Immunodiagnostik

Dieses Video demonstriert ein Verfahren zur Analyse der peritonealen Makrophagen-vermittelten Efferozytose von apoptotischen Mausthymozyten mittels Fluoreszenzmikroskopie.

Dieses Video zeigt eine durchflusszytometrische Gating-Strategie, bei der ein mehrfarbiges Panel zur Analyse der Zellviabilität und spezifischer fluoreszenzkonjugierter anti-humaner Antikörpermarker verwendet wird. Dieser Ansatz ermöglicht es, den Prozentsatz der mit Mycobacterium tuberculosis infizierten Zellpopulationen genau zu bestimmen.

Dieses Video zeigt die Färbung und Vorbereitung von Bakterienzellen für immunologische Studien mit rotem Fluoreszenzfarbstoff. Die gefärbten Bakterien werden verdünnt und in einem Wachstumsmedium resuspendiert, um die gewünschte Bakterienkonzentration für die Wirtszellinfektion zu erreichen, die die Vielzahl der Infektionen darstellt.

Dieses Video zeigt den Nachweis der Wechselwirkung von Vitronektin mit bakteriellen Oberflächenproteinen. Die durchflusszytometrische Analyse misst das Fluoreszenzsignal von fluoreszenzmarkierten Antikörpern, die an Vitronektin gebunden sind, und bestätigt damit deren Vorhandensein an der Bakterienoberfläche. Diese Technik bietet Einblicke in Wirt-Pathogen-Interaktionen und potenzielle bakterielle Infektionstherapien.

Dieses Video zeigt die Bewertung der Stromazytokin-induzierten intrazellulären Phosphorylierung von Proteinen in Leukämiezellen. Diese intrazellulären phosphorylierten Proteine werden mit der Phospho-Durchflusszytometrie-Technik quantifiziert.

In diesem Video demonstrieren wir den Test zur Bewertung der Basophilenaktivierung in Gegenwart eines Testallergens mittels Durchflusszytometrie.

Dieses Video demonstriert eine Technik zur Nukleinsäureextraktion aus menschlichem Vollblut mit magnetischen Glaspartikeln (MGPs) — kleinen magnetischen Kügelchen, die mit Siliziumdioxid beschichtet sind. Nach der Lyse der Blutzellen mit einem Lysepuffer binden die freigesetzten Nukleinsäuren an die Oberfläche der mit Siliziumdioxid beschichteten MGPs und extrahieren die Moleküle aus der Probe.

Dieses Video zeigt die Mastzell-Exozytose, die durch ein aktivierendes Reagenz induziert wird, das ein Calcium-Ionophor enthält und die Freisetzung von sekretorischen Granulaten initiiert, die das fluoreszierende Reporterprotein NPY-mRFP enthalten. Anschließend beurteilen wir die Exozytose quantitativ, indem wir das freigesetzte NPY-mRFP mit einem Fluoreszenzplatten-Reader messen.

Dieses Video demonstriert die Methode zur Analyse des Energiestoffwechsels in aktivierten menschlichen NK-Zellen mit einem extrazellulären Flussanalysator. Verschiedene Inhibitoren der Elektronentransportkettenkomplexe beeinflussen die ATP-Synthese, die über die Sauerstoffverbrauchsrate (OCR) gemessen wird und Einblicke in den Zellstoffwechsel und die Bioenergetik gibt.

Dieses Video zeigt die lytische Aktivität natürlicher Killerzellen gegen fluoreszenzgefärbte Zielzellen. Die Methode ermöglicht die Messung der NK-Zell-induzierten Zytotoxizität durch Färbung toter Zellen und Verwendung eines Durchflusszytometers zur Quantifizierung lebender und toter Zielzellen.

Dieses Video zeigt den Nachweis des Rhesusfaktors (Rh) in Blutproben mit einem Magnetschwebegerät. Das Magnetfeld richtet Kügelchen und Blutzellen basierend auf der Dichte aus und lässt sie schweben. Die Behandlung der Proben mit Anti-Rh-Antikörpern führt zur Bildung von Kügelchen-Zell-Komplexen mittlerer Dichte, die die Unterscheidung von Rh-positiven und Rh-negativen roten Blutkörperchen ermöglichen.

Dieses Video zeigt eine in vitro Technik zur Untersuchung der Immunsynapsenbildung zwischen primären menschlichen T-Zellen und gestützten Lipiddoppelschichten (SLB). T-Zell-Oberflächenproteine interagieren mit den jeweiligen Liganden, die auf SLB immobilisiert sind, um eine Immunsynapse zu bilden, gefolgt von der Bewegung der lytischen Granula in Richtung der Synapse, die mit Hilfe der Fluoreszenzmikroskopie sichtbar gemacht wird.

Dieses Video zeigt eine Methode zur Umwandlung von dendritischen Zellen (DCs) in tolerogene DCs (TolDCs) mit einem immunmodulatorischen pharmakologischen Wirkstoff. Diese Umwandlung wird durch die Bewertung der TolDC-Funktion durch ihre immunsuppressive Wirkung auf CD4+ T-Zellen bestätigt.

Dieses Video zeigt eine Methode zum Entkoffeinieren eines photoaktivierbaren Peptid-Haupthistokompatibilitätskomplexes mittels UV-Bestrahlung. Durch den Deaktivierungsprozess wird die native Peptidsequenz freigelegt, was eine präzise Aktivierung der T-Zellen ermöglicht.

Dieses Video zeigt eine Technik zur Erkennung von extrapulmonaler Tuberkulose. Superparamagnetisches Eisenoxid (SPIO)-Nanosonden, die an Mycobacterium-spezifische Antikörper konjugiert sind, werden in eine Maus injiziert, die zuvor mit Mycobacterium bovis BCG infiziert war, wodurch das Granulom markiert und ein besserer Bildkontrast für seinen Nachweis bereitgestellt wird.

Dieses Video zeigt eine Methode zur Untersuchung der Aufnahme und des retrograden Transports von funktionalisierten Nanobodies, um ihre intrazellulären Transportwege zu verstehen. Durch die Einführung von radioaktiv markiertem Sulfat und den Einsatz von Isolierungs- und Nachweistechniken ermöglicht diese Methode die Untersuchung der endozytären Aufnahme und der Ankunft von Frachtproteinen im trans-Golgi-Netzwerk.

Dieses Video zeigt den Chemotaxis-Assay von Neutrophilen mit einer All-on-Chip-Methode. Die Methode ermöglicht die direkte Isolierung von Neutrophilen aus dem Vollblut durch immunomagnetische Negativselektion, gefolgt von einem Chemotaxis-Assay auf einem mikrofluidischen Chip.

Dieses Video zeigt die Bewertung mehrerer Caspase-Aktivierungen in aus dem Knochenmark stammenden Makrophagen durch Stimulation mit dem Influenzavirus. Nach der Makrophagenlyse, der Hitzeinaktivierung von Lysat und der Zentrifugation werden intrazelluläre Caspasen für die anschließende immunologische Analyse gesammelt.

Dieses Video zeigt einen Bead-basierten Multiplex-Assay zur Analyse von Zytokinen in menschlichen Tränen. Die Methode ermöglicht die gleichzeitige Analyse mehrerer Zytokine aus einer einzigen Probe und bietet eine erhöhte Sensitivität für die Untersuchung von Immunantworten unter verschiedenen pathophysiologischen Bedingungen.

Dieses Video zeigt eine Methode zur Bewertung der Alloreaktivität in gemischten T-Zellpopulationen durch Beobachtung von Wechselwirkungen mit Alloantigen-tragenden dendritischen Zellen, die zur Bildung immunologischer Synapsen führen. Die differentielle Färbung und Quantifizierung von synapsenhaltigen Dubletten mittels Durchflusszytometrie zeigt eine T-Zell-Alloreaktivität.

Dieses Video zeigt die Verwendung der Durchflusszytometrie zur Identifizierung und Zählung verschiedener Immunzellen in bronchoalveolärer Lavage-Flüssigkeit. Zunächst werden einzelne Immunzellen mit einem Viabilitätsfarbstoff identifiziert, gefolgt von einer differentiellen Färbung von Oberflächenmarkerproteinen, die eine genaue Zählung der einzelnen Zelltypen ermöglicht.

Dieses Video demonstriert eine Methode zur Charakterisierung von CD8+-Gedächtnis-T-Zellen, die spezifisch für das Affenimmundefizienzvirus (SIV) sind, unter Verwendung von Peptid-Haupthistokompatibilitätskomplex Klasse I (pMHC-I) Tetrameren. Ein pMHC-I-Tetramer ist ein Komplex aus vier MHC-I-Molekülen, die an SIV-spezifische Peptide gebunden und an ein Fluorophor konjugiert sind. Diese Tetramere binden selektiv an T-Zell-Rezeptoren (TCRs) auf SIV-spezifischen CD8+ T-Zellen, was die...

