al. Visualisierung der Auswirkungen von Sputum auf die Biofilmentwicklung mit einem Kammer-Coverglass-Modell. J. Vis. Exp. (2016)Dieses Video demonstriert eine in-vitro-Methode , um zu untersuchen, wie patientenabgeleitetes Mukoviszidose-Sputum die bakterielle Biofilmbildung beeinflusst. Durch Verwendung von Kammerobjektträgern, fluoreszierender Färbung und konfokaler Mikroskopie zeigt es eine erhöhte Dicke, veränderte Architektur und eine höhere lebensfähige Biomasse...
Video Duration: 2 minutes and 32 secondsNehmen wir Röhren mit einem Medium, das einen Nanopartikel-Verbundstoff enthält, der aus einer Kombination von Übergangsmetallen und Kohlenstoff hergestellt wurde.Geben Sie antibiotikaresistente grampositive und gramnegative pathogene Bakterien als Testproben in separate Röhrchen.Beziehen Sie unbehandelte Bakterien als Negativkontrolle und antibiotikabehandelte Bakterien als positive Kontrolle ein.Inkubieren Sie die Proben mit Schütteln.Bei gramnegativen Bakterien erleichtern die poröse äußere...
Video Duration: 1 minute and 38 secondsQuelle: Bratton, B. P. et al., Dreidimensionale Bildgebung von Bakterienzellen für genaue zelluläre Darstellungen und präzise Proteinlokalisierung. J. Vis. Exp. (2019)Dieses Video demonstriert die Methode zur Erfassung und Analyse dreidimensionaler Fluoreszenzbilder bakterieller Zellen, um die Proteinorganisation auf Einzelzellebene zu untersuchen.
Video Duration: 2 minutes and 52 secondsQuelle: Le, T. A. N. et al., Messung der Auswirkungen von Bakterien und Chemikalien auf die Darmdurchlässigkeit von Caenorhabditis elegans. J. Vis. Exp. (2019)Dieses Video demonstriert einen fluoreszenzbasierten Test zur Quantifizierung der Darmpermeabilität von C. elegans, der Pseudomonas aeruginosa ausgesetzt ist. Im Vergleich zu Kontrollen, die mit Escherichia coli gefüttert wurden, zeigen pathogen-behandelte Würmer eine erhöhte Fluorophor-Leckage in die Körperhöhle, was auf Schäden an der...
Video Duration: 2 minutes and 45 secondsQuelle: O'Brien, V.P. et al. Wiederholende Harnwegsinfektion mit Escherichia coli ausgelöst durch Gardnerella vaginalis Blasenbelastung bei Mäusen. J. Vis. Exp. (2020)Dieses Video demonstriert die Herstellung eines Gardnerella vaginalis-Inokulums zur Etablierung eines Mausmodells wiederkehrender Harnwegsinfektionen.
Video Duration: 2 minutes and 51 secondsQuelle: Lenhard, A. et al. Ein Mausmodell für den Übergang von Streptococcus pneumoniae vom Kolonisator zum Erreger bei viraler Koinfektion wiederholt altersbedingte Erkrankungen. J. Vis. Exp. (2022)Dieses Video demonstriert ein Modell der Maus-Koinfektion, bei dem das Influenzavirus den Übergang von Streptococcus pneumoniae vom Kolonisator zu einem Krankheitserreger auslöst. Es beschreibt die Schritte, die bei bakterieller Besiedlung, Virusinfektion und Krankheitsprogression beteiligt sind.
Video Duration: 3 minutes and 17 secondsQuelle: Lenhard, A., et al. Ein Mausmodell für den Übergang von Streptococcus pneumoniae vom Kolonisator zum Erreger bei viraler Koinfektion wiederholt altersbedingte Erkrankungen. J. Vis. Exp. (2022)Dieses Video zeigt die Verarbeitung von Lungen bei einer Maus, die mit einem pathogenen Bakterium und einem Virus mitinfiziert wurde. Das Zerkleinern, Homogenisieren und Plattieren des Lungengewebes ermöglicht die Quantifizierung der bakteriellen Belastung, was auf eine bakterielle Ausbreitung in...
Video Duration: 3 minutes and 16 secondsQuelle: Cross, T. et al., Eine optimierte Anreicherungstechnik zur Isolierung von Arthrobacter-Bakteriophagearten aus Bodenprobenisolaten. J. Vis. Exp.(2015)Dieses Video demonstriert die Herstellung einer Bakterienkultur zur Herstellung von Bakteriophagen. Es behandelt die Schritte des Impfens eines Bodenbakteriums in eine belüftete Flasche, fördert ein gleichmäßiges Wachstum durch Belüftung und Schütteln sowie überwacht die Zelldichte mittels optischer Dichtemessungen. Sobald die Kultur die...
Video Duration: 2 minutes and 18 secondsQuelle: Conover, M. S. et al., Etablierung und Charakterisierung von Harnwegsinfektionen und CAUTI in einem Mausmodell. J. Vis. Exp. (2015)Dieses Video demonstriert den Nachweis intrazellulärer bakterieller Gemeinschaften (IBCs) im Gewebe der Mausblase, infiziert mit β-galactosidase-exprimierender Escherichia coli. Nach Gewebefixation, Permeabilisierung und Färbung mit X-gal erscheinen IBCs als blaue Puncta unter einem Sektionsmikroskop, was eine bakterielle Invasion während der...
Video Duration: 2 minutes and 6 secondsQuelle: Wang, Y., et al. In vivo Untersuchung der antimikrobiellen Blaulichttherapie für multiresistente Acinetobacter baumannii-Brandinfektionen mittels Biolumineszenzbildgebung. J. Vis. Exp. (2017)Dieses Video zeigt, wie man eine Verbrennungsinfektion in einem Mausmodell etabliert, indem man einen erhitzten Messingblock anwendet, gefolgt von pathogenem bakteriellem Inokulum. Die Bakterien besiedeln die freiliegende extrazelluläre Matrix und bilden einen Biofilm, der in vivo Studien zu...
