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Alle Verfahren, an denen Tiermodelle beteiligt sind, wurden vom lokalen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss von JoVE überprüft.
>1. Induktion der Tetracyclin-abhängigen Gen- oder shRNA-Expression
VORSICHT: Doxycyclin kann schädlich sein. Bitte beachten Sie das Sicherheitsdatenblatt.
HINWEIS: Abhängig von der Art und Dauer des Experiments kann Doxycyclin mit Trinkwasser zugeführt werden.
- Für Kurzzeitexperimente (<10 Tage) verabreichen Sie Doxycyclin über das Trinkwasser unter Verwendung des folgenden Protokolls.
- 5 g Saccharose in 100 ml Leitungswasser auflösen. Autoklav.
- 100 mg Doxycyclin-Hyclat werden in 5 ml Saccharoselösung (Schritt 1.1.1) in einem konischen 15-ml-Röhrchen gelöst.
- Mit einer 10-ml-Spritze die Lösung durch einen 0,2-μm-Filter sterilfiltrieren. Zu der in Schritt 1.1.1 hergestellten Saccharoselösung geben.
- Geben Sie der Maus Doxycyclin-Saccharose-Lösung als Trinkwasser. Täglich kontrollieren und ersetzen, wenn die Lösung trüb wird, was auf eine bakterielle Überwucherung hinweist (klare Lösung spätestens nach drei Tagen ersetzen).