Dieses Video zeigt einen auf Laminarströmung basierenden Assay zur Charakterisierung der Interaktion von Leukozyten und zellulären Partnern wie Endothelzellen. Diese Methode liefert dynamische Einblicke in die Adhäsion, Deadhäsion und Transmigration von Leukozyten, wenn sie über eine intakte und konfluente Schicht von Gefäßzellen perfundiert werden.

Das Video zeigt einen Assay zur Beurteilung der autophagischen Sequestrierungsaktivität in Säugetierzellen. Es nutzt die Elektroporation, um zytosolische Proteine, einschließlich der Laktatdehydrogenase (LDH), freizusetzen. Die sequestrierten LDH- und die gesamtzellulären LDH-Fraktionen werden bestimmt, um die LDH-Sequestrierung zu beurteilen und geben Einblicke in die Gesamtaktivität der Massensequestrierung.

Dieses Video zeigt einen Reporterzell-basierten Assay zum Screening potenzieller bioaktiver Nanopartikel, die die Signalübertragung des Toll-like-Rezeptors (TLR) hemmen. Der Assay beinhaltet die Einführung von Lipopolysacchariden (LPS), gemischt mit Peptid-Gold-Nanopartikel-Hybriden, in Reportermakrophagen, die die Reporterproteine exprimieren – sezernierte embryonale alkalische Phosphatase (SEAP) und Luciferase. Die Reduktion des LPS-induzierten TLR-Signals, das durch die Hybride vermittelt...

Dieses Video zeigt die Methode zur Bewertung der Auswirkungen von Scherspannungen auf Blutplättchen. Die Antikörperbehandlung induziert Dissoziation und Konformationsänderungen in Mechanorezeptorkomplexen, aktiviert die Blutplättchen und exprimiert Marker auf der Oberfläche. Diese Marker werden mittels Immunfärbung und Durchflusszytometrie beobachtet.

Dieses Video zeigt die Messung des transepithelialen elektrischen Widerstands in bestrahlten Caco-2-Zellen, sowohl in Gegenwart als auch in Abwesenheit von PBMC-Zellen. Diese Methode ermöglicht es, die synergistischen Effekte von Strahlungs- und Immunzellen auf die Epithelzellbarriere zu untersuchen.

Dieses Video zeigt einen Assay zur Untersuchung der Effizienz der Wiederversiegelung der Plasmamembran in Säugetierzellen. Die Zellen werden einem bakteriellen porenbildenden Toxin ausgesetzt, das Poren in der Zellmembran bildet. In Gegenwart von extrazellulären Kalziumionen verursacht die Pore einen Kalziumeinstrom, der membranwiederverschließende Ereignisse induziert. Die Wiederverschließungseffizienz wird mit Hilfe des DNA-bindenden Propidiumiodid-Farbstoffs bewertet, der nur ohne...

Dieses Video zeigt die immunhistochemische Färbung für den Nachweis von Tollwutvirus-Antigenen in infiziertem Hirngewebe von Mäusen. Der Prozess umfasst die Entparaffinisierung und Alkoholbehandlung, gefolgt von einer proteolytischen Behandlung, um die Antigenzugänglichkeit zu verbessern. Die immunhistochemische Färbung zeigt rote Ausfällungen, die das Vorhandensein von Tollwutantigenen im Gewebeschnitt bestätigen.

Dieses Video demonstriert eine Technik zur Quantifizierung des relativen Verhältnisses von Makrophagen unter den gesamten infiltrierten Immunzellpopulationen in der Biopsie der Schläfenarterien. Bei der immunhistochemischen Färbung eines von einer Autoimmunerkrankung betroffenen Gewebeabschnitts werden die Immunzellen selektiv mit spezifischen Rezeptoren angefärbt, um sie visuell vom Rest der Zellen zu unterscheiden.

Dieses Video zeigt die eCLIP-Methode (Enhanced Crosslinking Immunoprecipitation) zur Identifizierung von RNA-bindenden Proteinen in Maushoden. eCLIP ermöglicht die präzise Identifizierung von Bindungsstellen, an denen RNA-bindende Proteine (RBPs) mit ihren Ziel-RNAs interagieren.

Dieses Video zeigt einen Assay zur Analyse von antigenspezifischen CD8+ T-Zellen in verschiedenen Zellzyklusstadien. Fluoreszenzmarkierte lebensfähige Zellen werden mittels Durchflusszytometrie selektiert, und die Zellen in den verschiedenen Zellzyklusstadien werden anhand ihres DNA-Gehalts mit Antikörpern gegen zellproliferationsassoziiertes Kernprotein und einer Nukleinsäurefärbung identifiziert.

Dieses Video zeigt die Durchflusszytometrie zur Messung der Mikrogliaaufnahme von fluoreszierenden Biopartikeln nach intravitrealer Verabreichung in einem Mausauge. Die Durchflusszytometrie weist lebende Zellen nach, die CD11b exprimieren, und unterscheidet phagozytäre Mikrogliazellen mit grüner Fluoreszenz von anderen myeloischen Zellen, einschließlich Ly6C-exprimierender Monozyten und Ly6G-exprimierender Neutrophilen.

Dieses Video demonstriert eine auf Durchflusszytometrie basierende Technik, bei der zwei Fluorochrome verwendet werden, um CD4+ und CD8+ T-Zellen, γδ T-Zellen, B-Zellen, natürliche Killerzellen (NK) und Monozyten in menschlichen mononukleären Zellen des peripheren Blutes (PBMCs) zu identifizieren. Nach der Inkubation der Zellen mit Fluorochrom-konjugierten Antikörpern gegen die Oberflächenmarker werden die Zelluntergruppen mit einer optimalen durchflusszytometrischen Gating-Strategie...

Dieses Video zeigt die Bildgebung lebender Zellen zur Analyse der antimykotischen Aktivität in menschlichen Neutrophilen unter Verwendung von fluoreszierenden Aspergillus-Reporterkonidien. Zunächst werden sowohl rote als auch magentafarbene Fluoreszenz in Neutrophilen nachgewiesen, während die rote Fluoreszenz mit der Zeit abnimmt, was auf den Abbau von Konidien hinweist und die antimykotische Aktivität von Neutrophilen bestätigt.

Dieses Video zeigt einen Assay zur Quantifizierung von zytosolischem und vakuolärem Salmonella typhimurium in aus dem Knochenmark stammenden Makrophagen mittels differentieller Permeabilisierung. Die Makrophagen sind mit einer fluoreszierenden Protein-exprimierenden Salmonelle infiziert, die in einer spezialisierten Vakuolenstruktur namens Salmonellen-haltige Vakuole oder SCV internalisiert ist. Eine Untergruppe von Bakterien entkommt dem SCV und dringt in das Zytosol ein. Die cholesterinreiche...

Dieses Video zeigt einen zellulären Assay mit Glioblastomzellen, die CXCR4-Chemokinrezeptoren exprimieren. Der Assay verwendet einen Kalzium-sensitiven Farbstoff, um Fluoreszenzänderungen bei Wirkstoffinteraktion zu messen, und bietet Einblicke in die zelluläre Signaldynamik.

Dieses Video zeigt einen Assay, der die Rolle von neutrophilenähnlichen Zellen beim Schutz von Lymphomzellen vor der Zytotoxizität von Chemotherapeutika untersucht. Eine 3D-Co-Kultur, bestehend aus Lymphom- und neutrophilenähnlichen Zellen, wird etabliert und mit Vincristin – einem Chemotherapeutikum – belichtet. Der direkte Kontakt mit den neutrophilenähnlichen Zellen induziert eine Hochregulierung der anti-apoptotischen Proteine in den Lymphomzellen und fördert dadurch deren Überleben in...

Das Video zeigt eine immunologische Methode zur Überwachung der in vivo adjuvansinduzierten zytotoxischen T-Lymphozyten- oder CTL-Produktion. Einer Maus werden gentechnisch veränderte, proliferative Farbstoff-gefärbte CD8+ T-Spender-Lymphozyten vorinjiziert. Die subkutane Injektion von Ovalbumin mit Adjuvantien erzeugt zytotoxische CD8+ T-Lymphozyten, die nach der Entnahme durch Immunfärbung und Durchflusszytometrie identifiziert werden.

Das Video zeigt einen auf Durchflusszytometrie basierenden Assay zur Bestimmung der Immundominanz in zytotoxischen T-Lymphozyten oder CTL-Antworten. Injizierte fluoreszierende Zielzellen weisen eine unterschiedliche Fluoreszenz auf, die immunogenen Epitopen entspricht. Die Sammlung und Sortierung nach der Milz zeigt eine Verringerung der hochintensiven Fluoreszenzzellen, was die Immundominanz bei CTL-Antworten bestätigt.

Das Video zeigt die elektrophysiologische Analyse von embryonalen Stammzellen-abgeleiteten Neuronen nach Exposition gegenüber Neurotoxinen. Die Behandlung dieser Neuronen mit Botulinum-Neurotoxinen reduziert die Häufigkeit spontaner erregender Miniaturströme nach synaptischer Ströme, was die Hemmung der synaptischen Übertragung bestätigt.

