Immunantwort

Dieses Video zeigt in vivo Bildgebung, um die Rekrutierungsdynamik von Neutrophilen an einer Infektionsstelle in einer immungeschwächten, transgenen Maus mit GFP-exprimierenden Neutrophilen zu untersuchen. Dabei werden Leuchtbakterien injiziert, um eine Infektion auszulösen. Dies führt zur Rekrutierung von Neutrophilen an der Infektionsstelle, deren Verfolgung durch Bildgebung erfolgt.

In diesem Video demonstrieren wir die Aktivierung von aus Knochenmark gewonnenen Makrophagen als Reaktion auf bakterielle Lipopolysaccharide und intravenöses Immunglobulin.

Dieses Video zeigt die Aktivierung der Peritonealmakrophagen einer Maus mit intravenösem Immunglobulin und bakteriellem Lipopolysaccharid. Durch die Co-Stimulation werden die Peritonealmakrophagen zu entzündungshemmenden Makrophagen mit immunregulatorischer Aktivität aktiviert.

Dieses Video demonstriert eine ex vivo Technik zur Induktion des Zelltods im Gehirn, vermittelt durch zytotoxische CD8+ T-Zellen. Nach der Gewinnung von Hirnschnitten werden aktivierte Oligodendrozyten-gerichtete CD8+ T-Zellen auf die Schnitte übertragen, um die Myelinscheide und die Oligodendrozyten anzugreifen. Nach der Inkubation können die Schädigung des Myelins und der neuronale Tod in den interessierenden Regionen histologisch beurteilt werden.

In diesem Video beschreiben wir ein Protokoll, um die Wirksamkeit eines azellulären Pertussis-Impfstoffs gegen Bordetella pertussis-Infektionen bei Mäusen zu testen. Nach der Impfung wurden die Mäuse einer Infektion unterzogen, und ihr Gewebehomogenat wurde kultiviert, um die Bakterienkolonien als Auslese der impfstoffinduzierten schützenden Immunität zu analysieren.

In diesem Video beschreiben wir eine Methode, um die Organellendynamik in B-Lymphozyten nach ihrer Aktivierung mit antigenbeschichteten Mikrokügelchen zu untersuchen.

Dieses Video zeigt die Aktivierung von B-Zellen in vitro. Der Prozess beinhaltet eine Antigeninteraktion mit B-Zell-Rezeptoren, die zum Umbau des Zytoskeletts, zur Bildung von Immunsynapsen, zur Bewegung von Lysosomen, zur Antigeninternalisierung, zur Verarbeitung und anschließenden Präsentation auf MHC-Molekülen zur B-Zell-Aktivierung führt.

Dieses Video demonstriert eine Technik zur Generierung eines chemisch induzierten Mausmodells für Colitis — eine entzündliche Darmerkrankung. Die Maus darf eine Dextran-Natriumsulfat (DSS)-Lösung für eine angemessene Dauer zu sich nehmen. Beim Verzehr schädigt DSS die Schleim- und Epithelschichtbarriere im Dickdarm, so dass Darmmikroben in das darunter liegende Gewebe eindringen können – wo sie von den ansässigen Immunzellen wahrgenommen werden, um eine übertriebene Immunantwort zu vermitteln,...

In diesem Video demonstrieren wir die Wirkung verschiedener Anti-c-fms-Antikörperkonzentrationen auf die Osteoklastogenese, d.h. den Prozess der Osteoklastenbildung aus Osteoklastenvorläuferzellen.

Dieses Video zeigt die Quantifizierung von Entzündungsmediatoren während einer Infektion durch Inkubation von Immunzellen aus menschlichem Lungengewebe mit Haemophilus influenzae. Die Durchflusszytometrie wird verwendet, um die Zytokinfluoreszenz in markierten Lymphozyten zu messen, die mit der Produktion von proinflammatorischen Zytokinen als Reaktion auf eine bakterielle Infektion korreliert.

In diesem Video demonstrieren wir einen in vitro Chemilumineszenz-Assay, um die Erzeugung von reaktiven Sauerstoffspezies durch Neutrophile nach Exposition gegenüber einem opsonisierten bakteriellen Biofilm nachzuweisen.

Dieses Video zeigt einen in vitro Assay zur Untersuchung der Interaktion zwischen Neutrophilen und Biofilmen. Die im Biofilm eingebetteten pathogenen Bakterien und isolierten Neutrophilen wurden mit Fluoreszenzmarkierungen markiert und die Immunantwort der Neutrophilen und die Umgehung der Immunantwort durch die Bakterien mit einem Fluoreszenzmikroskop bewertet.

