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Methodenartikel
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8. Juli 2025
Quelle: Borges, C. R. et al., Bewertung des oxidativen Stresses in biologischen Proben mit dem Thiobarbitursäure-Reaktivsubstanz-Assay. J. vis. exp. (2020)
Dieses Video zeigt den Thiobarbitursäure-Reaktivsubstanzen-Assay (TBARS) zur Beurteilung von oxidativem Stress in biologischen Proben.
Alle Eingriffe mit menschlichen Teilnehmern wurden in Übereinstimmung mit den institutionellen, nationalen und internationalen Richtlinien für das Wohlergehen des Menschen durchgeführt und vom lokalen institutionellen Prüfungsausschuss überprüft
1. TBARS-Assay
HINWEIS: Sobald der TBARS-Assay gestartet ist, sollte er ohne Unterbrechung beendet werden.
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| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| 1x steril PBS pH 7,4 1 L | VWR, PA | 101642--262 | Reagenz für die Zelllyse |
| 50 mL selbststehendes Zentrifugenröhrchen | Corning, Vereinigte Staaten von Amerika | CLS430897 | Allgemeines Material |
| 96-Well-Platte, unbehandelt, klar, mit Deckel, nicht steril | Thermo Fisher Scientific, MA | 280895 | Zur Messung der Absorption |
| Amicon Ultra-0.5 100 kD Zentrifugal-Spin-Filtergerät | Fisher Scientific, NH | UFC510024 | LDL-Reinigung |
| Verschlüsse für Glasröhren | Thermo Fisher Scientific, MA | 14-930-15D | Für den TBARS-Assay |
| Kupfer II Chlorid | SIGMA, MO | Artikel-Nr.: 222011-250G | Zur Induktion der Oxidation |
| Kulturröhrchen, Einweg, mit Schraubverschluss, Borosilikatglas (13 x 100 mm) | VWR, PA | Tel.: 53283-800 | Für den TBARS-Assay |
| Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM) | ATCC, VA | Nr. HB-8065 | HepG2-Zellmedien |
| Eppendorf Safe-Lock Röhrchen, 1,5 mL | eppendorf, NY | 22363204 | Allgemeines Material |
| Eppendorf Safe-Lock Röhrchen, 2,0 mL | Genesee Sceitific, Kalifornien | 22363352 | Allgemeines Material |
| Fötales Rinderserum US-Quelle | Omega Scientific, Kalifornien | FB-11 | Für die Zellkultur |
| Eisessig | SIGMA, MO | 27225-1L-R | TBARS Reagenz |
| Halt Proteasehemmer Cocktail (100x) | Thermo Scientific, MA | Artikel-Nr.: 87786 | Reagenz für die Zelllyse |
| HEPES | SIGMA, MO | H3375-250G | LDL-Lösungsmittel |
| Salzsäure (HCl) | Fisher Scientific, NH | Nr. A144-212 | Reagenz für die Zelllyse |
| Legend Micro 17 Zentrifuge | Thermo Scientific, MA | 75002431 | Allgemeines Material |
| Lipoprotein niedriger Dichte, menschliches Plasma | Athen Forschung & Technologie, GA | Tel.: 12-16-120412 | Prototyp einer biologischen Matrix |
| Magnetrührstäbchen, Octagon 6er-Sortiment | VWR, PA | Artikel-Nr.: 58948-025 | Allgemeines Material |
| Malondialdehyd bis (Dimethylacetal) | SIGMA, MO | 8207560250 | TBARS Standard |
| Multiskan Go Mikroplatten-Spektralphotometer | Fisher Scientific, NH | 51119200 | Zur Messung der Absorption |
| NP-40 | EMD Millipore Corp, MA | Artikel-Nr.: 492016-100ML | Reagenz für die Zelllyse |
| Natriumchlorid | SIGMA, MO | Nr. S7653-1KG | Reagenz für die Zelllyse |
| Natriumdodecylsulfat (SDS) | SIGMA, MO | Artikel-Nr.: 436143-100G | TBARS Reagenz |
| Natriumhydroxid | SIGMA, MO | 367176-2,5KG | TBARS Reagenz |
| SpeedVac Konzentrator | Thermo Scientific, MA | SC250EXP | Zur Konzentration von Zelllysaten |
| Thiobarbitursäure | SIGMA, MO | T5500-100G | TBARS Reagenz |
| TRIS-Basis | Fluka, GA | Artikel-Nr.: 93362 | Reagenz für die Zelllyse |