Das Video zeigt, wie sich die photodynamische Behandlung auf die phagozytische Effizienz von Mausmakrophagen mit Primaquin auswirkt. Behandelte, infizierte Makrophagen erzeugen reaktive Sauerstoffspezies, was zu einem selektiven Pilzsterben führt, was sich in reduzierten Kolonien auf der Platte zeigt.

Das Video demonstriert eine Technik zur Bewertung des Einflusses der photodynamischen Behandlung (PDT) mit einem Photosensibilisator auf die Stoffwechselaktivität von murinen Makrophagen. Die Zellen werden mit dem Photosensibilisator behandelt, gefolgt von einer Exposition gegenüber UV-Licht, wodurch die PDT eingeleitet wird. Dieser Prozess veranlasst den Photosensibilisator, reaktive Sauerstoffspezies (ROS) in den Zellen zu erzeugen, was zu zellulärer Toxizität führt. Die Wirkung von ROS wird...

Dieses Video zeigt eine Methode zur Bewertung der Wirkung von Aspirin und Ibuprofen in ihren minimalen inhibitorischen Konzentrationen auf die Makrophagen-Phagozytose unter Verwendung von pH-empfindlichen Fluoreszenzfarbstoff-gefärbten Pilzzellen. Die Medikamente hemmen die Cyclooxygenase-2, verringern die Prostaglandinbildung und verstärken die Makrophagen-Phagozytose, wie durch Fluoreszenzmessungen von pH-empfindlichem Farbstoff beobachtet wurde.

Dieses Video zeigt die Proteinisolierung aus Neutrophilen, die weiterverarbeitet und in kleinere Peptide verdaut wird. Diese Peptide können für zukünftige Analysen verwendet werden.

Dieses Video demonstriert die Peptidaufreinigung durch das STAGE Tip-Verfahren. Eine Miniatursäule mit Harzkügelchen, die an lange Kohlenwasserstoffketten gebunden sind, erleichtert die Reinigung auf Basis hydrophober Wechselwirkungen. Beim Laden einer vorverdauten Peptidprobe in die Säule binden sich die Peptidfragmente an die Harzkügelchen, wodurch Verunreinigungen passieren können. Ein Elutionspuffer, der die hydrophobe Wechselwirkung stört, wird zur Eluierung der Peptidfragmente angewendet.

Dieses Video zeigt einen Assay zur Messung der Zytotoxizität von natürlichen Killerzellen gegen Krebszellen mit dem Calcein AM Farbstoff. Die reduzierte Anzahl fluoreszierender Krebszellen nach Co-Kultur mit natürlichen Killerzellen deutet auf eine natürliche Killerzell-vermittelte Zytotoxizität gegenüber Krebszellen hin.

Dieses Video demonstriert die In-vitro-Stimulation von Makrophagen-Extrazellulären Fallen (METs) in humanen Monozyten-abgeleiteten Makrophagen unter Verwendung verschiedener Entzündungsreize wie TNF-alpha, PMA und HOCL. Das Video zeigt auch die Methode der SYTOX-Farbstofffärbung von METs zur Visualisierung.

Dieses Video zeigt die Reporterenzym-Fluoreszenz (REF) Bildgebung für den in vivo Nachweis von Mycobacterium tuberculosis-Infektionen. Den infizierten Mäusen wird intraperitoneal ein Substrat für die REF-Bildgebung injiziert. Nach der Hydrolyse durch ein bakterielles β-Lactamase-Enzym emittiert das Substrat Fluoreszenz, deren Nachweis die Bewertung der Infektion erleichtert.

Dieses Video untersucht die Virulenz von Leishmanien, indem Makrophagen mit metazyklischen Promastigoten behandelt werden, was zur Bildung von intrazellulären Amastigoten führt. Die Bestätigung der Virulenz von Leishmania wird durch Nukleinsäure-Fluoreszenzfarbstofffärbung erreicht. Diese Erkenntnisse können zur Entwicklung neuer Therapien für Leishmaniose beitragen.

Dieses Video zeigt eine Methode zur Beurteilung des intrazellulären Wachstums von GFP-markierten Coxiella-Mutanten in kultivierten Epithelzellen. Der mutierte Phänotyp wird mittels Immunfärbung und Epifluoreszenzmikroskopie sichtbar gemacht, was die Untersuchung der Wirkung der Mutation auf das intrazelluläre Wachstum ermöglicht.

In diesem Video demonstrieren wir ein Verfahren zur Visualisierung von internalisiertem Porphyromonas gingivalis, einem anaeroben pathogenen Bakterium, in menschlichen Endothelzellen mittels konfokaler Mikroskopie. Die Bakterien werden mit einem Fluoreszenzfarbstoff gefärbt, während das Aktin-Zytoskelett der Wirtsendothelzelle mit einem anderen Fluoreszenzfarbstoff markiert wird. Die internalisierten Porphyromonas gingivalis in den Endothelzellen werden mit Hilfe der Konfokalmikroskopie...

Dieses Video demonstriert eine Technik zur Untersuchung der in vivo Lokalisierung von tumorspezifischen Antikörpern in einem Maus-Tumor-Xenotransplantat-Modell. Nach der subkutanen Injektion von Krebszellen in Mäuse zur Tumorbildung werden fluoreszenzmarkierte Antikörper injiziert, die an tumorspezifische Rezeptoren binden und so eine In-vivo-Beurteilung der Antikörperlokalisierung durch Bildgebung ermöglichen.

Dieses Video demonstriert eine in vivo Bildgebungstechnik zum Nachweis und zur Quantifizierung von Augenentzündungen in einem Mausmodell der postinfektiösen Uveitis. Die Technik, die als optische Kohärenztomographie (OCT) bekannt ist, erzeugt hochauflösende Schnittbilder des Auges zur Beurteilung des Krankheitsverlaufs.

Dieses Video zeigt die Visualisierung von Bakterien in deparaffinisiertem Blasengewebe von einem mit Harnwegen infizierten Patienten. Eine fluoreszenzmarkierte Sonde, die mit bakteriellen ribosomalen 16s-RNAs hybridisiert wurde, zeigt die gewebeassoziierten Bakterien und ihre Verteilung und liefert wertvolle räumliche Einblicke in ihre Dichte innerhalb der Probe.

Dieses Video zeigt die Verfolgung der Leukozytenrekrutierung mit transgenen Zebrafischlarven, die photokonvertierbares grün fluoreszierendes Protein exprimieren. Die Vorinjektion von rot fluoreszierenden Farbstoff-markierten Bakterien in das otische Vesikel und die Induktion der Photokonversion ermöglicht die Beobachtung der Migration, Phagozytose und Ausbreitung von Leukozyten im Körper und liefert wertvolle Einblicke in die Dynamik der Immunantwort.

Dieses Video demonstriert die markierungsfreie Identifizierung der Lymphozytenmorphologie und -biochemie durch quantitative 3D-Phasenbildgebung. Diese Technik ermöglicht eine gründliche Analyse von Lymphozyten und deckt ihre inneren Strukturen und Eigenschaften auf, ohne dass Markierungsverfahren erforderlich sind.

Dieses Video demonstriert eine Technik zur Visualisierung der Bildung der immunologischen Synapse in natürlichen Killerzellen (NK) auf einer gestützten Lipiddoppelschicht (SLB). Der SLB wird zunächst mit einem Fluorophor-markierten NK-Zell-aktivierenden Rezeptorliganden markiert, gefolgt von der Inkubation mit NK-Zellen. Anschließend werden die Zellen mit polymerisiertem Aktin und Perforin-positiven lytischen Granulaten angefärbt. Dieser Ansatz ermöglicht die Visualisierung der Synapsenbildung...

Dieses Video zeigt eine Technik zur Visualisierung von Exozytose in Mastzellen. Die Zellen werden mit FITC-Dextran – einem fluoreszierenden Reporter – inkubiert, das von Zellen in sekretorischen Granulaten (SGs) aufgenommen wird, wo der saure pH-Wert seine Fluoreszenz löscht. Bei Stimulation der Granula-Exozytose induziert der höhere pH-Wert des Mediums eine Reporterfluoreszenz innerhalb der fusionierten SGs, die mit einem Fluoreszenzmikroskop sichtbar gemacht wird.

Das Video demonstriert eine Technik zum Verletzen und Einfangen von Zebrafischen zur Beobachtung von fluoreszenzmarkierten Pilzerregerinfektionen in Zebrafischlarven. Die Erstinfektion zieht Makrophagen an, und wenn die Infektion anhält, schreitet die Rekrutierung von Neutrophilen an der Injektionsstelle fort.

Das Video demonstriert die Verwendung von Photokonversion zur Untersuchung der Entzündungszelldynamik in Drosophila-Puppen. Grüne Hämozyten werden vom verwundeten Epithel angezogen, gefolgt von einer Fernwanderung. Die Photokonversion verschiebt bestimmte Hämozyten von grün nach rot, was ihre Bewegungsverfolgung erleichtert.

