$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Alle Verfahren, die Tiermodelle betreffen, wurden vom örtlichen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem JoVE veterinärmedizinischen Überprüfungsausschuss überprüft.
1. Abstrich des vaginalen Lumens zur Quantifizierung der GBS-Belastung
- Bereiten Sie pro Maus ein 1,5 ml Mikrozentrifugenrohr vor, indem Sie 100 μl phosphatgepufferte Kochsalzlösung (PBS) hinzufügen. Kurz vor dem Abstrich den Abstrich in PBS vorbefeuchten.
- Fesseln Sie die Maus und führen Sie den Abstrich 10 mm in das vaginale Lumen ein. Drehen Sie den Abstrich vorsichtig viermal im Uhrzeigersinn und viermal gegen den Uhrzeigersinn, wobei Sie leichten Druck auf die Scheidenwand ausüben.
- Übertragen Sie den Abstrich in das 1,5 ml Mikrozentrifugenröhrchen mit 100 μl PBS. Vor dem Plattieren wirbeln Sie das Mikrozentrifugenrohr für ~15 Sekunden vortex, um die Bakterien aus dem Abstrich freizusetzen. Serielle Verdünnung jeder Probe in PBS und Platten mit 20 μl Verdünnungen von 1:10 bis 1:10.000 auf differentiellen Medium-Agarplatten, die gemäß den Anweisungen des Herstellers hergestellt werden. Inkubieren Sie die Platten bei 37 °C für 24 Stunden. Die Kolonien der Gruppe B Streptokokken (GBS) erscheinen entweder knallpink oder mauvefarben. Andere endogene Pflanzen werden gehemmt oder erscheinen als blaue, weiße oder graue Kolonien.