Video Duration: 2 minutes and 47 secondsQuelle: Wang, Y., et al. In vivo Untersuchung der antimikrobiellen Blaulichttherapie für multiresistente Acinetobacter baumannii-Brandinfektionen mittels Biolumineszenzbildgebung. J. Vis. Exp. (2017)Dieses Video demonstriert das Verfahren zur Bildgebung von Brandwundinfektionen bei Mäusen, die mit Acinetobacter baumannii geimpft sind und ein biolumineszentes Operon tragen. Es zeigt, wie die Oxidation von luciferase-katalysierten Substraten Licht proportional zur bakteriellen Last erzeugt und so...
Video Duration: 2 minutes and 40 secondsQuelle: Barbero, A. M., et.al. Fluoreszenztests zur Untersuchung der Wechselwirkung von Mycobacterium tuberculosis mit dem Immunrezeptor SLAMF1. J. Vis. Exp. ( (2025)Dieses Video demonstriert einen fluoreszenzbasierten Test zur Untersuchung der Wechselwirkung zwischen einem Makrophagerezeptor und Mycobacterium tuberculosis-Antigenen . Fluoreszierend markierte Antigene auf einem Deckzettel werden mit Makrophagen-Proteinextrakten inkubiert, vernetzt, mit Antikörpern markiert und durch...
Video Duration: 2 minutes and 48 secondsQuelle: Li, J. et al. Entwicklung eines Larven-Zebrafisch-Infektionsmodells für Clostridioides difficile. J. Vis. Exp. (2020).Dieses Video demonstriert das Mikrogavage-Verfahren, bei dem eine betäubte Zebrafischlarve in Agarose immobilisiert und oral mit einer Tracer-Nadel mit einem pathogenen Bakterium injiziert wird. Die nicht-invasive Verabreichung ahmt eine natürliche Infektion nach und ermöglicht so die Analyse bakterieller Replikation, Toxinfreisetzung und Darmepithelschäden.
Video Duration: 2 minutes and 26 secondsQuelle: Rufián, J. S., et.al. Einzelzellanalyse der Expression von Pseudomonas syringae-Genen im Pflanzengewebe. J. Vis. Exp. (2022)Dieses Video demonstriert eine Vakuuminfiltrationsmethode, um einen bakteriellen Erreger in die Blätter von Arabidopsis-Pflanzen einzuführen. Der Ansatz verwendet eine präparierte bakterielle Suspension und Vakuumimpulse, um einen gleichmäßigen Eintritt durch die Spaltöffnungen zu ermöglichen, was zu einer kontrollierten Blattinfektion führt.
Video Duration: 3 minutes and 3 secondsQuelle: Casanova, A., et al. Mikroskopiebasierte Assays für Hochdurchsatz-Screening von Wirtsfaktoren, die an der Brucella-Infektion von Hela-Zellen beteiligt sind. J. Vis. Exp. (2016)Dieses Video demonstriert Hochdurchsatzbildgebung einer Brucella-Abortus-Infektion in Epithelzellen mit siRNA-vermittelter STING-Knockdown, um die Rolle der zytosolischen DNA-Erkennung bei der intrazellulären bakteriellen Replikation und der angeborenen Immunantwort des Wirts zu untersuchen.
Video Duration: 3 minutes and 43 secondsQuelle: Miquel Guennoc, C., et al. Neue Methode zur qualitativen multiskaligen Analyse bakterieller Biofilme auf filamentösen Pilzkolonien mittels Konfokal- und Elektronenmikroskopie. J. Vis. Exp. (2017)Dieses Video zeigt die Herstellung einer Pilzkultur auf behandelten Zellophanmembranen zur Unterstützung der Koloniebildung und des radialen Wachstums. Anschließend zeigt es die Kultivierung und Vorbereitung von bakteriellen Bodenzellen für Interaktionstests. Abschließend zeigt sie, wie...
Video Duration: 4 minutes and 14 secondsQuelle: Harris, S. L. et al. Überwachung der bakteriellen Besiedlung und Pflege von Arabidopsis-thaliana-Wurzeln in einem schwimmenden hydroponischen System. J. Vis. Exp. (2019)Dieses Video demonstriert ein Protokoll zur Überwachung der Kolonisierung von wurzelassoziierten Bakterien auf Arabidopsis thaliana-Setzlingen , die in einem bodenlosen System wachsen. Nach der Besiedlung werden Bakterien durch Sonikation verdrängt, dann verdünnt, plattiert und inkubiert, um Kolonien zu bilden, die die...
Video Duration: 2 minutes and 32 secondsSource: Calatayud Arroyo, M., et al. Assessing the Viability of a Synthetic Bacterial Consortium on the In Vitro Gut Host-microbe Interface. J. Vis. Exp. (2018)The video demonstrates a method to evaluate the viability of anaerobic oral bacteria using fluorescent dyes and flow cytometry. It begins with culturing bacteria in oxygen-free broth, followed by resuspending a single colony from a blood agar plate. After incubation and dilution, the culture is stained with membrane-permeable and...
Video Duration: 2 minutes and 38 secondsSource: Jackson, L., et al. Visualization of Pseudomonas aeruginosa within the Sputum of Cystic Fibrosis Patients. J. Vis. Exp. (2020)This video demonstrates the in situ visualization of Pseudomonas aeruginosa within chemically cleared cystic fibrosis sputum using fluorescent labeling and confocal microscopy to reveal bacterial localization and biofilm structure.
Video Duration: 3 minutes and 43 secondsSource: Hunt, A. M. A., et al. Come to the Light Side: In Vivo Monitoring of Pseudomonas aeruginosa Biofilm Infections in Chronic Wounds in a Diabetic Hairless Murine Model. J. Vis. Exp.(2017).This video demonstrates the procedure for assessing infection clearance and healing progression in a wounded diabetic mouse using bioluminescent and microscopic images.
