Synaptische Modulation bei Drosophila nach längerer Lichteinwirkung

Zusammenfassung

Quelle: Sugie, A., et al. Analyse der synaptischen Modulation von Drosophila melanogaster Photorezeptoren nach längerer Lichteinwirkung. J. Vis. Exp. Elektronikartikel (120)

Dieses Video zeigt die Aufzucht von Drosophila melanogaster unter spezifischen Lichtbedingungen, um die Rolle von Bruchpilot-Proteinen bei der Freisetzung von Neurotransmittern und der daraus resultierenden Modulation der synaptischen Aktivität zu untersuchen.

Protokoll

>1. Bedingungen bei Lichteinwirkung

1. Vom Larvenstadium bis zur Verlosung sollten die Fliegen in einem 12-stündigen Licht-/12-stündigen Dunkelzyklus (LD) bei 25 °C gehalten werden (Abbildung 1A).
2. Sammeln Sie die Fliegen 0 - 6 h nach dem Lösen und geben Sie sie in ein neues Fläschchen mit Fliegenfutter.
3. Setzen Sie die Fläschchen in ein transparentes Acrylharzgestell mit drei Stufen ein (eine Höhe von 41 cm, eine Basis von 21 cm, eine Dicke von 4 cm und eine Höhe von 13 cm für jede Stufe) (Abbildung 1B).
4. Stellen Sie den Abstand zwischen dem Rack und einem LED-Panel mit einem digitalen Belichtungsmesser so ein, dass eine Beleuchtung mit einer durchschnittlichen Intensität von 1.000 Lux erreicht wird (Abbildung 1C).
5. Bewahren Sie die Fliegen 1 - 3 Tage unter einer der folgenden Bedingungen auf: konstante Dunkelheit (DD), 12 h Licht/12 h Dunkelzyklus (LD) oder konstantes Licht (LL) bei 25 °C in einem kleinen Inkubator (Abbildungen 1A und 1C).

Ergebnisse

Abbildung 1: Vorbereitung der Bedingungen für die Exposition mit definierter Lichtintensität. (A) Lichtexpositionsprotokolle nach der Eklosion. DD, ständige Dunkelheit; LD, 12 h hell/12 h dunkel; LL, ständige Lichteinwirkung. Fliegengehirne wurden zu den in den Klammern angegebenen Zeitpunkten präpariert (Adaptiert von einer früheren Publikation9). (B) Die Fläschchen sind in einem kundenspezifisch...

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
Phiole	Hightech, Japan	MKC-20
Stecker	Thermo Fisher Sciehtific, Vereinigte Staaten von Amerika	AS-275
Maßgeschneidertes transparentes Gestell aus Acrylharz	Shin-Shin Corporation, Japan		eine Höhe von 41 cm, eine Basis von 21 cm, eine Dicke von 4 cm und eine Höhe von 13 cm für jede Stufe
Cooler Inkubator	MITSUBISHI ELECTRIC, Japan	CN-40A
LED-Blende	MISUMI, Japan	LEDXC170-W
Digitaler Belichtungsmesser	CEM	DT-1301
Fliegenpad	Tokken, Japan	TK-HA03-S