Ein Air-Pouch-Mausmodell für die Lipopolysaccharid-induzierte entzündliche Exsudatsammlung

Zusammenfassung

Quelle: Lu, Q., et al. Detektion von Migration und Infiltration von Neutrophilen bei Mäusen. J. Vis. Exp.(2020).

Dieses Video beschreibt das Verfahren zur Erzeugung eines Luftbeutels im Unterhautgewebe von Mäusen und zum Sammeln von entzündlichen Exsudaten als Reaktion auf die Verabreichung von Lipopolysacchariden in vivo. In diesem Video wird auch die Analyse der neutrophilen Infiltration im Luftbeutel behandelt.

Protokoll

Alle Verfahren, an denen Tiermodelle beteiligt sind, wurden vom lokalen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss von JoVE überprüft.

>1. Assay für Luftbeutel

1. Erste Lufteinblasung
   1. Am Tag 0 werden die Mäuse 3 Minuten lang in einer Gasanästhesiekammer bei einer Geschwindigkeit von 2 l/min vollständig betäubt und die Anästhesie jeder Maus in einer einzigen Beatmungseinheit mit 2 % Isofluran bei einer Geschwindigkeit von 0,5 l/min aufrechterhalten.
      Anmerkung: Eine ausreichende Anästhesietiefe wird durch Einklemmen der Zehen gewährleist....

Ergebnisse

Abbildung 1: Repräsentative Ergebnisse des Air-Pouch-Assays. (A) Abbildung des Air-Pouch-Assays. (B) Repräsentative Ergebnisse der Infiltration von Leukozytenuntergruppen im Air-Pouch-Assay. PBS: Steuerung; LPS: 1 μg/mL LPS. Die Daten werden als Mittelwert ± SD dargestellt.

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
100% Ethanol	Chemische Werke in Peking
100% Methanol	Chemische Werke in Peking
15 mL konisches Zentrifugenröhrchen aus Polypropylen	Falke	Falke
23 G x 1 1/4" Nadel	Bd	Artikel-Nr.: 305120
26 G x 3/8" Nadel	Bd	Artikel-Nr.: 305110
30 g x 1/2" Nadel	Bd	305106
5 mL Spritze	Bd	Z683574
50 mL konisches Zentrifugenröhrchen aus Polypropylen	Falke	Tel.: 14-432-22
Gas-Anästhesie-System	ZS Dichuang	ZS-MV-IV
Phosphatgepufferte Kochsalzlösung (PBS), 1×			Mischen Sie 90% ddH2O mit 10% (v/v) 10×PBS, autoklaviert
Phosphatgepufferte Kochsalzlösung (PBS), 10×			16 g NaCl, 0,4 g KCl, 2,88 g Na2HPO4·2H2O, 0,48 g KH2PO4 (wasserfrei) in 200 mL ddH2O auflösen, pH-Wert 7,4 einstellen, autoklavieren
Lipopolysaccharid (LPS)	Sigma	Nr. L3012
Waschpuffer im Luftbeutel-Assay			Verdünnen Sie 0,5 M EDTA auf 10 mM mit HBSS