Video Duration: 2 minutes and 7 secondsSource: Liu, X., et al. Bacterial Leaf Infiltration Assay for Fine Characterization of Plant Defense Responses using the Arabidopsis thaliana-Pseudomonas syringae Pathosystem. J. Vis. Exp. (2015).This video demonstrates a method to assess the bacterial load in Arabidopsis thaliana leaves infected with Pseudomonas syringae. Leaf discs from infected leaves are homogenized, serially diluted, and plated onto nutrient-rich agar to promote bacterial colony formation. Colony counts are then used to...
Video Duration: 4 minutes and 29 secondsSource: Ahn, J. J., et al. Experimental Infection with Listeria monocytogenes as a Model for Studying Host Interferon-γ Responses. J. Vis. Exp. (2016)The video demonstrates bacterial load measurement in spleen and liver tissues isolated from mice infected with an intracellular bacterial pathogen. Bacteria, accumulated within tissue-resident phagocytes during systemic infection, are released using detergent-based lysis and mechanical disruption. Serial dilutions of the homogenates are plated on...
Video Duration: 3 minutes and 52 secondsQuelle: Siva-Jothy, J. A., et al. Orale bakterielle Infektion und Ausscheidung bei Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2018)Das Video zeigt die orale Infektion von Drosophila melanogaster mit pathogenen Bakterien. Dazu gehört die Herstellung von Infektionsfläschchen und der Transfer ausgehungerter Fliegen, um die Bakterienaufnahme zu ermöglichen. Das Verfahren erfasst die Darmbesiedlung, gefolgt von Oberflächensterilisation und Homogenisierung der Fliegen. Schließlich zeigt es die...
Video Duration: 3 minutes and 25 secondsQuelle: Mueller, A., et al. Ein experimentelles Modell zur Untersuchung der Tuberkulose-Malaria-Koinfektion bei natürlicher Übertragung von Mycobacterium tuberculosis und Plasmodium berghei. J. Vis. Exp. (2014)Dieses Video demonstriert die Aerosolabgabe von Mycobacterium tuberculosis (Mtb) an Mäuse mittels eines verneblerbasierten Kammersystems, um eine lungenartige Infektion zu induzieren, und bietet ein kontrolliertes und reproduzierbares Modell zur Untersuchung der luftübertragenen...
Video Duration: 2 minutes and 55 secondsQuelle: de Vries, C. R., et.al. Ein verzögertes Impfungsmodell der chronischen Wundinfektion von Pseudomonas aeruginosa . J. Vis. Exp. (2020)Dieses Video zeigt die verzögerte Impfung von leuchtender Pseudomonas aeruginosa in eine Maus, die zwei vollwertige Dorsalhautwunden trägt, die von einem transparenten Filmverband abgedeckt sind. Dies erleichtert die Bildung von Biofilmen und die Entstehung chronischer Infektionen. Regelmäßige Biolumineszenzüberwachung ermöglicht die Quantifizierung der...
Video Duration: 2 minutes and 24 secondsQuelle: Liu, X. et al. Ein bakterielles orales Fütterungsverfahren mit antibiotikabehandelten Mücken. J. Vis. Exp. (2020)Dieses Video zeigt die Erschöpfung der natürlichen Darmmikrobiota bei Mücken mit einer antibiotikahaltigen Saccharoselösung. Darauf folgt eine kontrollierte Rekolonisierung mit einer bakteriellen Suspension, die über ein Membranfütterungssystem geliefert wird, um eine definierte Bakterienpopulation im Mückendarm zu etablieren.
Video Duration: 3 minutes and 27 secondsQuelle: Seman, B. G. et al. Ein neonatales Bildgebungsmodell der gramnegativen bakteriellen Sepsis. J. Vis. Exp. (2020)Das Video demonstriert ein neonatales Mausmodell zur Untersuchung systemischer Infektionen mit gekapselten biolumineszenten Bakterien. Neugeborene Welpen werden mit hoch- oder niedrigdosierten bakteriellen Suspensionen injiziert und zur Nachsorge zu ihrer Mutter zurückgegeben. Die gekapselten Bakterien entgehen der frühen Immundetektion, breiten sich systemisch aus und werden...
Video Duration: 3 minutes and 45 secondsQuelle: Shi, J. et al., Screening and Identification of RNA Silencing Suppressors from Secreted Effectors of Plant Pathogens. J. Vis. Exp. (2020)Dieses Video demonstriert das Verfahren zur Herstellung einer Agrobacterium tumefaciens-Kultur , indem eine Virulenzgenexpression mit Acetosyringon induziert wird, gefolgt von der Antibiotikaentfernung durch Waschen und Resuspension, um eine transformationsbereite Suspension für die Genlieferung in Pflanzengewebe zu erzeugen.
Video Duration: 3 minutes and 3 secondsQuelle: Behera, R.K. et al., Eine fluoreszenzbasierte Methode zur Untersuchung der bakteriellen Genregulation in infizierten Geweben. J. Vis. Exp. (2019)Dieses Video demonstriert die Herstellung hämolytischer Staphylococcus aureus-Kulturen , um das Bakterienwachstum zu standardisieren und die metabolische Synchronisation für Wirt-Pathogen-Interaktionsstudien zu erreichen.
Video Duration: 2 minutes and 43 secondsQuelle: Shi, J. et al., Screening and Identification of RNA Silencing Suppressors from Secreted Effectors of Plant Pathogens. J. Vis. Exp. (2020)Dieses Video demonstriert das Verfahren zur Herstellung einer Agrobacterium tumefaciens-Kultur , indem eine Virulenzgenexpression mit Acetosyringon induziert wird, gefolgt von der Antibiotikaentfernung durch Waschen und Resuspension, um eine transformationsbereite Suspension für die Genlieferung in Pflanzengewebe zu erzeugen.
