Kryokonservierung des Gehirns von Mäusen durch Einfrieren: Eine Technik zum schnellen Einfrieren ganzer Mäusehirnproben für die histologische Analyse

Zusammenfassung

Quelle: Comba, A. et al. Laser-Capture-Mikrodissektion von Gliom-Subregionen zur räumlichen und molekularen Charakterisierung von intratumoraler Heterogenität, Oncostreams und Invasion. J. Vis. Exp. (2020)

Dieses Video zeigt die Kryokonservierung des Gehirns einer Maus, um diskrete anatomische Bereiche oder spezifische Zellpopulationen aus dem Tumorgewebe zu isolieren. Diese Technik ist entscheidend, um eine optimale optische Auflösung der Morphologie des Hirngewebes für die anschließende Analyse zu erhalten.

Protokoll

>1. Kryokonservierung von Gehirnen, die Gliomtumoren beherbergen

1. Bereiten Sie vor der Kryokonservierung des Gehirns ein mit kaltem Isopentan/2-Methylbutan gefülltes Glas vor und geben Sie es in einen mit flüssigem Stickstoff gefüllten Behälter. Lassen Sie das Lösungsmittel abkühlen.
2. Nehmen Sie das Gehirn aus der 30%igen Saccharoselösung und tupfen Sie es auf einem Filterpapier trocken.
3. Beschriften Sie die Kryoform mit einem Permanentmarker. Geben Sie vorsichtig ca. 5 ml OCT (optimale Schnitttemperaturverbindung) in die Mitte des Kryomolds, um Luftblasen zu vermeiden.
4. Legen Sie das Gehirn in einen Kryomold, der ....

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
Entfernen Sie Einweg-Einbettungsformen	Elektronenmikroskopie	70182
Kryostat für die Forschung	Leica	CM3050s
Tissue-Plus O.C.T. Compound	Fisher Scientific	Tel.: 23-730-571