Dieser Artikel beschreibt die Verfahren für die Durchführung eine grundlegende Obduktion einer Maus oder Ratte, und die Sammlung der wichtigsten Organe, sowie eine größere Herausforderung Probe Typen aus für histologische, mikrobiologische und PCR Auswertung.
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Methodenartikel
Diagnostic Necropsy und ausgewählte Gewebe und Probenentnahme bei Ratten und Mäusen
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Es gibt mehrere Sample-Typen, die von einem Tier eingeschläfert gesammelt werden, um möglicherweise zu diagnostizieren oder entdecke Infektionserreger in ein Tier Kolonie. Proper Sammlung von Geweben für weitere histologische Verarbeitung kann Auswirkungen auf die Qualität der Testergebnisse. Dieser Artikel beschreibt das Verhalten eines Bruttogrundgehalt Untersuchung einschließlich Identifizierung von Herz, Leber, Lunge, Nieren und Milz, und wie diese Organe zu sammeln. Zusätzlich vier desto schwieriger Gewebe / Probennahme-Techniken werden demonstriert. Lung Sammlung und Perfusion kann besonders anspruchsvoll wie das Gewebe muss ordnungsgemäß mit einem Fixativ, um für Innere des Gewebes richtig zu fixieren und gründliche histologische Untersuchung zu ermöglichen aufgeblasen werden. Dieser Artikel zeigt, die Schritt für Schritt Technik, um die Lunge zu entfernen und pumpen sie mit Fixativ, um eine optimale Fixierung des Gewebes innerhalb von 24 Stunden zu erreichen. Brain-Sammlung kann ähnlich herausfordernd wie das Gewebe weich und leicht beschädigt werden. Dieser Artikel zeigt, die Schritt für Schritt Technik zu entlarven und entfernen Sie das Gehirn aus dem Schädel mit minimaler Schädigung des Gewebes. Die mesenterialen Lymphknoten ist ein gutes Beispiel geben, in denen viele gemeinsame Infektionserreger erkennen als Darmviren länger anhalten in den Lymphknoten, als sie im Kot abgestoßen werden. Dieser Artikel zeigt, die Schritt für Schritt Verfahren zum Auffinden und aseptisch Entfernen der mesenterialen Lymphknoten. Schließlich kann die Identifizierung von Infektionserregern der Atemwege durch bakterielle Kultur oder PCR-Tests von Nasen-und / oder bronchiale Flüssigkeit ansaugt bei der Obduktion entnommen durchgeführt werden. Dieses Verfahren beschreibt, Beschaffung und Vorbereitung der Atemwege absaugen Probe für die Bakterienkultur und PCR-Tests.
Protokoll
1. Vorbereitung für die Autopsie
- Wichtige Teile der grobe Obduktion (Autopsie) sind die Geschichte des Tieres und der Beschreibung der Befunde.
- Ein Veterinärpathologe Lesen Ihrer Histopathologie Dias können nicht das Tier gesehen haben und sich auf Sie verlassen für die Hintergrund-Informationen.
- Beschreiben Sie genau, was Sie, bevor Sie das Tier einschläfern zu sehen. Zum Beispiel, "weiblichen Maus, einer von fünf in den Käfig; C57BL/6N; geneigtem Kopf nach rechts" oder "braunen männlichen Ratten, Stamm unbekannt; Tier kratzt, es gibt kreisrundem Haarausfall auf dem Rücken, in der Nähe des Schwanzes und Kopf ".
- Verwenden Sie ....
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Diskussion
Die Datensammlung am Ende der Studie kann eine Obduktion der Tiere. Beschreiben Sie auch, was man sieht und denken Sie daran, alle Gewebe zu untersuchen. Diese Verfahren sind in erster Linie auf Autopsie und Probennahme für Infektionskrankheiten Überwachung zu optimieren konzipiert, aber die meisten sind leicht zu konzentrieren Untersuchungen von mutmaßlichen Krankheit Vorfälle oder Ausbrüche, in denen vielleicht nur eine Teilmenge der Prozeduren eingesetzt werden würden angepasst. Viele der Verfahren sind auch für Nekr.......