Video Duration: 3 minutes and 10 secondsQuelle: Chen, Y., et al. Bewertung von Virulenz und Pathogenese der Aeromonas-Infektion in einem Caenorhabditis elegans-Modell . J. Vis. Exp. (2018)Dieses Video demonstriert einen Überlebenstest mit C. elegans , um die Pathogenese von Aeromonas zu modellieren, bei der die orale Aufnahme der Bakterien zu Darminfektionen und Sterblichkeit führt und so eine quantitative Bewertung der bakteriellen Virulenz in einem lebenden Wirtssystem ermöglicht.
Video Duration: 2 minutes and 19 secondsBeginnen Sie mit immundefizienten Mäusen, die subkutane Xenograft-Tumoren tragen, die von menschlichen Darmkrebszellen stammen.Mündlich verabreichen Sie Pediococcus pentosaceus, ein Milchsäurebakterium, das für den Verzehr sicher ist und so entwickelt ist, dass es ein krebshemmendes Protein absondert, an die behandelte Maus.Verabreichen Sie der Steuermaus Kochsalzlösung.Da sie säuretolerant sind, überleben die Bakterien die saure Umgebung des Magens und erreichen den Darm.Dort besiedeln sie das...
Video Duration: 1 minute and 29 secondsBeginnen Sie mit Mäusen, die solide Tumore tragen, die subkutan im Oberschenkel implantiert wurden.Injizieren Sie die Mäuse über die Schwanzvene mit einem nicht-virulenten, entwickelten Stamm von Salmonella typhimurium.Die Bakterien zirkulieren im Blutkreislauf und sammeln sich selektiv im hypoxischen, immunsuppressierten Tumormikromilieu an.Sie tragen ein Plasmid, das ein therapeutisches Fusionspeptid codiert, das aus einem zellpenetrierenden Peptid und der mitochondrialen Zieldomäne eines...
Video Duration: 1 minute and 33 secondsQuelle: Chen, Y., et al. Bewertung von Virulenz und Pathogenese der Aeromonas-Infektion in einem Caenorhabditis elegans-Modell. J. Vis. Exp. (2018).Dieses Video demonstriert den C. elegans Liquid Toxicity Assay mit Aeromonas, eine Methode zur Bewertung bakterieller Virulenz durch Messung des Überlebens von Würmern in einer nährstoffarmen flüssigen Umgebung. Der Test zeigt stammspezifische Pathogenität anhand des Ausmaßes der durch Toxinen verursachten Schäden und Sterblichkeit bei C. elegans.
Video Duration: 2 minutes and 5 secondsQuelle: Nag, D., et al. Quantifizierung der Besiedlung und Durchfall von Vibrio cholerae im erwachsenen Zebrafischmodell. J. Vis. Exp. (2018)Dieses Video demonstriert ein Protokoll zur Quantifizierung der Darmbakterienlast bei erwachsenen Zebrafischen, die mit einem antibiotikaresistenten Stamm von Vibrio cholerae infiziert sind. Nach Euthanasie und Dissektion wird der Darmtrakt isoliert, mit Glaskugeln homogenisiert und verarbeitet, um die Bakterien freizusetzen. Das resultierende Homogenat...
Video Duration: 3 minutes and 48 secondsQuelle: Nag, D., et.al. Quantifizierung der Besiedlung und Durchfall von Vibrio cholerae im erwachsenen Zebrafischmodell. J. Vis. Exp. (2018)Dieses Video demonstriert die Impfung erwachsener Zebrafische mit einem pathogenen Vibrio-cholerae-Stamm , um die Darmbesiedlung und die Krankheitsverläufe zu untersuchen. Es zeigt, wie bakterielle Toxine die Darmintegrität stören, was zu Flüssigkeitsverlust, Schleimsekretion und wässrigem Durchfall führt, bevor die Fische für weitere Analysen vorbereitet...
Video Duration: 2 minutes and 30 secondsQuelle: Patras, K. A., Doran, K. S. Ein Mausmodell der vaginalen Besiedlung von Gruppe B Streptokokken . J. Vis. Exp. (2016)Dieses Video demonstriert die Vorbereitung und vaginale Impfung einer hormonbehandelten weiblichen Maus mit Streptokokken der Gruppe B zur Modellierung der Infektion. Sie erklärt, wie man die Bakterien kultiviert und vorbereitet, das Inokulum in das vaginale Lumen verabreicht und eine erfolgreiche Infektion sicherstellt.
Video Duration: 3 minutes and 42 secondsQuelle: Patras, K. A. & Doran, K. S. Ein Mausmodell der vaginalen Besiedlung von Gruppe B Streptokokken . J. Vis. Exp. (2016)Dieses Video demonstriert die Quantifizierung der vaginalen Gruppe-B Streptokokkenlast (GBS) in einem Mausmodell mittels Abstrichung und chromogener Kultur. Es beschreibt die Schritte, die bei der Probenentnahme, Panzerung und Kolonienzählung zur Quantifizierung der GBS-Belastung im vaginalen Lumen der Maus erforderlich sind.
Video Duration: 2 minutes and 34 secondsQuelle: Conover, M. S. et al., J. Etablierung und Charakterisierung von Harnwegsinfektionen und CAUTI in einem Mausmodell. J. Vis. Exp. (2015)Dieses Video zeigt das Verfahren zur Montage und Implantation eines transurethralen Katheter in einer weiblichen Maus, gefolgt von einer bakteriellen Impfung zur Etablierung katheterassoziierter Harnwegsinfektion und zur Untersuchung biofilmvermittelter Wirts-Pathogen-Interaktionen.
Video Duration: 2 minutes and 51 secondsQuelle: Flores, E., et al. Verwendung des protozoen Paramecium caudatum als Vehikel für lebensmittelbedingte Infektionen bei Zebrafischlarven. J. Vis. Exp. (2019).Dieses Video demonstriert die Methode, ein lebensmittelbedingtes bakterielles Darminfektionsmodell bei Zebrafischlarven zu etablieren, indem man ihnen Paramecia füttert, die mit fluoreszierendem E. coli infiziert sind.
