Kanülierung der Halsschlagader im Rattenmodell

Zusammenfassung

Quelle: Trevaskis, N. L. et al., Das Modell der kanülierten Ratte des mesenterialen Lymphgangs: Anwendung auf die Bewertung des intestinalen lymphatischen Arzneimitteltransports. J. Vis. Exp. (2015)

In diesem Video demonstrieren wir ein chirurgisches Verfahren zur Kanülierung der linken Halsschlagader in einem Rattenmodell.

Protokoll

Alle Verfahren, an denen Tiermodelle beteiligt sind, wurden vom lokalen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss von JoVE überprüft.

>1. Kanülierung der Halsschlagader

Die Kanülierung der Halsschlagader kann vor oder nach der Kanülierung des Lymphgangs mesenterialis durchgeführt werden. Einige Bediener ziehen es vor, die Halsschlagader vor der Kanülierung des Lymphgangs zu kanülieren, um ein mögliches Lösen der Lymphkanüle beim Bewegen des Tieres zu reduzieren.

1. Platzieren Sie eine Markierung auf der Kanüle der Halsschlagader, 2,5 cm von der abgeschrägten Spitze entfernt, um den Teil des Schlauchs zu identifizieren, der in die Arterie eingeführt werden soll. Verbinden Sie das andere Ende der Kanüle (d. h. ohne Abschrägung) mit einer 23- oder 25-G-Nadel, die an einer mit Antikoagulanzienlösung gefüllten Spritze befestigt ist, und füllen Sie die Kanüle mit der Antikoagulanslösung, wobei Sie darauf achten, dass keine Luftspalte vorhanden sind.
2. Um die Kanülierung zu erleichtern, legen Sie die anästhesierte Ratte mit gestrecktem Hals und dem Kopf in Richtung des Bedieners in Rückenlage. Beachten Sie, dass einige Bediener es vorziehen, diese Technik mit dem Schwanz der Ratte in Richtung des Bedieners auszuführen.
3. Platzieren Sie einen 1 - 1,5 cm langen Schnitt durch die Hautschicht oberhalb der linken Seite der Luftröhre in der Sagittalebene.
4. Präparieren Sie das subkutane Bindegewebe mit einer stumpfen Pinzette, um die darunter liegenden paarigen Nackenmuskeln freizulegen.
5. Ziehen Sie die Nackenmuskulatur zurück, um die linke Halsschlagader freizulegen (die sich ~1 cm unter der Hautoberfläche befindet und pulsiert). Reinigen Sie das darüber liegende Bindegewebe von der Arterie durch stumpfe Dissektion.
6. Isolieren Sie einen ~1 cm langen Abschnitt der Arterie vorsichtig mit einer stumpfen Gewebezange und achten Sie darauf, den angrenzenden Vagusnerventrakt nicht zu beschädigen. Führen Sie dies durch, indem Sie die Zange mit stumpfer Spitze vertikal entlang beider Seiten der Arterie öffnen und schließen, um sie vom umgebenden Gewebe und Vagusnerv zu befreien.
7. Fädeln Sie mit einer Pinzette mit feiner Spitze zwei Seidennähte unter die Halsschlagader und platzieren Sie sie an jedem Ende des isolierten Arterienabschnitts. Binden Sie die Naht ab, die dem Bediener am nächsten liegt und am weitesten vom Herzen und Schlüsselbein der Ratte entfernt ist (Abbildung 1A).
8. Blockieren Sie den Blutfluss durch die Arterie, indem Sie ein Paar gerade Pinzetten mit feiner Spitze unter die Arterie legen (Abbildung 1B).
9. Setzen Sie mit der Irisschere mit feiner Spitze einen kleinen Schnitt auf der Oberseite der Arterie (etwa 1/3 des Weges nach unten von der Oberseite des isolierten Bereichs). Spülen Sie verschüttetes Blut auf der Oberfläche der Arterie mit heparinisierter Kochsalzlösung und wischen Sie es vorsichtig mit Wattestäbchen ab.
10. Führen Sie die Spitze der Kanüle mit einer Pinzette mit gebogener Spitze in die Arterie ein. Entfernen Sie nach dem Einführen die gerade Pinzette mit feiner Spitze, die den Blutfluss blockiert, und schieben Sie die Kanüle mit zwei Pinzettenpaaren 2,5 cm in die Arterie vor, eine, um die Kanüle in der Arterie zu halten, um zu verhindern, dass Blut zurückfließt, und die andere, um die Kanüle einzuführen.
11. Halten Sie die Kanüle mit einer kleinen Arterienklemme in der Arterie fest und entfernen Sie die gerade Pinzette mit feiner Spitze, die in Schritt 1.8 unter der Arterie platziert wurde, um den Blutfluss zu verschließen.
12. Bestätigen Sie die Durchgängigkeit der Kanüle, indem Sie eine gerinnungshemmende Lösung in die Kanüle injizieren und eine kleine Menge Blut entnehmen (Abbildung 1C). Spülen Sie dann die Kanüle mit einer gerinnungshemmenden Lösung und verschließen Sie das Ende mit der Flamme eines Feuerzeugs oder einem Kanülenstopfen.
13. Binden Sie die Kanüle mit den beiden Nähten zusammen, die in Schritt 1.8 unter der Arterie platziert wurden.
14. Entfernen Sie die Arterienklemme und befestigen Sie eine dritte Naht um die Arterie und die Kanüle. Verschließen Sie die Halswunde mit Nähten.

