Massenphotometrie zur Untersuchung von Antigen-Antikörper-Wechselwirkungen auf Einzelmolekülebene

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Quelle: Wu, D. et. al., Schnelle Bestimmung der Antikörper-Antigen-Affinität durch Massenphotometrie. J. Vis.(2021)

In diesem Video demonstrieren wir die Verwendung von Massenphotometrie zur Untersuchung von Antigen-Antikörper-Wechselwirkungen in einer Durchflusskammer. Das gebündelte Licht streut je nach Masse der Moleküle unterschiedlich. Ein Detektor sammelt das Streulicht und erzeugt das Interferenzmuster in Form von Flecken unterschiedlicher Intensität, die mit den Molekülmassen korrelieren.

Protokoll

1. Bereiten Sie die Durchflusskammern vor

Reinigen Sie die Glasdeckgläser
1. Spülen Sie die Deckgläser im Format 24 mm x 50 mm mit Waschflaschen mit destilliertem Wasser, Ethanol und Isopropanol in der folgenden Reihenfolge aus: Wasser, Ethanol, Wasser, Isopropanol, Wasser. Trocknen Sie die Deckgläser mit einem Strahl sauberen Stickstoffs. Es ist wichtig, die Deckgläser von oben nach unten zu spülen und die untere Ecke mit einer weichen Pinzette festzuhalten. Trocknen Sie das Deckglas in die gleiche Richtung, um eine Übertragung von Verunreinigungen von der Pinzette zu vermeiden (Abbildung 1A).
2. Spülen Sie auf ähnliche W....

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Ergebnisse

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Abbildung 1: Vorbereitung und Beladung der MP-Durchflusskammer. (A) Halteposition des Deckglases für den Reinigungsvorgang. (B) Ausrichtung des Deckglases 24 x 24 mm (mittlere Schicht) und des doppelseitigen Klebebandes (obere Schicht) auf der Oberfläche der Aluminiumfolie (untere Schicht, nicht abgebildet). Blaue gestrichelte Linien zeigen die Position der Schnit.......