Dieses Video zeigt die Bildgebung von lebenden Zellen der immunologischen Synapsentopologie und untersucht die Wechselwirkungen zwischen T-Lymphozyten und Epithelzellen, die fluoreszierende Antigene tragen. Die Fluoreszenzmikroskopie zeigt eine rote Zytoplasma-Verschiebung und gelbe Membranringe in Endothelzellen, was auf die Bildung immunologischer Synapsen hinweist.

Dieses Video demonstriert eine in vivo Immunfluoreszenz-Lokalisierungstechnik (IVIL), um die Bioverteilung von tumorgerichteten Antikörpern in einem Mausmodell von Brustkrebs zu untersuchen. Nach der intravenösen Injektion eines tumorspezifischen Antikörpers in die Maus wird der Tumor chirurgisch isoliert und die Lokalisation des Antikörpers im Tumorgewebe durch ex vivo Immunfärbung bestätigt.

Dieses Video demonstriert eine Methode zur Verfolgung von Virusinfektionen in Mausmodellen mit einem rekombinanten Luciferase- und Fluoreszenzprotein-exprimierenden bi-Reporter-Influenza-A-Virus. Diese Methode ermöglicht sowohl in vivo- als auch ex vivo-Studien, die es den Forschern ermöglichen, Einblicke in die virale Dynamik und die Auswirkungen von Interventionen zu gewinnen.

Dieses Video demonstriert die Anwendung der Hybridisierungskettenreaktion (HCR)-Fluoreszenz-In-situ-Hybridisierung (FISH) zur Visualisierung der räumlichen Verteilung von subgenomischer SARS-CoV-2-RNA. Die Kombination von HCR mit Immunfluoreszenztechniken hat das Potenzial, Einblicke in Wirt-Virus-Interaktionen auf Einzelzellebene zu geben.

Dieses Video demonstriert die lokalisierte Oberflächenplasmonen-Resonanztomographie, um Proteinsekrete von einer einzelnen Zelle zu detektieren. Unter Verwendung eines mikrofluidischen Aufbaus und eines peptidgebundenen plasmonischen Nanostruktur-Chips zeigen Änderungen der reflektierten Lichtintensität am Resonanzwinkel Wechselwirkungen mit sezernierten Proteinen aus einer einzelnen Zelle.

Dieses Video zeigt den bildgebenden Mikroneutralisationsassay zur Analyse der antigenen Beziehungen zwischen Influenza-A- und -B-Viren. Es bietet eine quantitative und visuelle Möglichkeit, die Wirksamkeit von Antikörpern oder anderen Behandlungen bei der Vorbeugung von Virusinfektionen zu beurteilen.

Dieses Video zeigt einen in vivo Assay zur Messung der bakteriellen Phagozytose bei adulten Drosophila-Fliegen. Nach der Injektion von fluoreszenzmarkierten Bakterien in den Bauch erwachsener Fliegen führen Hämozyten, die mit dem dorsalen Gefäß assoziiert sind, eine Phagozytose durch. Die Einführung des Farbstoffs Trypanblau dient dazu, die Fluoreszenz zu löschen, die von extrazellulären, nicht phagozytierten Bakterien emittiert wird. Dieser Quenching-Prozess verbessert die Identifizierung von...

Das Video demonstriert eine Methode zur Bewertung von Rezeptorkräften, die von Immunzellen mit Polyethylenglykol-verankerten Goldnanopartikeln und DNA-Haarnadel-Zugsonden angewendet werden. CD8-positive T-Zell-Wechselwirkungen lösen die Entfaltung der Sonde aus und emittieren Fluoreszenz, während Verriegelungsstränge das Signal zur Quantifizierung der von Immunzellen ausgeübten Kräfte aufrechterhalten.

Dieses Video demonstriert eine kolorimetrische E. coli-Nachweismethode, bei der ein E. coli-Biomarker ein DNAzym aktiviert, was zur Spaltung der RNA-Bindung und zur Ablösung eines DNAzym-Urease-Konjugats führt. Ein anschließender kolorimetrischer Assay weist den E. coli-Biomarker durch ammoniakinduzierte pH-Änderungen nach.

Dieses Video zeigt einen Assay zur Untersuchung der Translationsregulation in Pockenvirus-infizierten Zellen. Nicht infizierte und virusinfizierte Zellen wurden mit mRNAs co-transfiziert, die für Glühwürmchen-Luziferase (Fluc) und Renilla-Luziferase (Rluc) ko-transfizieren, wobei die Fluc-mRNA eine 5'-Poly(A)-Leader-Sequenz enthielt. Nach dem Hinzufügen von biolumineszierenden Substraten zu lysierten Zellen messen Sie das Signal von beiden Luciferasen, um den translationalen Vorteil der Fluc...

Dieses Video zeigt quantitative Zeitraffermikroskopie zur Bewertung der extrazellulären Matrixsteifigkeitsabhängigkeit von Listeria monocytogenes Verbreitung durch Endothelzellen. Ein weicheres Hydrogel ermöglicht eine schnellere bakterielle Ausbreitung durch Endothelzellen im Vergleich zu steiferen Gegenstücken, was den Einfluss der Matrixsteifigkeit auf die bakterielle Verbreitung unterstreicht.

Dieses Video zeigt eine hochauflösende Totalreflexionsfluoreszenz-Mikroskopietechnik (TIRF) zur Echtzeit-Visualisierung der Phagosomenbildung und des Verschlusses während der Makrophagen-vermittelten Phagozytose von IgG-opsonisierten roten Blutkörperchen (RBCs), die an der Oberfläche einer Glasbodenschale befestigt sind. Die Makrophagen dehnen Pseudopodien um die Erythrozyten aus und umhüllen sie in den Phagosomen, wodurch sie sich von der Glasoberfläche lösen.

Dieses Video beschreibt die Bildgebung von residenten tumorinfiltrierenden CD8-T-Zellen, die mit fluoreszenzgekoppelten Antikörpern in menschlichen Lungentumorschnitten markiert wurden. Diese Technik ermöglicht Echtzeitanalysen der Migration von CD8-T-Zellen mittels konfokaler Mikroskopie.

Dieses Video zeigt einen Immunfluoreszenz-Assay, der zur Messung der Neutralisation des humanen Cytomegalievirus (HCMV) entwickelt wurde. Virusspezifische Antikörper werden mit dem Virus gemischt und mit menschlichen Fibroblastenzellen inkubiert. Die Antikörper neutralisieren das Virus, so dass es die Wirtszellen nicht infizieren kann, während nicht neutralisierte Viren die Zellen infizieren. Nach der Inkubation wird das Ausmaß der Neutralisation durch Quantifizierung der virusinfizierten...

Dieses Video demonstriert die Quantifizierung des Natriumgehalts in menschlichen Geweben mittels Natrium-Magnetresonanztomographie (23Na-MRT). Der Unterschenkel des Patienten wird in die Hochfrequenzspule (RF) des Geräts gelegt und eine dreidimensionale Gradienten-Echo-Sequenz durchgeführt. Multinukleäre MRT-Bilder werden mit Wasserstoff- und Natriumkernen erstellt, um den Natriumgehalt in verschiedenen Geweben zu quantifizieren.

Dieses Video demonstriert eine Methode zur Etablierung eines Magenorganoid-Infektionsmodells durch Mikroinjektion des Magenpathogens Helicobacter pylori in das Lumen der Organoide. Dieses Modell hilft bei der Untersuchung infektionsinduzierter Veränderungen in Magenzellen.

Dieses Video zeigt die Entwicklung eines in vivo Mausmodells zur Untersuchung der Biofilmbildung von Candida albicans im Unterhautgewebe. Bei dem Experiment werden Candida-infizierte Geräte in die Rückenregion des Tieres implantiert, um einen Biofilm zu bilden.

Dieses Video zeigt die Entwicklung der nekrotisierenden Enterokolitis-Krankheit in einem humanen neonatalen enteroiden Modell, das durch die Behandlung mit Lipopolysacchariden induziert wurde. Dieses Modell hilft bei der Untersuchung der Pathophysiologie des Darms.

In diesem Video demonstrieren wir ein Verfahren zum Schwanzschneiden in einem Mausmodell, um peripheres Blut zu sammeln. Das gesammelte Blut wird anschließend einer Zentrifugation unterzogen, um Plasma zu trennen, das für weitere Experimente verwendet werden kann.

Dieses Video demonstriert eine Methode zur Induktion von Apoptose in den Jurkat-Zellen — einer humanen T-Lymphozyten-Leukämie-Zelllinie. Die Zellen werden ultravioletter C (UVC)-Strahlung ausgesetzt, die umfangreiche DNA-Schäden verursacht und zum apoptotischen Zelltod führt.