Ergebnisse

Abbildung 1. Fotografien von (A) der Halsschlagader, die mit zwei Seidennähten isoliert wurde, von denen diejenige, die dem Bediener am nächsten lag, abgebunden wurde, (B) der isolierten Halsschlagader und dem Verschluss des Blutflusses mit einer geraden Zange mit feiner Spitze, die unter der Arterie platziert wurde, und (C) einer Halsschlagader, ...

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
Sterile Kochsalzlösung	Baxter Gesundheitswesen	AHB 1307	Jede Marke kann verwendet werden. Beispiel hier ist Baxter 100 ml Kochsalzbeutel, Schachtel mit 50 Stück
70 % Ethanol in Wasser	jegliche		Jede Marke kann verwendet werden
Heparin (35000I.E. in 35 mL)	Sigma Pharmazeutika	Artikel-Nr.: 337220	http://sigmaco.com.au/
Kanüle aus Polyethylen (PE) ø 0,96 mm x i.d. 0,58 mm	Mikroröhrchen-Verlängerungen	Artikel-Nr. PE8050	Jede Marke kann verwendet werden. Beispiel ist PE-Schlauch 0,8x0,5 mm, 30 m
Kanüle aus Polyethylen (PE) ø 0,8 mm x i.d. 0,5 mm	Mikroröhrchen-Verlängerungen	Artikel-Nr. PE9658	Jede Marke kann verwendet werden. Beispiel ist PE-Schlauch 0,96x0,58 mm, 30 m
Lineal	jegliche		Jede Marke kann verwendet werden
Markierungen	jegliche		Jede Marke kann verwendet werden
Feuerzeug	jegliche		Jede Marke kann verwendet werden
23 Gauge Nadeln	Livingstone Deutschland	DN23GX0,75 LV	Jede Marke kann verwendet werden. Ein Beispiel hier ist die Livingstone Einwegnadel, steril, 23GX0,75 Zoll, 100 / BOX. http://www.livingstone.com.au/?PG=search_result&CAT= 6&Suche=DN23GX0,75LV
25 Gauge Nadeln	Livingstone Deutschland	DN25GX1,0 LV	Jede Marke kann verwendet werden. Ein Beispiel hierfür ist die Livingstone Einwegnadel, steril, 25GX1,0 Zoll, 100/BOX. http://www.livingstone.com.au/?PG=search_result&CAT=6&search= DN25GX1.0LV
1 ml Spritze	Livingstone Deutschland	T3SS01TA	Jede Marke kann verwendet werden. Ein Beispiel hier ist Terumo Spritze 1 ml Slip Tuberculin 100/Schachtel. http://www.livingstone.com.au/?PG=search_result&CAT=6&search = T3SS01TA
10 ml Spritze	Livingstone Deutschland	T3SS10SA	Jede Marke kann verwendet werden. Ein Beispiel ist hier die Terumo Spritze 10 ml Slip 100/Box. http://www.livingstone.com.au/?PG=search_result&CAT=6&search = T3SS10SA
Mulltupfer	Livingstone Deutschland	GSC075	Jede Marke kann verwendet und auf die gewünschte Größe zugeschnitten werden. Beispiel hier sind Mulltupfer mit Baumwollfüllung 7,5x7,5 cm, 8-lagig. http://www.livingstone.com.au/?PG=search_result&CAT=6&search =GSC075
Wattestäbchen	Livingstone Deutschland	CTAST075DP	Jede Marke kann verwendet werden. Ein Beispiel hierfür ist der Livingstone-Baumwollapplikator aus Kunststoff mit doppelter Spitze. 75MM. 100/STÜCK. http://www.livingstone.com.au/?PG=search_result&CAT=6&search =CTAST075DP