Video Duration: 2 minutes and 56 secondsQuelle: Wang, Y., et al. In vivo Untersuchung der antimikrobiellen Blaulichttherapie für multiresistente Acinetobacter baumannii-Brandinfektionen mittels Biolumineszenzbildgebung. J. Vis. Exp. (2017)Dieses Video demonstriert das Verfahren zur Behandlung von Brandwundinfektionen, die durch biolumineszente, arzneimittelresistente Bakterien bei Mäusen mit Blaulichttherapie verursacht werden, gefolgt von Biolumineszenzbildgebung zur Überwachung der Behandlungswirksamkeit.
Video Duration: 2 minutes and 52 secondsQuelle: Ditkowski, B., et al. Ein in-vitro-Modell eines Parallelplatten-Perfusionssystems zur Untersuchung der bakteriellen Haftung an Transplantatgeweben. J. Vis. Exp. (2019).Dieses Video demonstriert die Methode, eine Parallelplatten-Flusskammer zu verwenden, um fluoreszenzmarkierte Bakterien über vaskuläres Transplantatgewebe zu perfundieren, was eine kontrollierte Analyse der bakteriellen Adhäsion und der frühen Pathogenese unter Scherflussbedingungen ermöglicht.
Video Duration: 2 minutes and 47 secondsQuelle: Beernink, B. M. et al. Direkte Agroinokulation von Maissetzlingen durch Injektion mit rekombinanten Fuchsschwanzmosaikvirus- und Zuckerrohrmosaikvirus-infektiösen Klonen. J. Vis. Exp. (2021)Dieses Video demonstriert die durch Agrobacterium vermittelte Abgabe rekombinanter viraler Klone in Maissetzlinge zur Gen-Silencing. Es beschreibt den Prozess der Agrobacterium-Infektion , systemische virale Ausbreitung und phänotypische Veränderungen durch RNA-Interferenz.
Video Duration: 2 minutes and 15 secondsQuelle: Gupta, K. et al. Intrarenale Injektion von Escherichia coli in einem Rattenmodell der Pyelonephritis. J. Vis. Exp. (2017).Dieses Video demonstriert die intrarenale Injektion von E. coli in das Nierenbecken einer anästhesierten Ratte, um eine lokale Niereninfektion auszulösen, und modelliert eine akute Pyelonephritis. Sie hebt wichtige chirurgische Schritte und aseptische Techniken hervor, die notwendig sind, um ein reproduzierbares In-vivo-Infektionsmodell für die nachgelagerte Analyse...
Video Duration: 3 minutes and 20 secondsQuelle: Behera, R. K. et al. Eine fluoreszenzbasierte Methode zur Untersuchung der bakteriellen Genregulation in infizierten Geweben. J. Vis. Exp. (2019)Dieses Video demonstriert eine Methode zur Herstellung infizierter Mausnieren, zur DNA-Färbung und zur Erkennung bakterieller Genexpression mittels dualer fluoreszierender Reporter. Rot markiert alle Bakterien, und Grün hebt infektionsempfindliche Zellen hervor.
Video Duration: 2 minutes and 43 secondsQuelle: Brzozowski, R. S. et al. Live-Cell-Fluoreszenzmikroskopie zur Untersuchung der subzellulären Proteinlokalisierung und Veränderungen der Zellmorphologie bei Bakterien. J. Vis. Exp. (2019)Dieses Video demonstriert die Fluoreszenzmikroskopie mit lebenden Zellen, um morphologische Veränderungen in Echtzeit bei Bakterien zu visualisieren. Es beschreibt die Schritte, die für Bildgebung, Zeitrafferaufnahme und Dekonvolution erforderlich sind, um hochauflösende Bilder in Echtzeit zu erhalten.
Video Duration: 3 minutes and 15 secondsQuelle: McMullen, P. D., Freitag, N. E. Bewertung bakterieller Invasion von Herzzellen in Kultur und Herzkolonisierung bei infizierten Mäusen mit Listeria monocytogenes. J. Vis. Exp. (2015)Dieses Video demonstriert die Injektion von Listeria monocytogenes in die Schwanzvene einer Maus, um systemische Infektionen zu etablieren. Sie zeigt die bakterielle Zirkulation, Organbesiedlung und die Quantifizierung der bakteriellen Belastung im Herzen durch Homogenisierung von Gewebe, serielle...
Video Duration: 4 minutes and 21 secondsQuelle: Zhan, Y., et al. Photobleaching ermöglicht eine Superauflösungsbildgebung des FtsZ-Rings im Cyanobacterium prochlorococcus. J. Vis. Exp. (2018).Dieses Video demonstriert das Verfahren zur Photobleachung von Pigmenten in cyanobakteriellen Zellen unter Verwendung von Xenonlicht unter kalten Bedingungen, um die Fluoreszenzbildgebung wachstumsregulierender Proteine zu verbessern.
Video Duration: 2 minutesQuelle: Zhang, M. et al., Schnelle antimikrobielle Susceptibilitätstests durch stimulierte Raman-Streubildgebung der Deuterium-Einbindung in einem einzelnen Bakterium. J. Vis. Exp. (2022)Dieses Video demonstriert die Anwendung der stimulierten Raman-Streumikroskopie, um die Anfälligkeit für Antibiotika zu bewerten, indem die deuterium-markierte metabolische Aktivität verfolgt wird. Durch die Überwachung von Kohlenstoff-Deuterium-Signalen ermöglicht die Methode eine schnelle Erkennung...
Video Duration: 3 minutes and 46 secondsQuelle: Hiroyasu, A., D et al., Extraktion von Hämozyten aus Drosophila melanogaster-Larven zur mikrobiellen Infektion und Analyse. J. Vis. Exp. (2018)Dieses Video zeigt das Verfahren, um eine bakterielle Infektion bei Drosophila-Larven zu etablieren, indem sie in einen bakteriellen Tropfen gesetzt und mit einer Wolframnadel gesticht werden. Die Larven werden dann auf einer gerillten, nährstoffreichen Agarplatte inkubiert, um die Interaktionen zwischen Wirt und Pathogen zu untersuchen.