In diesem Video beschreiben wir ein Verfahren, um isolierte menschliche Lungen mit Agarose aufzublasen und menschliche präzisionsgeschnittene Lungenscheiben vorzubereiten. Die präparierten ex vivo Lungenschnitte können für weitere immunologische Experimente verwendet werden.

Dieses Video veranschaulicht eine Technik zur Bewertung der Zytotoxizität in menschlichen präzisionsgeschnittenen Lungenschnitten durch den WST-1-Assay. Menschliche, präzisionsgeschnittene Lungenscheiben werden inkrementellen Konzentrationen einer zytotoxischen Chemikalie ausgesetzt, um ihre Zytotoxizität zu quantifizieren. Eine Abnahme der Farbintensität dient als Bestätigung für die schädliche Wirkung der Chemikalie auf die Lungenzellen.

Dieses Video zeigt die Isolierung und Konzentration von Bakterienkulturfiltratproteinen, zu denen auch bakterielle extrazelluläre Vesikel gehören, mittels Ultrafiltration. Die konzentrierten extrazellulären Vesikel dienen als diagnostische Marker für die Krankheitserkennung.

Dieses Video zeigt die Größenausschlusschromatographie (SEC) Technik zur Reinigung bakterieller extrazellulärer Vesikel (EVs) aus dem Kulturfiltrat von Mycobacterium tuberculosis (Mtb). Bei der Technik wird eine poröse, mit Harz gefüllte Säule verwendet, um gereinigte Fraktionen von EVs zu erhalten. Die porösen Partikel lassen selektiv kleinere Proteine in die Poren eindringen, was zu einer langsameren Elution führt. Gleichzeitig werden EVs aufgrund ihrer größeren Größe vom Eindringen in die...

Dieses Video zeigt den Assay zur Hemmung des Sämlingswachstums in der Pflanze Arabidopsis thaliana. Der Einfluss einer erhöhten Konzentration des Immunpeptid-Elicitors auf das Wachstum der Sämlinge wird bestimmt.

Dieses Video zeigt einen Assay zur Bewertung der Wirksamkeit von Medikamenten gegen Mycobacterium tuberculosis (Mtb)-Infektionen. Es wird ein in vitro Infektionsmodell mit Mtb/Makrophagen-Aggregaten erstellt, das eine in vivo Infektion nachahmt. Bei der Einführung geeigneter Antibiotika wird deren Wirksamkeit mittels Resuzarin-Assay getestet, um das Überleben von Bakterien mit steigenden Wirkstoffkonzentrationen zu überwachen.

Das Video zeigt ein Verfahren zur Quantifizierung des Zika-Virus in mehreren Mausorganen mittels eines fokusbildenden Assays. Dabei werden Monoschichten von Säugetierzellen mit virusinfizierten Gewebehomogenaten infiziert, gefolgt von der Verwendung von Methylcellulose, um die Ausbreitung des Virus zu verhindern. Anschließend wird die Immunfärbung eingesetzt, um eine präzise Quantifizierung und Messung der organspezifischen Infektiosität zu ermöglichen.

Dieses Video zeigt den Nachweis von Bakteriocin produzierenden Milchsäurebakterien, die aus Fäkalien von Mäusen gewonnen werden. Der Assay bestimmt die antimikrobielle Aktivität von Bacteriocin auf bestimmte Bakterienstämme.

Dieses Video zeigt den auf Riboflavin und UV-Licht basierenden Prozess zur Reduzierung von Krankheitserregern gegen bakterielle Kontamination mit hohen Titern in menschlichen Thrombozytenprodukten. Dieses Verfahren könnte dazu beitragen, das Risiko schwerer unerwünschter Transfusionsereignisse im Zusammenhang mit bakterieller Kontamination zu senken.

Dieses Video zeigt die In-vitro-Messung der Enzymaktivität für α-Galactosidase A und saure α-Glucosidase in Proben, die synthetische 4-Methylumbelliferyl-Substrate verwenden.

Dieses Video zeigt einen In-vitro-Assay zum Screening von Antimykotika mit einem Bouillon-Mikrodilutions-Assay. Die Testverbindungen werden seriell in einer Mikrotiterplatte verdünnt und mit einem Pilzinokulum inkubiert. Nach der Inkubation wird die Platte auf Vertiefungen ohne sichtbares Pilzwachstum untersucht, um das antimykotische Potenzial der Testverbindungen und ihre minimale inhibitorische Konzentration (MIC) zu beurteilen.

Dieses Video zeigt einen in vitro Assay zur Untersuchung des immunmodulatorischen Einflusses von mesenchymalen Stammzellen (MSCs) auf die Proliferation von Effektor-T-Zellen. Der Assay umfasst die Co-Kultivierung von MSCs mit PBMCs, um die Monozytenpopulation dazu zu bringen, einen immunmodulatorischen Phänotyp zu erwerben, der zur Sekretion von Interleukin-10 (IL-10) führt. Nach der Inkubation mit aktivierten CD4+ T-Zellen unterdrücken die induzierten Monozyten effektiv die T-Zellproliferation.

Das Video zeigt eine Methode zur Untersuchung des Einflusses von Stromazellen auf die Rekrutierung von Leukozyten. In einem Modell mit paralleler Plattenströmungskammer induzieren proinflammatorische Zytokine die Expression von Adhäsionsrezeptoren durch Endothelzellen, was die Rekrutierung und Migration von Neutrophilen erleichtert. Die Wechselwirkung zwischen Stromazellen und Endothelzellen verringert die Rekrutierung von Neutrophilen zu den Endothelzellen.

Dieses Video beschreibt eine Methode zur Züchtung und qualitativen Analyse von bakteriellen Biofilmen auf Pilzhyphen mittels Mikroskopie. Bakterielle Biofilme bilden sich häufig auf Pilzoberflächen und sind an zahlreichen bakteriell-pilzlichen Interaktionsprozessen beteiligt, wie z. B. metabolischer Kooperation, Konkurrenz oder Prädation.

Dieses Video zeigt einen Assay zur Überwachung unabhängiger Makrophagen-vermittelter Phagozytose-Ereignisse der roten Blutkörperchen (RBC). Immunglobulin G (IgG)-opsonisierte humane Erythrozyten der Maus werden mit Mausmakrophagen inkubiert und unter einem konfokalen Mikroskop betrachtet. Die Erythrozyten werden von Makrophagen über eine phagozytäre Becherbildung verschlungen und gezielt für den lysosomalen Abbau eingesetzt.

Dieses Video zeigt eine Methode zur Untersuchung der Migration von natürlichen Killerzellen (NK) durch ein poröses Membraneinsatzsystem als Reaktion auf Chemoattraktivstoffe. Diese Methode ermöglicht die quantitative Analyse der NK-Zellmigration mittels Durchflusszytometrie.

Dieses Video zeigt eine Technik zur Bewertung der komplementvermittelten bakteriziden Aktivität von Antikörpern, die im Serum vorhanden sind. Dieser Ansatz kombiniert isoliertes Serum mit pathogenen Bakterien und exogenen Komplementproteinen. Nach der Inkubation werden die Bakterien auf einer Agarplatte gezüchtet und die produzierten Kolonien quantifiziert, um den bakteriziden Serumtiter zu messen.

Das Video zeigt einen Hämagglutinations-Inhibitions-Assay zum Nachweis von Serum-Antikörpern gegen spezifische Antigene. Die Bestätigung der Hämagglutinationshemmung in der Testvertiefung und der Hämagglutination in der Kontrollvertiefung wird durch unterschiedliche visuelle Muster erreicht. Dieser Assay spielt eine entscheidende Rolle bei der Bewertung der Immunantwort, der Wirksamkeit von Impfstoffen und der Untersuchung von Virusinfektionen in der Virologie und Immunologie.

Dieses Video zeigt einen Assay zur Untersuchung der Zytotoxizität von Proteinen, die von Staphylococcus aureus, einem pathogenen Bakterium, auf isolierten humanen polymorphkernigen Leukozyten (PMNs) produziert werden. Die sezernierten zytotoxischen Proteine bilden Poren auf der PMN-Zellmembran und leiten so den Zelltod ein. Nach der Färbung der toten Zellen mit Propidiumiodid wird eine Durchflusszytometrie durchgeführt, um die toten Zellen zu quantifizieren und die Zytotoxizität der Bakterien...

In diesem Video demonstrieren wir einen Assay zum Nachweis der Zytotoxizität von virulenten und weniger virulenten Staphylococcus aureus-Stämmen gegen humane Neutrophile nach Phagozytose mittels Durchflusszytometrie.

Dieses Video demonstriert eine Technik zur Beurteilung der Fähigkeit von Porphyromonas gingivalis, einem anaeroben pathogenen Bakterium, an menschlichen Nabelvenendothelzellen (HUVECs) zu haften und in diese einzudringen. Nach der Infektion der Wirtszellen mit den Bakterien werden die Wirtszellen lysiert, um sowohl anhaftende als auch internalisierte Bakterien freizusetzen. Wenn das Lysat in einem geeigneten Medium plattiert wird, deutet das Vorhandensein von Kolonien auf erfolgreiche...

