Erzeugung lokaler Cornu Ammonis 1 (CA1) Gamma-Oszillationen mit Hilfe tetanischer Stimulationen in einem hippokampalen Hirnschnitt

Zusammenfassung

Quelle: Hatch, R. J., et al. Erzeugung lokaler Ca1-γ-Oszillationen durch tetanische Stimulation. J. Vis. Exp. (2015).

Dieses Video demonstriert das Verfahren zur Induktion lokaler CA1-Gamma-Oszillationen in einem CA1-Hippocampus-Maushirnschnitt mit Hilfe von tetanischen Simulationen. Diese Methode ist wichtig, um die Aktivität des neuronalen Netzwerks zu verstehen.

Protokoll

Alle Verfahren, an denen Tiermodelle beteiligt sind, wurden vom lokalen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss von JoVE überprüft.

1. Einrichtung zum Schneiden von Hirnschnitten

1. Bereiten Sie eine Schneidlösung her, bestehend aus (mM) 125 Cholin-Cl, 2,5 KCl, 0,4 CaCl₂, 6 MgCl₂, 1,25 NaH₂PO₄, 26 NaHCO₃, 20 D-Glukose, gesättigt mit Carbogengas (95 % O₂–5 % CO₂) und einer künstlichen Liquor (aCSF)-Aufnahmelösung, bestehend aus (mM) 125 NaCl, 2,5 KCl, 2 CaCl₂, 2 MgCl₂, 1,25 NaH₂PO....

Ergebnisse

Abbildung 1. Schematische Darstellung des Schädels und der darüber liegenden Haut, die die Lage der Schnitte zeigt, um das Gehirn freizulegen. A1, A2, B und C markieren die Stellen von Schnitten, die gemacht werden müssen, um den Schädel für die Entfernung des Gehirns zu öffnen.

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
4-(N-Ethyl-N-phenylamino)-1,2-dimethyl-6-(methylamino)pyrimidiniumchlorid (ZD7288)	Sigma-Aldrich	Z3777
Biuculline	Sigma-Aldrich	Artikel-Nr.: 14340
6-Cyano-7-nitrochinoxa-Linie-2,3-Dion (CNQX)	Sigma-Aldrich	Nr. 127
Nickel	Sigma-Aldrich	266965
Carbamazepin	Sigma-Aldrich	Nr. C4024
(2R)-amino-5-phosphonopentano at (APV)	Tocris Biowissenschaften	Nr. 105
Retigabin	Chemie-Pazifik	Artikel-Nr.: 150812-12-7
Cholin-Cl	Sigma-Aldrich	C1879-5KG
Kcl	Sigma-Aldrich	P9333-500G
NaH2PO4	Sigma-Aldrich	Nr. S9638-250G
NaHCO3	Sigma-Aldrich	Nr. S6297-250G
NaCl	Sigma-Aldrich	Nr. S7653-5KG
Traubenzucker	Sigma-Aldrich	Nr. G8270-1KG
CaCl2.2H2O	Sigma-Aldrich	Artikel-Nr.: 223506-500G
MgCl2.6H2O	Sigma-Aldrich	M2670-500G
Elektrodenglas	Harvard-Apparatur	GC150F-10
Konzentrische bipolare stimulierende Metallelektrode	FHC	CBBPF75
Digitaler Isolator	Abrufen von Instrumenten	Modell BJN8-9V1
Modell 1800 Verstärker	A-M-Systeme	Modell 1800 Verstärker
Digitalisierer	Nationale Instrumente	NI USB-6211
Vibrotom	Leica	VT1200s