Video Duration: 2 minutes and 29 secondsQuelle: Hiroyasu, A., et al. Extraktion von Hämozyten aus Drosophila melanogaster-Larven zur mikrobiellen Infektion und Analyse. J. Vis. Exp. (2018)Dieses Video demonstriert hochauflösende konfokale Bildgebung von Drosophila melanogaster-Hämozyten , die mit Coxiella burnetii infiziert sind, um die Lokalisierung von Erregern in 3D zu visualisieren und so eine detaillierte Analyse intrazellulärer Infektionsdynamiken und Wirts-Erreger-Interaktionen zu ermöglichen.
Video Duration: 2 minutes and 35 secondsQuelle: Rufián, J. S. et al. Einzelzellanalyse der Expression von Pseudomonas syringae-Genen im Pflanzengewebe. J. Vis. Exp. (2022).Dieses Video demonstriert eine Methode zur Analyse der Genexpression in pflanzenextrahierten, pathogenen Bakterien auf Einzelzellniveau mit einem fluoreszierend markierten Transkriptionsfaktor. Konfokale Bildgebung zeigt Heterogenität in der Expression von Virulenzgenen und hebt die funktionelle Vielfalt innerhalb einer klonalen bakteriellen Population hervor.
Video Duration: 2 minutes and 36 secondsSource: Montefusco-Pereira, C. V. et al. P. aeruginosa Infected 3D Co-Culture of Bronchial Epithelial Cells and Macrophages at Air-Liquid Interface for Preclinical Evaluation of Anti-Infectives. J. Vis. Exp.(2020)This video demonstrates a co-culture model of bronchial epithelial cells and macrophage-like cells at the air-liquid interface to study host-pathogen interactions. Pathogenic bacterial infection compromises epithelial membrane integrity, triggering macrophage-like cell activation and...
Video Duration: 1 minute and 50 secondsSource: Nguyen, J. Q., et. al. Intratracheal Inoculation of Fischer 344 Rats with Francisella tularensis. J. Vis. Exp. (2017)This video demonstrates the procedure of intratracheal inoculation in an anesthetized rat, involving catheter placement, bacterial delivery into the trachea, and subsequent lung infection establishment for studying host-pathogen interactions.
Video Duration: 3 minutes and 7 secondsSource: Claes, J., et al, In Vitro and In Vivo Model to Study Bacterial Adhesion to the Vessel Wall Under Flow Conditions. J. Vis. Exp. (2015).This video demonstrates an in vivo method for analyzing shear-dependent bacterial adhesion in a live mouse model. Following surgical preparation and catheterization, the mesenteric vasculature is exposed for real-time imaging under a fluorescence microscope. Perfusion with an ionophore and fluorescently labeled bacteria reveals how shear stress triggers...
Video Duration: 3 minutes and 50 secondsSource: Poore, K., et al. Epithelial Cell Infection Analyses with Shigella. J. Vis. Exp. (2024)This video demonstrates an in vitro assay to assess Shigella invasion and intracellular replication in human colonic epithelial monolayers. It highlights steps for infection, antibiotic selection, host cell lysis, and recovery of intracellular bacteria for downstream analysis.
Video Duration: 4 minutes and 22 secondsSource: Zhang, C., et al., Development and Assessment of Intracellular Infection Models for Staphylococcus aureus. J. Vis. Exp. (2025)The video demonstrates the isolation of kidneys containing Staphylococcus aureus-infected macrophages, followed by tissue homogenization to release intracellular bacteria. It quantifies bacterial persistence within macrophages in control and antibiotic-treated groups by counting colony-forming units.
Video Duration: 2 minutes and 57 secondsSource: Berthold, A., et al. Cultivation Methods of Spirochetes from Borrelia burgdorferi Sensu Lato Complex and Relapsing Fever Borrelia. J. Vis. Exp.(2022)This video demonstrates the cultivation of pathogenic spirochetes from infected skin tissue to model dermal infection. It highlights their localization in the dermis, interaction with the extracellular matrix, and survival during selective culture conditions.
Video Duration: 3 minutes and 25 secondsQuelle: Morgan, E. et al. Selektive Reinigung wilder Caenorhabditis-Nematoden zur Anreicherung von Darmmikrobiombakterien. J. Vis. Exp. (2021)Dieses Video demonstriert ein Protokoll zur Isolierung von interessanten Darmbakterien aus wilden Caenorhabditis-Würmern . Die Würmer werden zunächst ausgehungert und gewaschen, um die restlichen Nahrungsbakterien von ihrer Oberfläche und dem Darmlumen zu entfernen und gleichzeitig die Zielmikroben zu erhalten. Nach Oberflächenreinigung und mehreren...
Video Duration: 4 minutes and 19 secondsQuelle: Petersen, C. et al., Isolierung und Charakterisierung der natürlichen Mikrobiota des Modellnematoden Caenorhabditis elegans. J. Vis. Exp. (2022)Dieses Video zeigt die Isolierung und Kultivierung von Bakterienarten, die mit Caenorhabditis elegans assoziiert sind. Eine perlenbasierte Lyse von C. elegans, gefolgt von selektiver Kultivierung, ermöglicht die Isolierung verschiedener mikrobieller Stämme für weitere Analysen.
Video Duration: 2 minutes and 51 secondsQuelle: Liu, X. et al. Ein bakterielles orales Fütterungsverfahren mit antibiotikabehandelten Mücken. J. Vis. Exp. (2020)Dieses Video zeigt die Zerlegung des Mückenmitteldarms zur Isolierung von Darmbakterien. Der Mitteldarm wird aus dem Verdauungstrakt extrahiert, homogenisiert, um die Bakterien freizusetzen, und auf Nährstoffagar versetzt, um Bakterienkolonien zu kultivieren.