Dieses Video zeigt eine Methode zum Nachweis der NLRP3-Inflammasomaktivierung in Makrophagen mit Hilfe von fluoreszierenden Reportersonden. Die Zellen werden mit Kaliumionophoren und Glycin behandelt, um die Inflammasom-Assemblierung und die Caspase-1-Aktivierung zu induzieren. Fluoreszierende Reportersonden visualisieren aktivierte Caspase-1, und Zellen werden mit einem Fluoreszenzfarbstoff gefärbt, um die Zellkerne sichtbar zu machen.

Dieses Video demonstriert eine Technik zur Untersuchung der Bildung von Inflammasomen der NOD-ähnlichen Rezeptorfamilie Pyrin Domain-containing 3 (NLRP3) in primären Makrophagen mittels Immunfluoreszenz. Die Makrophagen werden zunächst mit bakteriellen Lipopolysacchariden (LPS) geprimt, um die NLRP3-Proteinexpression hochzuregulieren. Die Exposition der Makrophagen gegenüber Nigericin – einem Kaliumionophor – führt zur Aktivierung von NLRP3 und zur Bildung von Inflammasomen, die mittels...

Dieses Video zeigt den Laktat-Dehydrogenase-Assay zum Nachweis des Inflammasom-vermittelten Makrophagen-Todes. Die Makrophagen werden zum Priming Lipopolysaccharid ausgesetzt, gefolgt von einer Exposition gegenüber Nigericin, um einen Inflammasom-induzierten Zelltod zu verursachen, der durch den Laktatdehydrogenase-Assay bestimmt wird.

Dieses Video zeigt die Induktion und Visualisierung von extrazellulären Neutrophilen-Fallen oder NETs in vormarkierten Neutrophilen unter Verwendung von Patientenserum, das zytoplasmatische Antikörper gegen Neutrophile enthält. Darüber hinaus ermöglicht die Verwendung eines undurchlässigen DNA-Farbstoffs und der Fluoreszenzmikroskopie die Visualisierung von NETs.

Dieses Video demonstriert die Lipidisolierung aus menschlichen Neutrophilen durch ein zweiphasiges Lösungsmittelsystem unter Verwendung von Methanol und Chloroform.

In diesem Video demonstrieren wir einen Zytotoxizitätsassay zur Beurteilung von Cryptococcus neoformans, einem pathogenen Pilz, Infektionen in Makrophagen. Die Zytotoxizität wird durch die Freisetzung des zytoplasmatischen Laktatdehydrogenase-Enzyms aufgrund der Makrophagenlyse bestimmt, die durch eine Cryptococcus neoformans-Infektion verursacht wird.

Dieses Video zeigt ein auf permeablen Membraneinsätzen basierendes Infektionssystem, um die Auswirkungen von sezernierten bakteriellen Toxinen zu bewerten. Durch die Eliminierung des direkten Kontakts zwischen dem bakteriellen Erreger und den Wirtszellen durch eine durchlässige Membran ermöglicht diese Technik die Untersuchung der Wirkung von Toxinen, die von pathogenen Bakterien auf Säugetier-Wirtszellen abgesondert werden.

Dieses Video zeigt ein durchlässiges Membraneinsatzsystem, um die Auswirkungen von bakteriellen Toxinen auf Wirtszellen auf kontrollierte und isolierte Weise zu untersuchen. Dieser Ansatz ermöglicht die selektive Exposition der Zellen gegenüber den Toxinen bei gleichzeitiger Beibehaltung einer physikalischen Trennung, die die natürliche Wirt-Erreger-Interaktion nachahmt.

Dieses Video demonstriert den bakteriellen Adhärenz-Assay zur Bewertung der GFP-markierten bakteriellen Adhärenz an epithelialen Zellkulturen, um die Dynamik von Wirt-Pathogen-Interaktionen mit Hilfe von fluoreszenzmikroskopischer Bildgebung zu untersuchen.

Dieses Video demonstriert eine Technik zum Nachweis der lokalen und globalen Kalziumionenreaktion bei einer Shigelleninfektion von menschlichen Epithelzellen. Shigella dringt in die Wirtszellen ein und setzt Invasionseffektoren frei, die sich auf den intrazellulären Kalziumspiegel auswirken. Die Amplitude und Frequenz des lokalen und globalen zytosolischen Calciums werden mit Hilfe eines Fluoreszenzindikators untersucht.

Dieses Video analysiert die Immunsynapsenbildung zwischen T-Zellen in ungereinigten Pan-Leukozyten-Präparaten und Staphylococcus aureus Enterotoxin B, SEB-beladenen Raji-Zellen. Eine CD3- und F-Aktin-Anreicherung wird in der Immunsynapse mittels bildgebender Durchflusszytometrie beobachtet.

