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Methodenartikel
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8. Juli 2025
Quelle: Neuhaus, V. et al., Bewertung der zytotoxischen und immunmodulatorischen Wirkungen von Substanzen in menschlichen präzisionsgeschnittenen Lungenschnitten. J. Vis. Exp. (2018)
In diesem Video beschreiben wir ein Verfahren, um isolierte menschliche Lungen mit Agarose aufzublasen und menschliche präzisionsgeschnittene Lungenscheiben vorzubereiten. Die präparierten ex vivo Lungenschnitte können für weitere immunologische Experimente verwendet werden.
Alle Verfahren, die die Probenentnahme beinhalten, wurden in Übereinstimmung mit den IRB-Richtlinien des Instituts durchgeführt.
>1. Allgemeine Vorbereitung von PCLS beim Menschen und anschließende Exposition gegenüber Chemikalien
HINWEIS: Zwei Personen werden benötigt, um eine Lunge zu füllen. Ein aktueller Impfpass für Hepatitis A und B wird empfohlen. Die Patienten werden vor einer Lungentransplantation routinemäßig auf HCV und HIV untersucht. Wird eine aktive Infektion mit Mycobacterium tuberculosis diagnostiziert oder vermutet, sollte die Lunge abgestoßen werden. Denno....
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| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Silikonschlauch 3,0 x 5,0 mm | A. Hartenstein (Leipzig, Deutschland) | SS04 | |
| Spritze | Faust Lab Science (Klettgau, Deutschland) | 9.410 050 | |
| Werkzeuge zum Bohren | maßgearbeitet | maßgearbeitet | |
| Griff der Trimmklinge (FEATHER) | pfm medical ag (Köln, Deutschland) | 205530001 | |
| Trimmklingen (FEATHER) | pfm medical ag (Köln, Deutschland) | Artikel-Nr.: 205500000 | |
| Mikrotom: Tissue Slicer | Alabama F&E (Bad Homburg, Deutschland) | 303400-ADPT | Krumdieck Tissue-Schneidemaschine (MD6000) |
| Mikrotom-Klinge | Wilkinson Sword (Solingen, Deutschland) | ENR-4027800011506 | |
| Gewebekulturschalen | Sigma (München, Deutschland) | Z666246-420EA | |
| Impfschlaufe | Copan Diagnostics (Murrieta, USA) | CD176S01 | |
| TPP Gewebekulturplatten 24wells | Sigma (München, Deutschland) | Z707791-126EA | |
| Kassette | Thermo Scientific (Schwerte, Deutschland) | 1000957 | |
| Nunc MaxiSorp mit flachem Boden | Fisher Scientific GmbH (Hannover, Deutschland) | Tel.: 44-2404-21 | |
| Nunc MicroWell 96-Well | Thermo Scientific (Schwerte, Deutschland) | 260836 | |
| reagenzien | |||
| Agarose, niedrige Geliertemperatur | Sigma (München, Deutschland) | Nr. A9414-100G | |
| Ausgewogene Salzmischungen und -lösungen, Zellkultur, klassische Medien und Salze, Earle's Balanced Salts (EBSS) | Sigma (München, Deutschland) | E2888-500ML | |
| Penicillin und Streptomycin | Lonza (Verviers, Belgien) | 17-602E | |
| Dulbecco's Modifizierter Eagle's Medium Nährstoffmischung F-12 Schinken (DMEM F-12) | Gibco (Darmstadt, Deutschland) | Tel.: 11039-047 | Nährmedium |
| Dulbecco-Phosphat mit Ca und Mg (DPBS) | Lonza (Verviers, Belgien) | BE17-513F |