Video Duration: 2 minutes and 40 secondsNimm eine Kontrollmaus mit normalem Darmmikrobiota und eine experimentelle Maus mit erschöpfter Darmmikrobiota. Die Erschöpfung beeinträchtigt die Integrität der Darmbarriere.Dies ermöglicht es Bakterien, durch das Blutgefäß ins Lebergewebe zu translokationieren.Injizieren Sie beide Mäuse mit dem Hepatitis-B-Virus oder HBV-Plasmid, um eine HBV-Infektion im Lebergewebe auszulösen.In der Kontrollmaus erkennt die T-Zelle eine infizierte Leberzelle durch die Interaktion ihrer Rezeptoren mit viralen...
Video Duration: 1 minute and 15 secondsBeginnen Sie mit einer bakteriellen Biosensorkultur, die in einem Medium suspendiert ist.Diese manipulierten Bakterien produzieren einen Transkriptionsfaktor, der bei der Bindung an einen bestimmten Stuhlmetaboliten einen Promotor aktiviert, der mit einem fluoreszierenden Reporter-Gen assoziiert ist.Zu dieser Kultur wird eine gefilterte menschliche Stuhlprobe hinzugefügt, die Metaboliten wie Laktat enthält, die an Wirts-Mikrobiom-Interaktionen beteiligt sind.Verdünnen Sie diese Mischung mit...
Video Duration: 1 minute and 18 secondsBeginnen Sie mit einem Rattenmodell, dessen Nähte um die oberen Backenzähne gebunden sind, um die bakterielle Besiedlung zu unterstützen.Wiederholt die Nähte mit einem zahnfleischerkrankungsverursachenden oralen pathogenen Bakterium mit einer gelartigen Lösung bestreichen.Die Bakterien kolonisieren das Zahnfleisch um die Nähte.Kolonisierung löst Entzündungen aus und schädigt das Gewebe.Die Bakterien setzen Toxine frei, die durch geschädigtes Gewebe diffundieren und in den Blutkreislauf gelangen.
Video Duration: 1 minute and 27 secondsQuelle: Yang, E. et al. Isolierung einzelner intrazellulärer bakterieller Gemeinschaften, die aus einem Mausmodell der Harnwegsinfektion erzeugt wurden, für eine nachgelagerte Einzelzellanalyse. J. Vis. Exp. (2019)Dieses Video demonstriert die manuelle Isolierung einzelner Epithelzellen, die intrazelluläre Bakteriengemeinschaften aus infizierten Mausblasen enthalten, mittels Mund-Mikropipettierung und ermöglicht so eine nachgeschaltete Einzelzellanalyse lebensfähiger, wirtsassozoziierter...
Video Duration: 2 minutes and 56 secondsQuelle: Chen, Y. et al., Bewertung von Virulenz und Pathogenese der Aeromonas-Infektion in einem Caenorhabditis elegans-Modell . J. Vis. Exp. (2018)Dieses Video zeigt einen Muskelnekrose-Test bei C. elegans (Caenorhabditis elegans) unter Verwendung pathogener Aeromonas-Stämme . Durch die Fütterung von grünen fluoreszierenden Proteinen (GFP)-exprimierenden Würmern auf Aeromonas-Samenplatten modelliert der Test bakterielle Infektionen und zeigt Gewebeschäden durch fluoreszenzbildende Bildgebung.
Video Duration: 2 minutes and 12 secondsQuelle: Hu, Y. et.al., Analyse der Wechselwirkungen zwischen Endobiotika und menschlicher Darmmikrobiota mittels In-vitro-Badefermentationssystemen. J. Vis. Exp. (2019)Dieses Video demonstriert die Analyse der kurzkettigen Fettsäureproduktion durch die menschliche Darmmikrobiota als Reaktion auf Exopolysaccharide. Dies unterstreicht die Trennung und Quantifizierung mikrobieller Fermentationsprodukte mittels Gaschromatographie. Die Ergebnisse zeigen, dass Exopolysaccharide mikrobielle Metabolite...
Video Duration: 2 minutes and 46 secondsQuelle: Lo, B. C., et al. Chronische Salmonellen-Infektion induzierte Darmfibrose. J. Vis. Exp. (2019)Das Video demonstriert die Quantifizierung der Bakterienlast in einem Mausmodell einer chronischen Infektion mit streptomycinresistenter Salmonella-Typhimurium. Nach Euthanasie und steriler Dissektion werden Müses- und Milzgewebe entnommen, mit Stahlperlen homogenisiert, um Bakterien freizusetzen, und seriell verdünnt. Verdünnungen werden auf selektivem Agar verdünnt, und sichtbare Kolonien...
Video Duration: 2 minutes and 42 secondsQuelle: Figueroa, D. et al. Produktion und Visualisierung bakterieller Spheroplasten und Protoplasten zur Charakterisierung der Lokalisierung antimikrobieller Peptide. J. Vis. Exp. (2018).Dieses Video demonstriert die Herstellung von Spheroplasten aus stabförmigen, gramnegativen Bakterien. Bakterien werden in Gegenwart eines Antibiotikums gezüchtet, um verlängerte Filamente zu bilden. Diese werden mit einer hypertonischen Lösung gewaschen und mit einem Lysepuffer behandelt, um die äußere...
Video Duration: 4 minutes and 2 secondsQuelle: Sigal, N., et al. RNA-Reinigung aus intrazellulär gezüchteten Listeria monocytogenes in Makrophagenzellen. J. Vis. Exp. (2016).Dieses Video demonstriert die Isolierung internalisierter pathogener Bakterien aus infizierten Knochenmark-abgeleiteten Makrophagen (BMDMs). Bakterien dürfen sich an Wirtszellen anheften, und ungebundene Bakterien werden weggespült. Nach der Internalisierung wird ein Antibiotikum hinzugefügt, um nicht internalisierte Bakterien zu beseitigen. Die Wirtszellen...