Dieses Video zeigt einen Assay zur Untersuchung der Regulation der mesenchymalen Stammzellen (MSC) der Makrophagen-Phagozytose in einer Co-Kultur. Bei der Co-Kultivierung von MSC mit Makrophagen werden nicht-opsonisierte Zymosanpartikel, die an ein pH-empfindliches Fluorophor konjugiert sind, zugegeben, die von den Makrophagen phagozytiert werden. Mit zunehmender Phagozytose steigt die Fluoreszenzintensität an, was die Bestimmung der MSC-vermittelten Regulation der phagozytären Aktivität...

In diesem Video demonstrieren wir die intrazisternale Verabreichung von Neisseria meningitidis in ein Mausmodell, um eine Meningitis-Infektion zu erzeugen.

In diesem Video beschreiben wir eine Methode zur Identifizierung der niedermolekularen Kinase-Inhibitoren, die die Apoptose von selbstreaktiven CD4+CD8+ doppelt-positiven unreifen Thymozyten modulieren. Die Apoptose wird in den doppeltpositiven Thymozyten induziert, indem sie mit anti-CD3- und anti-CD28-beschichteten magnetischen Kügelchen aktiviert werden; Es folgt eine Behandlung mit niedermolekularen Inhibitoren und eine Durchflusszytometrie-Analyse, um festzustellen, ob die Inhibitoren die...

In diesem Video beschreiben wir ein Verfahren zur Durchführung einer Nanoinjektion eines einzelsträngigen RNA-Virus mit positivem Sinn in erwachsene männliche Drosophila-Fliegen und untersuchen anschließend die antiviralen Reaktionen, die aufgrund der Infektion ausgelöst wurden. Die Polymerase-Kettenreaktionsanalyse identifiziert die Hochregulierung spezifischer Gene in den infizierten Fliegen, die auf die Aktivierung von Immunantwortwegen hinweisen, einschließlich RNA-Interferenz und...

Dieses Video zeigt die Hämatoxylin- und Eosin-Färbemethode (H&E) zur Bewertung von Dickdarmschäden in einem Mausmodell der DSS-induzierten Kolitis — einer entzündlichen Darmerkrankung. Nach der Isolierung des Dickdarms von einer DSS-behandelten Maus und der Entnahme von Gewebeschnitten hilft die H&E-Färbung der Schnitte, die entzündungsbedingte Gewebeschädigung zu identifizieren.

In diesem Video beschreiben wir die Methodik für den Aufbau eines ex vivo Darmorgankultursystems, um die Wechselwirkungen zwischen Darmgewebefragmenten von Mäusen und spezifischen Darmbakterien zu untersuchen. Die Vorrichtung besteht aus zwei Paaren von Eingangs-Ausgangs-Anschlüssen, wobei das erste das Darmgewebelumen verbindet und die spezifische Bakteriensuspension in dieses zuführt, und das zweite kontinuierlich Medien zu den Vertiefungen der Vorrichtung zuführt, um die Lebensfähigkeit des...

Dieses Video demonstriert eine in vitro Technik, um die Auswirkungen einer antimikrobiellen Behandlung auf Pseudomonas aeruginosa (Pa) Aggregate zu untersuchen. Fluoreszenzmarkierte Pa-Zellen werden als Aggregate gezüchtet, die das Wachstumsmuster während der Infektion nachahmen. Nach der Provokation der Aggregate mit einer subletalen Konzentration des Antibiotikums Colistin erfolgt die Echtzeitbewertung der Bakterien-Antibiotika-Interaktion mittels Fluoreszenzmikroskopie.

Dieses Video zeigt eine in vitro Quantifizierungstechnik zur Bestimmung einer Listeria monocytogenes Infektion von Makrophagen durch den koloniebildenden Unit-Assay. Die Bakterienkolonien auf der Agarplatte stellen die intrazelluläre Bakterienpopulation dar, die dem Wirt-Abwehr-Mechanismus entkommt und in den Makrophagen überlebt.

In diesem Video quantifizieren wir intrazelluläre und extrazelluläre Listeria monocytogenes, ein intrazelluläres pathogenes Bakterium, nach ihrer Infektion von kultivierten Makrophagen in vitro mittels Durchflusszytometrie.

Dieses Video zeigt die Nanoinjektion von Bakteriensuspension in die Körperhöhle der Fliege, was zu einer bakteriellen Vermehrung und Infektion führt. Die Immunantwort der Fliege beseitigt einige Bakterien, während andere der Immunclearion entgehen und im Wirt überleben und eine Infektion verursachen.