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Offenlegungen
Die Autoren sind alle Mitarbeiter von Charles River Labor Nagetier diagnostischen Labor, wo diese Dienste kommerziell angeboten werden.
Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Reagent Name | Firma | Katalog-Nummer | Kommentare |
| Schneidbrett | Thermo Electron Corp Cat # 36114 | Cat # 36114 | |
| Kleine Schere | Roboz | RS-5910, G204 | 23mm Klingen, 3,5 "Länge, gerade |
| Medium Schere | Roboz | RS-6808, G207 | 5 " |
| Große Schere | Roboz | RS-6826, G65 " | 6,25 " |
| Pinzetten-Curved | Roboz | RS-8254 (M1/21004) | 4,5 ", gezahnt, leichten Kurve |
| Pinzetten-Microdissecting | Roboz | RS-5238 | Hudson-(Ewald) |
| Pinzetten-Tissue Zange | Roboz | RS - 8160 | Rat Zahn |
| Flamme Sterilisator | Oxford Labware Produkte | Bacti-Cinerator # 5889-001007 | |
| Skalpell | Cancer Diagnostics, Inc. | Finger Skalpelle Nr. 60, Kat. Nr. FS0060 | |
| Pipetten | VWR | Pasteur Pipettieren Sie 5 4.3 ", Kat. Nr. 14672-400 | |
| Autoclave Taschen | Proper Manufacturing Company | Sterilisator Bag Papier Beutel Cat # 021002 (3100923) E09110 | Für Pasteurpipetten |
| Peleusball | VWR | Cat # 56310-240 | |
| Eppendorf-Röhrchen | Sarstedt | SafeSeal Mikroröhrchen 2ml, Ref # 72,695 | |
| Eppendorf-Röhrchen | Argos | 5 ml Mikroröhrchen Cat # T20765-C | |
| Spritze | BD (Beckton Dickenson) | 1ml-309602 3 ml-300910 5ml-10ml 309603 Cat # 309604 20ml Cat # 309661 | |
| Needles | BD | 26G-18G 309625-305195 | |
| Neutral gepuffertem Formalin | VWR | 20L 10% NBF, Kat. Nr. 16004-128 | |
| Saline | ThermoScientific | Buffered Saline Blood Bank, Kat. Nr. 23-309-178 | |
| Trypticase Soja-Brühe | Becton Dickenson | TSB: Getrocknete, Kat. Nr. 211825 | |
| Phosphat-gepufferte Kochsalzlösung | Sigma Aldrich | HA Buffer, Cat # p3813-10PAK | |
| Formalin Tassen | VWR | 4 Unzen Cat # 36318-852 8 Unzen Cat # 36318-860 16 Unzen Cat # 36318-858 | |
| Große Formalin Tassen | Oakridge Produkte | 32 Unzen-Container Cat # 0432-1100 | |
| Extra große Formalin Tasse | VWR | HDPE Multipurpose 160 Unzen Behälter Cat # 89038-282 | |
| Nahtmaterial | Henry Schein | Geflochtene Seide chirurgisches Nahtmaterial, Ref # 100-5000, M766750 | Für Mauslunge Inflation |
| Schnur | Staples | Cat # QUA-46173 | Für Rattenlunge Inflation |
Referenzen
- AVMA. AVMA Guidelines on Euthanasia. , (2007).
- Feldman, D. B., Seely, J. C. Necropsy Guide: Rodents and the rabbit. , CRC Press. (1988).
- King, J. M., Dodd, D. C., Roth, L. The Necropsy Book. , 4th edn, C.L. Davis Foundation. (2006).
- Kittel, B. <....
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Nachdrucke und Genehmigungen
