Genom-Editierungstechniken

Dieses Video erklärt das Konzept von CRISPR-vermittelten Cytosin-Baseneditoren zur Induktion einer gezielten Nukleotidsubstitution.

In diesem Video demonstrieren wir die All-in-One-CRISPR-Cas9-basierte Genomeditierung in kultivierten Zellen, bei der Cas9 und sgRNA den Zellen als ein einziges Plasmidkonstrukt zur Verfügung gestellt werden. Das CRISPR-Cas9-System und das gewünschte einzubringende Gen wurden durch Elektroporationstechnik in die Zellen eingeführt, um eine erfolgreiche Geneditierung zu ermöglichen.

Dieses Video demonstriert eine Technik der Zinkfinger-Nuklease-basierten Genomeditierung in menschlichen pluripotenten Stammzellen (hPSCs). Da hPSCs potenziell in verschiedene Zelltypen differenziert werden können, ist diese Technologie hilfreich für patientenspezifische in vitro pathologische und pharmakologische Studien.

Dieses Video beschreibt eine präzise Genom-Editing-Technik in humanen induzierten pluripotenten Stammzellen oder hiPSCs, bei der TALENs verwendet werden, um doppelsträngige Brüche an einem Zielort zu erzeugen, die eine homologiegerichtete Reparatur für die Genintegration von Fluoreszenzproteinen induzieren.

In diesem Video demonstrieren wir die phiC31-vermittelte ortsspezifische Transgenintegration im Anopheles-Embryo mittels Mikroinjektion. Diese Methode hilft dabei, gewünschte Gene in ein Wirtssystem für Forschung und industrielle Anwendungen einzubringen.

In diesem Video demonstrieren wir die Erzeugung von transgenen Arabidopsis-Pflanzen, die durch Agrobacterium-vermittelte binäre bakterielle künstliche Chromosomen-basierte Gentransformation stabiles Transgen exprimieren.

In diesem Video demonstrieren wir ein Verfahren zur Erzeugung einer stabilen transgenen Zebrafischlinie, die konstitutiv ein Fluoreszenzspannungsindikatorprotein exprimiert, nach der Co-Injektion des Tol2-Transposon-Systems, bestehend aus der Transposase-mRNA und dem Tol2-Transposon-Konstrukt, das den Fluoreszenzspannungsindikator kodiert.

Dieses Video demonstriert das Verfahren zur Erzeugung von Motoneuronen durch Transfektion menschlicher iPSCs mit dem PiggyBac-Transposon-System durch die ektopische Expression von linienspezifischen Transkriptionsfaktoren.

Dieses Video zeigt ein auf CRISPR-Interferenz basierendes Gen-Silencing in pathogenen Leptospiren. Die gezielte Unterdrückung der Genexpression mit einem CRISPR/Cas-System, das die mRNA-Bildung blockiert, hilft bei der Identifizierung von Kandidatengenen für pathologische und pharmakologische Studien.

Dieses Video beschreibt ein Verfahren zum Knockout des Zielgens unter Verwendung eines Tamoxifen-induzierbaren Cre-Rekombinase-Systems nach intraperitonealer Injektion von Tamoxifen in einem Mausmodell.

Dieses Video beschreibt eine Gen-Knockout-Technik, bei der ein CRISPR-Verkettungsgerät verwendet wird, um mehrere Gene in kultivierten Darmorganoidzellen von Mäusen gleichzeitig auszuschalten. Diese Methode wird verwendet, um ein erkranktes Gen auszuschalten und die Funktion eines Gens und seiner Parameter aufzuklären.

In diesem Video demonstrieren wir eine Methode zur Transduktion von lentiviralen shRNA-Vektoren, um stabile Knockdown-Zelllinien in immortalisierten hämatopoetischen Stamm- und Vorläuferzellen (iHSPCs) zu erhalten.

Dieses Video demonstriert das Genexpressionssystem von Tetracyclin oder Tet-On in einem Mausmodell. In Gegenwart von Doxycyclin, einem Tetracyclin-Derivat, wird das Tet-On-System, bestehend aus reversem Tetracyclin-kontrolliertem Transaktivatorprotein, aktiviert und exprimiert das interessierende Gen.

In diesem Video beschreiben wir ein Verfahren zur reversen Transfektion von siRNA in Adipozyten, um die Expression eines Zielproteins zu modulieren.

Dieses Video beschreibt die Methode zur Regulierung der Genexpression in kultivierten Zellen durch Transfektion mit einem Plasmid, das ein Gen von Interesse und ein regulatorisches Plasmid enthält. Die Expression dieses Plasmids kann durch Tetracyclin oder seine synthetischen Analoga gesteuert werden, was dieses System zu einem nützlichen Modell für die Untersuchung der regulierbaren Genexpression macht.

Dieses Video beschreibt eine Gen-Knockdown-Technik mit translational blockierenden Morpholinos, die im Einzelzellstadium des Höhlenfisches mikroinjiziert werden. Morpholinos sind DNA-Oligonukleotide, die an die komplementäre Sequenz der Ziel-mRNA binden und deren Translation in ein Protein blockieren. Folglich werden Morpholinos als molekulare Werkzeuge verwendet, um die Expression eines Gens vorübergehend zu stoppen oder zu reduzieren.