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Überwachung der Hirnrinde mit einem Multi-Elektroden-Array als Reaktion auf anfallsauslösende Wirkstoffe

July 8th, 2025

In This Article

Abstract

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Quelle: Lu, H. C., et al. Gleichstromstimulation und Multi-Elektroden-Array-Aufzeichnung der anfallsähnlichen Aktivität bei der Vorbereitung von Gehirnschnitten von Mäusen. J. Vis. Exp. (2016).

In diesem Video werden die Auswirkungen der transkraniellen Gleichstromstimulation (tDCS) auf Hirnschnitte untersucht, die den anterioren cingulären Kortex (ACC) und die Thalamusregionen enthalten, wobei ein Multi-Elektroden-Array (MEA) zur Messung elektrischer Signale verwendet wird. Durch die Abgabe von elektrischen Impulsen und die Infusion von anfallsauslösenden Medikamenten untersucht die Studie die ACC-Reaktion auf Anfälle.

Protocol

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Alle Verfahren mit Tierproben wurden von der zuständigen Ethikkommission für Tiere überprüft und genehmigt.

>1. Vorbereitung der experimentellen Lösung und Ausrüstung für die Aufzeichnung von MEA (Multielectrode Array)

  1. Bereiten Sie künstliche zerebrale Rückenmarksflüssigkeit vor (aCSF; 124 mM NaCl, 4,4 mM KCl, 1 mM NaH2PO3, 2 mM MgSO4, 2 mM CaCl2, 25 mM NaHCO3 und 10 mM Glukose, blasig mit 95 % O2 und 5 % CO2).
  2. Verwenden Sie zwei Arten von MEA-Sonden: 6 x 10 planare MEA und 8 x 8 MEA. Die erste Sonde deckt die Region ab, die de....

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Results

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Abbildung 1: Vorbereitung der Thalamocingulatscheibe und Einrichtung des MEA-Aufnahmesystems. (A) MT-ACC-Slice-Verfahren, (a) Entnahme des Gehirns und (b) Transfer in kühles, sauerstoffreiches aCSF. (c) Machen Sie zwei parasagittale Schnitte von der Mittellinie aus. (d) Seitenansicht des medialen Teils des Hirnblocks. (e) Machen Sie zwei abgewinkelte ventrale Schnitte des Hirnblocks. (f) Kleben Si.......

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Disclosures

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Es wurden keine Interessenkonflikte angegeben.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
IsofluranHalocarbon Products CorporationNDC 12164-002-254 %
aLiquor (gesamt:1 L):
D(+)-GlukoseMerckArtikel-Nr.: 1.08337.1000ca. 10 mM
NatriumhydrogencarbonatMerckArtikel-Nr.: 1.06329.0500ca. 25 mM
NatriumchloridMerckArtikel-Nr.: 1.06404.1000124 mM
(+)-Natrium-L-Ascorbat, >=98%SigmaNr. A4034-100G0,15 g/2 c.c
Magnesiumsulfat, wasserfrei, ReagentPlusSigmaM7506-500Gca. 2 mM
Calciumchlorid-DihydratMerckArtikel-Nr.: 1.02382.1000ca. 2 mM
Natriumdihydrogenphosphat-MonohydratMerckArtikel-Nr.: 1.06346.10001 mM
KaliumchloridMay & Baker Ltd Dagenham EnglandNr. MS 76164,4 Mio. m
(+)-BicucullineTOCRISNr. 1305 μM in Kl.
4-AminopyridinTOCRIS940250 μM im Kl.
VibratomVibratomBaureihe 1000Blockschneiden in 500 μm dicke Scheiben
Multielektroden-Array-Sonden (MEA): 6 x 10 planare MEAMehrkanal-Systeme60MEA500/30iR-Ti-pr MEAS 6x10Elektrodendurchmesser, 30 μm; Elektrodenabstand, 500 μm; Impedanz, 50 kΩ bei 200 Hz
Multielektroden-Array-Sonden (MEA): 8 x 8 MEAAyanda Biosysteme60MEA200/10iR-Ti-pr MEAS 8x8pyramidenförmige Elektrode; Durchmesser, 40 μm; Spitzenhöhe, 50 μm; Elektrodenabstand, 200 μm; Impedanz, 1.000 kΩ bei 200 Hz
Zum Einsatz kam ein 60-Kanal-Verstärker mit einem Bandpassfilter, der zwischen 0,1 Hz und 3 KHz bei 1.200-facher Verstärkung eingestelltMehrkanal-SystemeMEA-1060-BC
MC Rack-Software mit einer Abtastrate von 10 KHzMehrkanal-SystemeSoftware zur Datenerfassung und Aufzeichnung
Steuerung eines ImpulsgebersMehrkanal-SystemeSTG 1002
Scheibenankersätze und NiederhalterWarner InstrumentsSHD-26H/10; WI64-0250
Schlauchpumpe-minipuls3GilsomMINIPULS3Perfusionsrate : 8 ml/min
Isolierter StimulatorA-M SystemeModell 2100Intensität von ±350 μA, Dauer von 200 μsec
Wolfram-ElektrodeA-M SystemeArtikel-Nr.: 575300Im Thalamus platziert
kg war

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Multi Electrode ArrayBrain Slice PreparationTranscranial Direct Current StimulationSeizure Inducing AgentsAnterior Cingulate CortexThalamus RegionElectric Signal RecordingDrug Perfusion MethodStimulating Electrode PlacementArtificial Cerebrospinal Fluid

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