Das Video zeigt einen in vitro opsonophagozytären Tötungsassay unter Verwendung einer Co-Kultur von humanen Neutrophilen mit Streptococcus pneumoniae. Antikörper und Komplementproteine erleichtern die Opsonisierung der Bakterien, so dass Neutrophile Bakterien erkennen und abtöten können, was eine erfolgreiche opsonophagozytäre Aktivität von Neutrophilen zeigt.

In diesem Video demonstrieren wir einen Assay zur Beurteilung des Überlebens von Porphyromonas gingivalis in menschlichen Endothelzellen. Das Maß für das Überleben und Wachstum von internalisiertem Porphyromonas gingivalis wird anhand der Anzahl der Kolonien auf der Blutagarplatte bewertet.

Dieses Video demonstriert eine in vitro Technik, um die zytotoxische Fähigkeit von Zytokin-induzierten Killerzellen (CIK) gegen Krebszellen zu messen. Bei der Co-Kultivierung von Zielkrebszellen mit CIK-Zellen werden die toten Krebszellen mit einem fluoreszierenden Viabilitätsfarbstoff identifiziert und mittels Durchflusszytometrie quantifiziert, um die zytotoxische Wirkung von CIK-Zellen abzuschätzen.

In diesem Video demonstrieren wir einen Assay, der Fluoreszenzmikroskopie verwendet, um die Adhäsion von Krebszellen an neutrophile extrazelluläre Fallen (NETs) nachzuweisen. In den Testvertiefungen gibt es einen bemerkenswerten Anstieg der Anzahl fluoreszenzmarkierter Krebszellen, die an NETs haften, während Wells, die mit DNase behandelt wurden, eine verminderte Adhäsion von Krebszellen an NETs aufweisen.

Dieses Video zeigt den Laktatdehydrogenase, LDH-Assay zur Messung der zytotoxischen Wirkung einer Testsubstanz und ihrer Wirkung auf die Membranintegrität in menschlichen präzisionsgeschnittenen Lungenschnitten. Der Assay liefert ein quantitatives Maß für den Zelltod oder die Zellschädigung in der Probe.

Dieses Video zeigt das Screening von immunmodulatorischen Verbindungen mittels fluoreszenzbasiertem Assay. Transgene T-Lymphozyten aus der Maus mit grün fluoreszierenden Proteinexpressionskassetten werden mit diesen Verbindungen behandelt. Die verstärkten und reduzierten GFP-Signale ermöglichen die Identifizierung der stimulierenden bzw. hemmenden Wirkungen der Verbindungen.

Dieses Video zeigt die Beurteilung der B-Zell-Aktivierung durch die Verwendung von antigenen Liposomen. B-Zellen, die mit dem calciumsensitiven Indo-1-Farbstoff behandelt wurden, werden mittels Durchflusszytometrie unterschieden und ihr Fluoreszenzverhältnis von Violett zu Blau analysiert. Wenn die Zellen auf antigene Liposomen treffen, löst es die B-Zell-Aktivierung durch Kalziumeinstrom aus, wodurch das Fluoreszenzsignalverhältnis von Violett zu Blau im Laufe der Zeit schrittweise verbessert...

Dieses Video zeigt eine Methode zur Quantifizierung von Pilzinfektionen bei Zebrafischlarven. Pilzsporen werden in den Ventrikel des Hinterhirns der Larve mikroinjiziert, und die Larven werden inkubiert, um die Entwicklung einer Infektion zu ermöglichen. Infizierte Larven werden in definierten Intervallen geerntet, und der Infektionsfortschritt wird durch die Aufzählung koloniebildender Einheiten bewertet.

Dieses Video zeigt einen Opsono-Adhärenz-Assay zur Untersuchung der Interaktion zwischen opsonisierten Bakterien und Immunzellen. Fluoreszenzmarkierte Bakterien, die mit Testserum behandelt werden, das Anti-Kapsel-Antikörper enthält, werden mit Makrophagen inkubiert. Nach der Färbung der Makrophagen mit Fluoreszenz werden die auf der Makrophagenoberfläche anhaftenden Bakterien zur Visualisierung unter einem Mikroskop betrachtet.

Dieses Video demonstriert eine Bead-basierte Multiplex-Immunoassay-Technik zum gleichzeitigen Nachweis von Antikörpern gegen mehrere Umweltpathogene im menschlichen Speichel. Fluoreszierende Kügelchen wurden an Antigene verschiedener Erreger gekoppelt, die mit Hilfe von Antikörpern in der menschlichen Speichelprobe eingefangen wurden. Nach der Markierung der Antikörper mit einem fluoreszierenden Reporter wurden die Kügelchen mittels Durchflusszytometrie analysiert, um das Vorhandensein...

Dieses Video zeigt eine Methode zur Quantifizierung der Phagozytose von FITC-markierten pathogenen Pilzsporen durch menschliche Leukozyten. Phagozytierte Sporen werden durch Gegenfärbung von zelladhärenten Sporen unterschieden, gefolgt von einer durchflusszytometrischen Analyse.

Dieses Video zeigt einen Assay zur Charakterisierung und Quantifizierung von Stressgranula bei Säugetieren, die aus mRNAs, RNA-bindenden Proteinen (RBPs) und verschiedenen anderen Proteinen bestehen.

Dieses Video zeigt den Assay zur Bestätigung der phagozytischen Aktivität von Zellen im menschlichen Blut mittels Durchflusszytometrie. Die Granulozyten und Monozyten bestätigen ihre phagozytäre Aktivität, indem sie eine grüne und rote Fluoreszenz zeigen, die das Vorhandensein von verschlungenen Bakterien bzw. oxidative Burst-Aktivität bestätigt.

Dieses Video zeigt die Quantifizierung der Immunmediator-Spiegel im Extrakt aus der Nasenschleimhautschleimhaut von Neugeborenen. Ein auf Elektrochemilumineszenz basierendes Multiplex-Assay-System misst diese Mediatoren, indem es die Intensität des emittierten Lichts bewertet, wenn es angeregt wird.

Dieses Video zeigt einen Assay zum Screening der proteolytischen Aktivität von Proteasen mit fluorogenen Peptiden. Die Protease erkennt ihre Spaltstelle auf dem Peptid, spaltet es und trennt den Quencher vom Fluorophor, wodurch seine Fluoreszenzemission ermöglicht wird. Das Fluoreszenzsignal wird detektiert und analysiert, um die Spaltungseffizienz verschiedener Peptidvarianten zu überprüfen.

Dieses Video zeigt einen auf Durchflusszytometrie basierenden Phagozytose-Assay mit markierten und opsonisierten Plasmodium falciparum-infizierten Erythrozyten durch Monozyten. Die Durchflusszytometrie identifiziert die Fluoreszenz in Monozyten und bestätigt damit die erfolgreiche Identifizierung opsonisierter Erythrozyten durch Phagozytose.

Dieses Video zeigt einen in vitro Assay zur Quantifizierung der Serinproteaseaktivität von Neutrophilen in Sputumproben. Die Probe, die sezernierte Protease enthält, wird mit einem fluoreszierenden Reporter inkubiert, der ein Erkennungsmotiv trägt. Die Spaltung des Motivs durch die Protease ermöglicht eine individuelle Fluoreszenzemission durch das Donor- und Akzeptorfluorophor des Reporters, was auf die Proteaseaktivität in der Probe hinweist.

Dieses Video zeigt einen Apoptose-Assay in Krebszellen, der durch voraktivierte Effektor-T-Zellen induziert wurde. Durch die Co-Kultivierung dieser Zellen mit Krebszellen, die mit fluoreszierenden Zellkernen markiert sind, wird ein Caspase-spaltbares fluorogenes Substrat hinzugefügt. Apoptotische Krebszellen zeigen in ihren Zellkernen eine andere Farbe, was zu einer dualen Fluoreszenz führt. Diese duale Fluoreszenz ist ein Hinweis darauf, dass Krebszellen eine Apoptose durchlaufen.

Dieses Video zeigt Mikroneutralisationsassays zur Messung neutralisierender Antikörper mit Hilfe von Madin-Darby Canine Kidney Zellen, die α2,6-verknüpfte Sialinsäure in menschlichen Seren überexprimieren. Dieser Assay wird häufig in der Influenza-Humanserologie...

Dieses Video zeigt einen Assay zur Messung des oxidativen Ausbruchs in Arabidopsis-Blättern nach Immunauslösung. Blattscheiben, die aus Pflanzenblättern geschnitten werden, werden mit bakteriellen Peptiden inkubiert, die als mikrobenassoziierte molekulare Muster oder MAMPs fungieren. Nach dem Nachweis der MAMPs induzieren Pflanzenzellen die Produktion von extrazellulärem ROS, das mit Hilfe eines Chemilumineszenz-Assays nachgewiesen wird.

