Extraktion einer intakten Niere aus einer Maus: Eine Technik zur Gewinnung einer Niere ohne Nierenkapsel aus Mausmodellen

Zusammenfassung

Quelle: Grainger, N. et al. Isolierung und Bildgebung von lebenden, intakten Schrittmacherregionen des Nierenbeckens von Mäusen durch Vibratom-Schnitte. J. Vis. Exp. (2021)

In diesem Video beschreiben wir das Verfahren zur Nierenextraktion aus dem retroperitonealen Raum der Maus. Die entnommene Niere kann weiter mikropräpariert werden, um eine intakte Niere ohne Nierenkapsel und die umgebende Fettschicht zu erhalten.

Protokoll

Alle Verfahren, an denen Tiermodelle beteiligt sind, wurden vom lokalen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss von JoVE überprüft.

>1. Nieren-Dissektion

1. Betäubung von Mäusen durch Inhalation von 3–4% Isofluran in einer beatmeten Haube. Bestätigen Sie die Einleitung einer tiefen Anästhesie durch Verlust des Zehen- und/oder Schwanzklemmreflexes und euthanasieren Sie die Mäuse dann durch Zervixluxation.
2. Tragen Sie 70%iges Ethanol auf die Brust auf, um das Fell zu befeuchten. Öffnen Sie die Bauchhöhle mit einer externen Präparierschere über einen Längssch....

Ergebnisse

Abbildung 1: Grundlegende Anatomie der Niere und Lage der PKJ-Schrittmacherregion.(A) Diagramm der intakten Niere, das die Ausrichtung des RP und des Harnleiters zeigt. Die Nierenarterie und die Nierenvene sind rot bzw. blau dargestellt. (B) Die intakte Niere kann entlang einer sagittalen Ebene geschnitten werden, um den inneren Aspekt der Niere freizulegen, einsc.......

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
60 mm x 15 mm Petrischale	Sigma Aldrich	Nr. P5481	Nierenscharfe Sezierschale
Saugpapier	Fisher Scientific	06-666A	Zum Trocknen der Niere vor dem Auftragen Leim
B6; 129S-GT(ROSA)26Sor/J	Das Jackson-Labor	Artikel-Nr.: 13148	GCaMP3-Mäuse
B6; 129S-GT(ROSA)26Sor/J	Das Jackson-Labor	Artikel-Nr.: 24105	GCaMP6f-Mäuse
B6. FVB-Tg(Myh11-cre/ERT2)1Soff/J	Das Jackson-Labor	19079	smMHC-CRE-Mäuse
C57BL/6-TG(Pdgfra-cre)1Clc/J	Das Jackson-Labor	Artikel-Nr.: 13148	PDGFRa-CRE Mäuse
Ethanol	Phamco-Aaper	SDA 2B-6	Zum Sezieren
Extrafeine Bonn Schere	Werkzeuge für die Feinwissenschaft	Nr. 14083-08	Wird für interne Präparierscheren verwendet
Feine Schere	Werkzeuge für die Feinwissenschaft	Artikel-Nr.: 14060-09	Wird für externe Präparierscheren verwendet
Pinzette mit feiner Spitze	Werkzeuge für die Feinwissenschaft	Nr. 11254-20	Wird für die feine Dissektion der Niere verwendet
Isofluran	Baxter	NDC-1001936060	Für die Anästhesie
Silikon-Elastomer	Fisher Scientific	NC9285739	Sylgard 184
Student Adson Pinzette	Werkzeuge für die Feinwissenschaft	91106-12	Zum sanften Halten und Bewegen des Niere
Student Dumont Pinzette	Werkzeuge für die Feinwissenschaft	91150-20	Wird für interne Präparierzangen verwendet
Vannas Federschere	Werkzeuge für die Feinwissenschaft	Nr. 15000-03	Zum scharfen Sezieren und Reinigen von isolierte Niere