Eine Technik zur Generierung eines Adjuvans-induzierten Arthritis-Mausmodells

Zusammenfassung

Quelle: Lu, Q., et al. Detektion von Migration und Infiltration von Neutrophilen bei Mäusen. J. Vis. Exp. (2020).

Dieses Video zeigt eine Methode zur Erzeugung von adjuvans-induzierter Arthritis in einem Mausmodell. Das komplette Freund-Adjuvans (CFA) wird in das Sprunggelenk der Maus und in den periartikulären Bereich injiziert. CFA aktiviert das Immunsystem, was zu einer Infiltration von Neutrophilen und übertriebenen Entzündungen führt.

Protokoll

Alle Verfahren, an denen Tiermodelle beteiligt sind, wurden vom lokalen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss von JoVE überprüft.

>1. Induktion des Adjuvans-induzierten Arthritis (AA) Mausmodells

1. Suspendieren Sie das vollständige Freund-Adjuvans (CFA) durch mindestens 5 s Vortexing, dann ziehen Sie 100 μl Suspension in einen Insulininjektor.
   Anmerkung: Wir empfehlen, in Versuchen einen völlig neuen CFA zu verwenden, um die Sterilität zu gewährleisten.
2. Betäuben Sie Mäuse wie beschrieben.
3. Markieren Sie die gewählte Pfote und injizieren Sie 20 μl CFA in den Sprunggelenksspalt. Injizieren Sie 20 μl Suspension in vier periartikuläre Flecken auf der gewählten Pfote (insgesamt 80 μl).
4. Entfernen Sie die Mäuse aus der Beatmungseinheit und setzen Sie die verarbeiteten Mäuse in eine neue Kammer. Überwachen Sie Mäuse, um sicherzustellen, dass sie atmen, bis sie wieder in der Lage sind, sich zu bewegen.
5. Beurteilen Sie alle 3 Tage den Gelenkdurchmesser, indem Sie den Durchmesser des Sprunggelenks mit einem Taschendickenmessgerät messen (Abbildung 1A).
6. Beurteilen Sie alle 3 Tage den Schweregrad der Arthritis anhand des Arthritis-Bewertungskriteriums (Abbildung 1C): 0, normal, keine Anzeichen von Erythem und Schwellung; 1, die leichteste Arthritis, das Erythem und die leichteste Schwellung, die auf die Fußwurzel oder das Sprunggelenk beschränkt ist; 2, mäßige Arthritis, Erythem und leichte Schwellung, die sich vom Knöchel bis zu den Fußwurzelgelenken erstreckt; 3, schwere Arthritis, Erythem und mäßige Schwellung, die sich vom Knöchel bis zu den Mittelfußgelenken erstreckt; 4, Die schwerste Arthritis, das Erythem und die schwerste Schwellung betreffen den Knöchel, den Fuß und die Zehen oder die Ankylose der Extremität.

Ergebnisse

Abbildung 1: Repräsentative Ergebnisse des Mausmodells der adjuvant-induzierten Arthritis (AA). (A) Der Durchmesser des Sprunggelenks wurde mit einem Taschendickenmessgerät gemessen. (B) Die Gelenkschwellung wurde anhand des Sprunggelenksdurchmessers (n = 7) beurteilt. (C) Bilder von jedem Arthritis-Score. (D) Der Schweregrad der ...

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
15 mL konisches Zentrifugenröhrchen aus Polypropylen	Falke	14-959-53A
23 G x 1 1/4" Nadel	Bd	Artikel-Nr.: 305120
26 G x 3/8" Nadel	Bd	Artikel-Nr.: 305110
30 g x 1/2" Nadel	Bd	305106
Komplettes Freund's Adjuvans, 10 mg/ml	Sigma	1002036152
Eppendorf Mikroröhrchen, 1,5 mL	Sigma	Z606340
Zifferblatt-Dickenmessgerät	Mitutoyo	7301
Shu Rui U40 sterile Einweg-Insulininjektionsnadel 1 mL	Bd	328421