Dieses Video zeigt einen Assay für den Echtzeit-Nachweis der Produktion von reaktiven Sauerstoffspezies (ROS) in Reisgeweben nach der Erhebung von Pathogen-assoziierten molekularen Mustern (PAMP). Geschnittene Scheidensegmente und Blattscheiben werden einem von bakteriellen Flagellen abgeleiteten Peptid ausgesetzt, das als PAMP fungiert. Bei der Erkennung des Peptids über Mustererkennungsrezeptoren (PRRs) auf Pflanzenzellen kommt es zu einer schnellen und transienten Produktion von ROS, die...

Dieses Video zeigt einen Monozyten-Monolayer-Assay, der primäre Monozyten aus peripherem Blut verwendet, um die Fcγ-Rezeptor-vermittelte Phagozytose mit Poly-D-Antikörper-opsonisierten R2R2 roten Blutkörperchen zu bewerten.

Dieses Video zeigt den Charcoal Agar Resazurin Assay (CARA) zur Bewertung der Aktivität von antimikrobiellen Verbindungen gegen Mycobacterium tuberculosis. CARA hilft bei der Bewertung der Wirksamkeit dieser Verbindungen, indem es ihren Einfluss auf das Bakterienwachstum misst und zwischen bakteriziden und bakteriostatischen Wirkungen unterscheidet.

Dieses Video zeigt einen Assay zur Untersuchung der Toll-like Rezeptor (TLR)-abhängigen Aktivität der Transkriptionsfaktoren Kernfaktor-kappa-B (NF-κB) und Aktivatorprotein-1 (AP-1) in Makrophagen. Die TLRs lösen bei der Erkennung von schadensassoziierten molekularen Mustern (DAMPs) eine proinflammatorische Signalkaskade aus, die NF-κB und AP-1 aktiviert. Die manipulierten Reportermakrophagen produzieren bei Aktivierung von NF-κB und AP-1 ein sezerniertes embryonales alkalisches...

Dieses Video zeigt eine Methode zur Überwachung der Aktivität von CAR-T-Zellen gegen Krebszellen durch elektrische Impedanzmessungen in Echtzeit. Die Verfolgung von Impedanzänderungen bewertet die Wirksamkeit von CAR-T-Zellen bei der Induktion der Zytolyse von Krebszellen und gibt Einblicke in ihre zytotoxischen Fähigkeiten.

Dieses Video demonstriert eine Technik zur Bewertung der Wirksamkeit von Antikörpern gegen Tumornekrosefaktor-alpha (TNFα), ein inflammatorisches Zytokin, durch einen in vitro bioanalytischen Ansatz. Wenn TNFα in gestresste Zellen eingeführt wird, löst es die Apoptose aus. Die Bindung an die Antikörper schränkt TNFα jedoch ein und verhindert so die Apoptose. Der Grad der Apoptose wird mit Hilfe eines Biolumineszenz-Assays quantifiziert.

Dieses Video zeigt einen von Monozyten abgeleiteten dendritischen Zelle, MoDC-basierten Assay zur Messung der Immunogenität von kommerziell erhältlichen Impfstoffen. MoDC-Assays untersuchen dendritische Zellreaktionen auf Antigene, Krankheitserreger oder Behandlungen und können Einblicke in Immunreaktionen, Impfstoffentwicklung und Immuntherapieforschung geben.

Dieses Video zeigt den Hämozytenstörungstest, der die erneute Adhäsion von Hämozyten in den hämatopoetischen Taschen von Drosophila-Larven bewertet. Mechanische Störungen setzen residente Hämozyten frei, wodurch die Anzahl der zirkulierenden Hämozyten erhöht wird. Nach der Genesung wird die erneute Adhärenz der residenten Hämozyten bestätigt, was die Reversibilität verdeutlicht.

Dieses Video zeigt einen Assay zur Messung der antikörperabhängigen Verstärkung (ADE) von Dengue-Virusinfektionen mit Hilfe des Zika-Virus-Rekonvaleszenzserums. Der Assay verwendet Dengue-Reporter-Viruspartikel (RVPs), die für ein grün fluoreszierendes Protein kodieren. Serumantikörper gegen das Zika-Virus kreuzreagieren mit RVPs und bilden einen Komplex. Die gebundenen Antikörper erhöhen die RVP-Aufnahme durch Zellen, die den Fc-Rezeptor exprimieren, was mittels Durchflusszytometrie...

Dieses Video zeigt einen Assay zur Quantifizierung des intrazellulären Wachstums von Parasiten in aus dem Knochenmark stammenden Makrophagen (BMMs). Die Makrophagenzellen sind mit den beweglichen und nicht-beweglichen invasiven Stadien der Leishmanien, metazyklischen Promastigoten bzw. Amastigoten infiziert. Die Parasiten dringen in die Makrophagen ein, werden in einer parasitophoren Vakuole internalisiert und vermehren sich im Inneren. Das intrazelluläre Parasitenwachstum wird unter Verwendung...

Dieses Video zeigt den Farbstofffreisetzungsassay zur Quantifizierung der enzymatischen Aktivität von antimikrobiellen Proteinen. Das antimikrobielle Protein baut die farbstoffmarkierte Zellwand der Bakterien ab und setzt die Farbstoffmoleküle frei, wodurch die Lösung blau wird. Die Absorption der Lösung korreliert mit der enzymatischen Aktivität des antimikrobiellen Proteins.

Dieses Video zeigt einen Spot-Plate-Assay, der auf die Bewertung der oxidativen Stressreaktionen von Bakterienstämmen zugeschnitten ist. Einige Stämme produzieren Pyomelanin, ein antioxidatives Pigment. Umgekehrt weisen Stämme, die mit einem Testmittel behandelt wurden, was zu einer verminderten Pyomelaninproduktion führte, eine erhöhte Anfälligkeit für oxidativen Stress auf, was zu einer verminderten Zellviabilität im Vergleich zu Pyomelanin-produzierenden Stämmen führte.

Dieses Video zeigt einen In-Bouillon-Assay zur Bestimmung der Wirksamkeit von Antibiotika gegen Mycobacterium tuberculosis. Die Bakterienkultur wird mit unterschiedlichen Konzentrationen eines bakteriziden Antibiotikums inkubiert. Die bakterizide Wirksamkeit wird gemessen, indem das Vorhandensein lebensfähiger Bakterien mit einem Resazurin-Assay beurteilt wird.

Dieses Video zeigt einen Assay zum Screening antimikrobieller Verbindungen, die Biofilme effizient mit einer Stiftplatte eliminieren. Die Methodik überwacht den Stoffwechselzustand des Biofilms nach der Behandlung mit antimikrobiellen Verbindungen und erleichtert die Bestimmung der minimalen Konzentration der Biofilmeradikation.

Dieses Video zeigt eine Einzelzell-Proteom-Methode, die Schwermetall-konjugierte Antikörper für das eindeutige Zell-Barcoding verwendet. Anschließend werden Immunfärbung und Massenzytometrie angewendet, um immunphänotypische und funktionelle Veränderungen in menschlichen Immunzellen aus dem Vollblut zu bewerten.

Dieses Video zeigt einen Assay zur Überwachung der dendritischen Zellmigration nach einer Balleninfektion mit Mycobacterium bovis Bacille Calmette-Guérin BCG bei Mäusen. Bei einer bakteriellen Infektion werden aktivierte DC-Zellen der Haut mit einem zellpermeablen Carboxyfluorescein-Diacetat-Succinimidylester (CFSE)-Farbstoff markiert. Nach einem geeigneten Intervall für die DC-Migration in den kehlkehlchendrainierenden Lymphknoten werden die Knotenzellen isoliert und einer Immunfärbung auf...

Dieses Video veranschaulicht die Rekonstitution von synthetischen Antigen-präsentierenden Zellen durch Bead-gestützte Lipid-Doppelschichten und ihre Anwendung bei der Bewertung der synaptischen Ausgabe, die von aktivierten T-Zellen erzeugt wird.

Dieses Video zeigt den Assay zur verzögerten Wachstumshemmung, mit dem untersucht wird, wie antimikrobielle Verbindungen, die von einer Bakterienart produziert werden, einen anderen konkurrierenden Bakterienstamm beeinflussen.

Dieses Video zeigt eine turbidimetrische Analyse zur Beurteilung der kollageninduzierten Thrombozytenaggregation in vorbehandelten, gewaschenen menschlichen Blutplättchen. Kontrollwells zeigen eine kollageninduzierte Aggregation, während eine hohe Konzentration von Inhibitoren die Pannexin-1-Kanäle blockiert und dadurch die kollageninduzierte Thrombozytenaggregation hemmt, was sich in einer unveränderten Trübung zeigt.

Dieses Video zeigt den viralen Inaktivierungsassay und zeigt die Bewertung der Wirkung von antiviralen Wirkstoffen auf virale Partikel.