Dieses Video zeigt eine Technik, um Drosophila zu infizieren, indem ein pathogenes Bakterium direkt in ihre Körperhöhle eingeführt wird. Diese Methode umgeht Epithelbarrieren und andere passive Abwehrmechanismen und ermöglicht die Induktion einer systemischen Infektion. Nach der Infektion wird die resultierende Immunantwort durch Überwachung der Fliegensterblichkeit und Durchführung nachgeschalteter Assays bewertet.

In diesem Video demonstrieren wir eine Technik zur Messung der bakteriellen Belastung von E. coli nach der Injektion von E. coli in den Thorax von Drosophila melanogaster.

In diesem Video demonstrieren wir den zytopathischen Wirkungsassay zur Bestimmung der infektiösen Virusdosis des Drosophila C-Virus in Gewebekulturen auf Drosophila S2*-Zellen. Eine Reihe von Viruskonzentrationen wird verwendet, um die kultivierten Zellen zu infizieren. Es wird der Anteil der Zellen bestimmt, die strukturelle Veränderungen aufweisen, und diese Daten werden zur Berechnung der infektiösen Dosis der Gewebekultur verwendet.

Dieses Video zeigt eine Methode zur Induktion von Entzündungen der Augenoberfläche und einer Meibom-Drüsendysfunktion in einem Mausmodell. Die Stimulation des Immunsystems der Maus mit einem Immunogen und die spätere Restimulation mit demselben Immunogen fördert die Entzündung der Augenoberfläche, die zu einer Verstopfung der Meibom-Drüsensekretion durch neutrophilenproduzierte aggNETs führt und zu einer Erkrankung des trockenen Auges führt.

Dieses Video zeigt die Aktivierung von Caspase-Proteinen in menschlichen Makrophagen unter Verwendung von bimolekularen Fluoreszenz-Komplementations-Reporterproteinen. Die Pro-Domänen von Caspase-1 sind mit nicht-fluoreszierenden Fragmenten von Venusproteinen fusioniert, die zu Inflammasom-Komplexen rekrutiert werden. Die Nähe von Inflammasomen induziert die Rückfaltung und Fluoreszenz von Venusfragmenten, was die Caspase-Aktivierung in den Makrophagen bestätigt.

Dieses Video zeigt die Wirkung von Tabakproduktzubereitungen, TPPs, auf die Zytokinproduktion aus menschlichen mononukleären Zellen im peripheren Blut mittels Durchflusszytometrie. Die Behandlung der Zellen mit TPP reguliert die Produktion von proinflammatorischen Zytokinen herunter, die nach Lipopolysaccharidstimulation geschätzt wird, gefolgt von Immunfärbung und Durchflusszytometrie-Analyse.

In diesem Video demonstrieren wir die Herstellung von in vitro Biofilm durch S. aureus in einer Poly-L-Lysin-beschichteten Multiwell-Platte. Die biofilmförmige Platte kann für nachgelagerte Experimente verwendet werden.

Dieses Video zeigt eine in vitro Technik zur Stimulation von Lymphozyten über nicht-typisierbare Haemophilus influenzae (NTHi) und zur Beurteilung der Immunantwort. Die Inkubation isolierter mononukleärer Zellen des peripheren Blutes (PBMCs) mit NTHi bewirkt, dass die Bakterienzellen T-Lymphozyten stimulieren, was zur Zytokinproduktion führt. Nach Hemmung der Sekretion von Zytokinen wird eine Immunfluoreszenzfärbung durchgeführt, um die akkumulierten intrazellulären Zytokine in stimulierten...

Dieses Video zeigt die Beurteilung von chemisch induzierter Kolitis durch immunhistochemische Färbung von Dickdarmgewebe von Mäusen. In einem gefärbten Gewebeschnitt stellt das Vorhandensein einer großen Anzahl von immunresponsiven Zellen im geschädigten Gewebe die Infiltration von Immunzellen während einer Colitis dar.

In diesem Video untersuchen wir die Wirkung eines ganzen rauchkonditionierten Mediums, einer brennbaren Tabakproduktzubereitung, auf die Abtötung von K562-Zellen durch mononukleäre Zellen des Effektorsperipheriebluts.

Dieses Video demonstriert eine in vivo Technik zur Bewertung eines Testantigens durch Induktion einer Hautentzündung in einem Mausmodell. Das Testantigen – ein Hapten in einer Öl/Aceton-Lösung – wird topisch auf die Haut des Mausohrs aufgetragen, und die Entzündung der Haut wird nach einer angemessenen Zeit beurteilt.

Dieses Video zeigt ein Stanzbiopsieverfahren, um eine präzise Wunde in einem Mausmodell zu erzeugen. Die Exzision legt die subkutane Hautschicht frei und bietet eine geeignete Stelle für die Untersuchung der Immunreaktionen auf eine lokalisierte Erregerinfektion.