Beurteilung der chemisch induzierten Kolitis durch immunhistochemische Analyse von Dickdarmgewebeschnitten

Zusammenfassung

Quelle: Du, Y. W. et al., Auswirkungen der Abschaffung von Geschmackssignalproteinen auf Darmentzündungen in einem Mausmodell für entzündliche Darmerkrankungen.J. Vis. Exp.(2018)

Dieses Video zeigt die Beurteilung von chemisch induzierter Kolitis durch immunhistochemische Färbung von Dickdarmgewebe von Mäusen. In einem gefärbten Gewebeschnitt stellt das Vorhandensein einer großen Anzahl von immunresponsiven Zellen im geschädigten Gewebe die Infiltration von Immunzellen während einer Colitis dar.

Protokoll

Alle Verfahren, an denen Tiermodelle beteiligt sind, wurden vom lokalen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss von JoVE überprüft.

>1. Vorbereitung von Mäusen und DSS

1. Halten Sie die Knockout-Mäuse (^{α-Gustducin-/-}) und die auf Alter, Geschlecht und Körpergewicht abgestimmten Wildtyp-Kontrollmäuse (α-Gustducin^+/+) C57BL/6 einzeln in sauberen Käfigen.
   Anmerkung: Die Knockout-Mäuse werden seit über 20 Generationen mit C57BL/6-Mäusen rückgekreuzt und haben einen nahezu 100%igen genetischen Hintergrund von C57BL/6.
2. 30 g Dextransulfat-Na....

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
Antikörper
CD45	BD Biowissenschaften	550539
CD3	BD Biowissenschaften	555273
Nr. B220	BD Biowissenschaften	550286
CD11b	BD Biowissenschaften	550282
Ly6G	BD Biowissenschaften	551459
Reagenz
Dextransulfat-Natriumsalz (DSS)	MP Biomedizin	2160110
Streptavidin-HRP-Komplex	BD Pharmingen	551011
Phosphatgepufferte Kochsalzlösung (PBS)	Sangon Biotech	B548117
BD 10 ml Spritze	BD Biowissenschaften	309604
Instrumente und Ausrüstungen
Gleichgewicht
Schere
Zange
Gläser färben
Software
Imag-Pro Plus	Medien Kybernetik, Inc.