Naht aus Seide	Livingstone Deutschland	DTSK163019F4
Skalpell-Klingen	Feinwissenschaftliche Werkzeuge (FST)	Artikel-Nr.: 10020-00	Jede Marke kann verwendet werden. Ein Beispiel hier ist die FST Skalpellklinge #20. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=191
Skalpell-Griff	Feinwissenschaftliche Werkzeuge (FST)	Nr. 10004-13	Jede Marke kann verwendet werden. Ein Beispiel hier ist der FST Scalpel Handle #4. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=298&CategoryId=51
1 x Kleine chirurgische Schere	Feinwissenschaftliche Werkzeuge (FST)	Artikel-Nr.: 14060-09	Jede Marke kann verwendet werden. Beispiel hier ist FST Feinschere, 9 cm mit 21 mm Schneide, scharf, gerade. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=40&CategoryId=17
2 x Pinzetten mit gezackter, gebogener Spitze	Feinwissenschaftliche Werkzeuge (FST)	Nr. 11001-13	Jede Marke kann verwendet werden. Ein Beispiel ist hier die FST 13 cm Pinzette mit Standardmuster und gebogener 2,8x1,4 mm Spitze. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=405&CategoryId=32
Lieferumfang: 1 x Iridektomie-Schere	Feinwissenschaftliche Werkzeuge (FST)	Nr. 15000-08	Jede Marke kann verwendet werden. Beispiel hier ist FST Vannas Federschere - 2,5 mm Schneide, gerade. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=17&CategoryId=16
1 x Pinzette mit gerader, gesäumter Spitze	Feinwissenschaftliche Werkzeuge (FST)	Nr. 11650-10	Jede Marke kann verwendet werden. Beispiel hier ist FST Graefe 10 cm gerade mit gezackter 1 x 0,99 mm Spitze. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=390&CategoryId=32
1 x Pinzette mit glatter, scharfer, gerader, feiner Spitze	Feinwissenschaftliche Werkzeuge (FST)	Nr. 11251-10	Jede Marke kann verwendet werden. Beispiel hier ist FST Dumont #5 Pinzette gerade 11cm mit 0,08 x 0,04mm Spitze. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=335&CategoryId=29
1 x Pinzette mit glatter, fein gebogener Pinzette	Feinwissenschaftliche Werkzeuge (FST)	Artikel-Nr.: 11063-07	Jede Marke kann verwendet werden. Ein Beispiel ist hier die FST Delicate Pinzette 9 cm mit glatter 0,4 x 0,3 mm Spitze. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=360
1 x Nadelhalter für Nahtmaterial	Feinwissenschaftliche Werkzeuge (FST)	Nr. 12001-13	Jede Marke kann verwendet werden. Ein Beispiel ist hier der FST 13cm Hasley Nadelhalter mit 16 mm Länge x 1,9 mm Breitespitze. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=254&CategoryId=70
Lieferumfang: 1 x Arterienklemme	Feinwissenschaftliche Werkzeuge (FST)	Nr. 18050-28	Jede Marke kann verwendet werden. Beispiel ist hier die FST Bulldog Serrefines gerade, 28 mm lang, 9x1,6 mm Backenmaß mit mittlerer Klemmpresse. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=270&CategoryId=82