Video Duration: 3 minutes and 41 secondsQuelle: Temkin, M. I. et al. Hochdurchsatz-Kokultur-Assays zur Untersuchung mikrobieller Wechselwirkungen. J. Vis. Exp. (2019)Dieses Video demonstriert einen in-vitro-Test zur Untersuchung mikrobieller Interaktionen zwischen Corynebacterium propinquum und Staphylococcus in einer Kokultur.
Video Duration: 3 minutes and 30 secondsQuelle: Madenspacher, J. H. und Fessler, M. B. Eine nicht-invasive und technisch unintensive Methode zur Induktion und Phänotypisierung experimenteller bakterieller Pneumonie bei Mäusen. J. Vis. Exp. (2016)Dieses Video demonstriert den Prozess zur Quantifizierung der Bakterienlast in der Milz einer infizierten Maus, um die Schwere der Infektion zu beurteilen. Die homogenisierte Milz wird seriell verdünnt und plattiert, um die gesamte bakterielle Belastung zu bestimmen. Die daraus resultierenden...
Video Duration: 2 minutes and 3 secondsNehmen Sie Kulturen menschlicher Harnblasenepithelzellen in einer Multiwell-Platte.Inkubieren Sie die Kontrollkultur mit Wildtyp-Enterobacter cloacae, einem pathogenen Bakterium mit pili, haarartigen Strukturen auf der bakteriellen Oberfläche.Die FimH-Untereinheit des Pili bindet an den Wirtszellrezeptor und verankert die Wildtyp-Bakterien an die Wirtszelle.Inkubieren Sie die experimentelle Kultur mit einer mutierten Enterobacter-Kloake, die kein FimH enthält.Ohne FimH haften die mutierten...
Video Duration: 1 minute and 20 secondsNehmen Sie Suspensionen eines antibiotikaresistenten Stamms eines pathogenen Bakteriums.Behandeln Sie eine Suspension mit einer kurzen, membranstörenden Antibiotikumverbindung und die andere mit der kurzen Verbindung und einer längeren, membraninterkalierenden Verbindung.Inkubieren Sie beide Suspensionen mit Rührung. Diese Verbindungen ahmen die Lipid-Doppelschichtstruktur nach und ermöglichen so ihre spontane Einlagerung in bakterielle Membranen.Die kurze Mischung überspannt nur einen Teil der...
Video Duration: 1 minute and 23 secondsQuelle: Brown, A. O., et al. Visualisierung von Streptococcus pneumoniae in kardialen Mikroläsionen und anschließende kardiale Remodellierung. J. Vis. Exp. (2015).Dieses Video demonstriert die mikroskopische Visualisierung bakterieller Mikroläsionen im Herzgewebe der Maus. Das Herz einer mit Streptococcus pneumoniae infizierten Maus wird entnommen, gewaschen und fixiert, bevor es verarbeitet wird, um koronale Schnitte zu erhalten. Diese Schnitte werden mit Hämatoxylin und Eosin gefärbt und...
Video Duration: 2 minutes and 19 secondsQuelle: Pava-Ripoll et al. Nachweis von lebensmittelbedingten bakteriellen Krankheitserregern aus einzelnen Schmutzfliegen. J. Vis. Exp. (2015)Dieses Video demonstriert eine PCR-basierte Methode, die gezielte bakterielle DNA aus angereicherten Fliegenproben mit pathogenspezifischen Tabletten ampliziert und so eine Echtzeit-Fluoreszenzerkennung und Schmelzkurvenanalyse ermöglicht, um das Vorhandensein lebensmittelbedingter Krankheitserreger bei einzelnen Insekten zu bestätigen.
Video Duration: 2 minutes and 25 secondsQuelle: Calatayud Arroyo, M., et al. Bewertung der Lebensfähigkeit eines synthetischen bakteriellen Konsortiums an der in-vitro-Darm-Wirt-Mikroben-Schnittstelle. J. Vis. Exp. (2018).Dieses Video demonstriert ein in-vitro-Darm-Host-Mikroben-Modell zur Untersuchung der bakteriellen Lebensfähigkeit. Eine Kokultur von Caco-2- und HT29-MTX-Zellen wird mit Bakterien inkubiert, die unter simulierten Verdauungsbedingungen vorbehandelt wurden. Die Integrität der Epithelbarriere wird mit...
Video Duration: 2 minutes and 44 secondsQuelle: Chen, H., et al. Spezifischer und genauer Nachweis des Zitrus-Greening-Erregers Candidatus liberibacter spp. mittels konventioneller PCR an Zitrusblattgewebeproben. J. Vis. Exp. (2018)Dieses Video zeigt die Gewinnung der gesamten genomischen DNA aus Zitrusblattgewebe, das mit einem pathogenen Bakterium infiziert ist. Das Protokoll ermöglicht eine zuverlässige DNA-Rückgewinnung für den nachgelagerten PCR-basierten Nachweis des phloembegrenzten Erregers.
Video Duration: 5 minutes and 12 secondsSource: Pett, N., et al. T4 Bacteriophage and E. coli Interaction in the Murine Intestine: A Prototypical Model for Studying Host-Bacteriophage Dynamics In Vivo. J. Vis. Exp. (2024).This video demonstrates the in vivo interaction between T4 bacteriophage and E. coli in the murine intestine, and the fecal spot plating method to quantify their coexistence by measuring bacterial colonies and phage plaques.
Video Duration: 2 minutes and 57 secondsSource: Alshehri, M. et. al., Organotypic Tissue Model Systems for Investigating Host-Pathogen Interactions In Vitro. J. Vis. Exp. (2025)This video demonstrates a co-culture model using multi-species oral biofilms and human oral epithelium. It highlights epithelial immune activation and enables the downstream analysis of host-pathogen interaction.
Video Duration: 3 minutes and 20 seconds