Intraperitoneale Injektion von bakteriellem Lipopolysaccharid bei Mäusen zur Untersuchung systemischer Immunantworten

Zusammenfassung

Quelle: Radulovic, K., et al. Injektionen von Lipopolysaccharid in Mäuse, um das Eindringen mikrobieller Produkte nach dem Durchbruch der Darmbarriere nachzuahmen. J. Vis. Exp. (2018)

Dieses Video demonstriert ein Schritt-für-Schritt-Verfahren zur intraperitonealen Injektion von Lipopolysaccharid (LPS) in Mäuse, um systemische Entzündungen zu induzieren.

Protokoll

Alle Verfahren, die Tiermodelle betreffen, wurden vom örtlichen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem JoVE veterinärmedizinischen Überprüfungsausschuss überprüft.

1. Intraperitoneale Injektion von Lipopolysaccharid (LPS) in Mäuse
   1. Aspirieren Sie die LPS-Arbeitslösung in einer 0,5-mL-Spritze mit einer 30-G-Nadel in laminarem Luftstrom.
   2. Wiegen Sie weibliche C57Bl/6 Mäuse (sechs bis 10 Wochen alt) und berechnen Sie die Menge LPS, die injiziert wird: 10 μL (2 μg)/g Körpergewicht.
      HINWEIS: Wenn zum Beispiel eine Maus 20 g wiegt, müssen 20 g x 10 μL = 200 μL LPS-Arbeitslösung injiziert werden.
   3. Führe die Maus sanft, aber bestimmt und halte das Tier mit einer Hand fest. Stellen Sie sicher, dass das Tier normal atmen kann, aber sich während der Fesselung nicht dreht und wendet.
   4. Neigen Sie die Mausnase leicht zum Boden, um den Bauch für die Injektion freizulegen. Lokalisieren Sie die Mittellinie des Bauches und die Injektion werden links oder rechts von der Mittellinie im unteren Bauchbereich eingesetzt. Injizieren Sie intraperitoneal (i.p.) phosphatgepufferte Kochsalzlösung (PBS) statt LPS in Kontrollmäuse.
   5. Mit der freien Hand wird das entsprechende Volumen (das in Schritt 1.2 berechnete Volumen) der LPS-Arbeitslösung eingespritzt. Stellen Sie sicher, dass die Nadel in die Bauchhöhle eingedrungen ist, sonst können Fehlinjektionen in die Bauchmuskelschicht auftreten. Dennoch sollten Sie die Nadel nicht zu tief in die Peritonealhöhle stecken, um Verletzungen der inneren Organe in diesem Bereich zu vermeiden.
   6. Bringen Sie das Tier vorsichtig mit bis zu 5 Mäusen pro Käfig zurück in den Käfig.

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
LPS Escherichia coli O111:B4	Invivogen, San Diego, CA, USA.	TLRL-EBLPs
Omnican 50 Einweg-Insulinspritze	B. Braun Melsungen, Melsungen, Deutschland	9151125