Dieses Video zeigt einen viralen Attachment-Assay zum Screening antiviraler Verbindungen. Unter Verwendung von genetisch veränderten Hepatitis-C-Viren und Luciferase werden inhibitorische Effekte auf die Virusanheftung bewertet, was sich in einer geringeren Lichtintensität in gleichzeitig behandelten Vertiefungen im Vergleich zu Vertiefungen, die nur mit dem Virus behandelt wurden, zeigt.

Dieses Video zeigt einen Assay zur Bewertung von antiviralen Wirkstoffen, die auf bestimmte Schritte des viralen Eintritts in Wirtszellen und der Fusion mit dem Endosom abzielen. Die Zellen werden bei niedriger Temperatur inkubiert und dann mit HCV infiziert. Die niedrige Temperatur ermöglicht die Bindung des Virus an Wirtszellen, hemmt aber die Internalisierung über die Endozytose. Die antivirale Testverbindung wird zugegeben, und die Zellen werden bei physiologischer Temperatur inkubiert.

Das Video zeigt einen Assay zur Quantifizierung der Influenzaviren A und B. Dieser Assay verwendet eine Nicking-Endonuklease-Amplifikation mit Influenza-spezifischen Primern und eine Zieldetektion mit molekularen Beacon-Sonden.

Dieses Video zeigt eine auf Mikrotiterplatten basierende Methode zur Bestimmung der minimalen Hemmkonzentration (MIC) von Testantibiotika gegen Bakterien. Nach Zugabe einer Suspension des bakteriellen Erregers Pseudomonas aeruginosa zu einer Mikrotiterplatte, die serielle Verdünnungen eines Testantibiotikums und eines Inhibitors der Produktion von Pyomelanin durch die Bakterien enthält, wird die optische Dichte der Vertiefungen gemessen, um die minimale Hemmkonzentration des Antibiotikums zu...

Dieses Video zeigt einen Assay zur Untersuchung der Wirkung der Steifigkeit der extrazellulären Matrix (ECM) auf die bakterielle Infektion von adhärenten Zellen. Polyacrylamid-Hydrogele unterschiedlicher Steifigkeit, die mit Kollagen überlagert sind, werden in einer Multi-Well-Platte geschichtet, um die Steifigkeit der physiologischen EZM nachzuahmen. Nach dem Überlagern menschlicher Endothelzellen mit den Hydrogelen und der Infektion der Zellen mit Listeria monocytogenes-Bakterien, die so...

Dieses Video zeigt die Methode zur Durchführung eines Plaque-Assays mit einem Virus, das aus infizierter Schweinehornhaut gewonnen wurde. Die Schweinehornhaut wird verwendet, um die antivirale Wirksamkeit von experimentellen Medikamenten zu testen.

Dieses Video veranschaulicht die Initiierung der polymikrobiellen Biofilmbildung auf virusinfizierten Zellen durch Bakterien und Pilze. Eine Herpes-simplex-Virusinfektion behindert die bakterielle Anheftung an die Zellen und verhindert so die Kolokalisierung von Bakterien und Pilzen. Im Gegensatz dazu zeigen nicht infizierte Zellen eine bakteriell-pilzliche Kolokalisation und eine Initiierung der Biofilmbildung.

Dieses Video beschreibt den einfachen ATP-Messassay mit einem Luciferase-Glühreagenz. Dieser Assay wird verwendet, um das Überleben von Neisseria gonorrhoeae nach Behandlung mit Ceftriaxon zu quantifizieren.

Dieses Video zeigt einen auf Durchflusszytometrie basierenden Assay zur Quantifizierung von therapieinduzierten seneszenten Krebszellen mit dualen Seneszenzmarkern. Der Nachweis und die Quantifizierung seneszenter Zellen erfolgt unter Verwendung eines β-Galactosidase-Substrats. Das Substrat wird durch aktive lysosomale β-Galactosidase innerhalb der seneszenten Zellen gespalten, wodurch ein fluoreszierendes Produkt entsteht, das in Verbindung mit autofluoreszierenden Lipofuszin-Granulaten die...

Dieses Video zeigt eine Technik zum Nachweis bakterieller Verunreinigungen in Lebensmittel- und Wasserproben mit Hilfe von Nanosensoren. Die pathogenen Zielbakterien werden durch eine Kombination von magnetischen Relaxations- und Fluoreszenzemissionsmodalitäten nachgewiesen.

Das Video zeigt einen Festphasen-Adhärenz-Assay zur Beurteilung der Biofilmbildung. In einer Multi-Well-Platte haften Bakterien in mit Gallensalz angereicherten Medien an festen Oberflächen und bilden Biofilme, was durch Kolorimetrie durch Kristallviolettfärbung und Ethanolbehandlung bestätigt wird.

Dieses Video zeigt eine fluoreszenzbasierte Methode zur Quantifizierung der Gallensalz-induzierten Biofilmbildung. Nach der Zugabe von Gallensalzen in der Kultur eines pathogenen Darmbakteriums wird die Biofilmproduktion mit Hilfe eines fluoreszierenden Lektins nachgewiesen, das an die Polysaccharide in der extrazellulären polymeren Substanz (EPS)-Matrix des Biofilms bindet.

Das Video zeigt einen Biofilm-Dispersionsassay mit einer Multi-Well-Platte. Die Puffer- und Glukosebehandlung zersetzt den Biofilm und setzt Bakterien frei, während Gallensalze Stress induzieren und die Bakterien in der schützenden extrazellulären Polymersubstanz zurückhalten. Eine höhere Dispersion mit Puffer und Glukose bestätigt den erfolgreichen Abbau des Biofilms, geschätzt durch Messung koloniebildender Einheiten.

Dieses Video zeigt einen Echtzeit-Assay zur Überwachung des extrazellulären pH-Werts in dentalen Biofilmen mit einer pH-sensitiven ratiometrischen Sonde. Wenn ein in situ gezüchteter bakterieller Biofilm Glukose ausgesetzt wird, protoniert eine Verringerung des extrazellulären pH-Werts in der Nähe der bakteriellen Biomasse die Sonde, was zu einer erhöhten Konzentration in den Bakterien führt. Die Diskrepanz in der Emissionswellenlänge zwischen der protonierten und der unprotonierten Sonde wird...

Das Video zeigt einen FRET-Durchflusszytometrie-Assay zum Nachweis der Seeding-Aktivität von Proteinaggregaten, die aus biologischen Proben isoliert wurden. Säugetierzellen, die Tau-Reporterproteine exprimieren, werden mit Liposomentransduktionskomplexen inkubiert, die Tau-Seeds enthalten. Diese Seeds vermitteln die Aggregation der Reporterproteine, was zur Erzeugung eines FRET-positiven Signals im Durchflusszytometer führt.

Dieses Video demonstriert den quantitativen Multiplex-Bakteriennachweis mit carboxylierten magnetischen Polystyrol-Mikrosphären, die in unterschiedliche Sätze eingefärbt sind. Das Verfahren umfasst die Bildung von Kügelchen-Bakterien-Komplexen, die magnetische Trennung und die flussbasierte Analyse, die eine präzise und gleichzeitige Quantifizierung mehrerer Bakterien in derselben Reaktionsvertiefung ermöglicht.

Dieses Video zeigt einen Neutralisationsassay, der die Serumwirksamkeit bei der Neutralisierung von SARS-CoV-2-Viren misst. Es handelt sich um pseudotypisierte Viren, Serumverdünnung und lumineszenzbasierte Quantifizierung, die den Neutralisationstiter aufdeckt.

Dieses Video zeigt einen Assay zur Überwachung der Neutrophilenaktivierung und der Granulatexozytose durch einen Degranulationsassay. Bei der Aktivierung durch proinflammatorische Verbindungen verschmelzen zytoplasmatische Granula in den Neutrophilen, die Gelatinase enthalten, mit der Zellmembran und entladen ihre Fracht. Das Vorhandensein von Gelatinase im Überstand wird durch die Hydrolyse eines Fluorophor-konjugierten Gelatinesubstrats beurteilt, wodurch die Aktivierung und Degranulation von...

Dieses Video zeigt einen Degranulationsassay von azurophilen Granula in Maus-Neutrophilen, bei dem Neutrophile stimuliert werden, um myeloperoxidasehaltige azurophile Granula freizusetzen. Die anschließende enzymatische Reaktion wird verwendet, um den Myeloperoxidase-Spiegel zu quantifizieren und so einen Einblick in die Aktivierung von Neutrophilen zu erhalten.

Dieses Video zeigt ein Verfahren zum Sammeln von Mäuseurin und zur Bestimmung seines Glukosespiegels. Um den Glukosespiegel zu bestimmen, tauchen Sie einen mit Enzymen und einem chromogenen Farbstoff beschichteten Teststreifen in die Probe und initiieren Sie eine Farbänderung, die den Glukosespiegel anzeigt. Zur Quantifizierung des Glukosespiegels im Urin wird eine Urinprobe in eine Multiwell-Platte mit eskalierenden Glukosekonzentrationen gegeben, das Reaktionsgemisch hinzugefügt und inkubiert.