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Alle Verfahren, an denen Tiermodelle beteiligt sind, wurden vom lokalen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss von JoVE überprüft.
1. Einsetzen eines Cochlea-Implantats (CI) Elektrodenarrays
HINWEIS: Das intracochleäre Elektrodenarray besteht aus vier Platinbändern (Ø0,2 mm) mit einem Platin/Iridium-Parylen-isolierten Draht, der in einem Silikonschlauch abgeschirmt ist (Abbildung 1).
- Platzieren Sie das Retraktorwerkzeug in der Inzision, um wieder Zugang zur Bulla zu erhalten.
- Setzen Sie das Elektrodenarray in das runde Fenster (scala tympani) in einer Tiefe ein, in der sich der 4. Platinring direkt innerhalb des runden Fensters befindet. Dies ergibt eine Einstichtiefe von ~2 mm, was einer intracochleären Position bei ~30 kHz entspricht.
- Wickeln Sie den Elektrodendraht in die Bulla und kleben Sie den Draht auf das Gewebe über der Bulla. Das Aufwickeln des Drahtes hilft, das Array während des gesamten Experiments an Ort und Stelle zu halten.
- Entfernen Sie vorsichtig den Retraktor und verschließen Sie den Ansatz mit Gewebekleber.
- Machen Sie mit einer Gewebeschere einen kleinen Schnitt (0,5 mm) im Hals senkrecht zu der Linie, zwischen der sich die aktive und die Referenzelektrode für die auditorische Hirnstammreaktion (ABR) befinden. Legen Sie die platingeschliffene Kugel in die Unterhauttasche und verschließen Sie den kleinen Schnitt mit Gewebekleber (Abbildung 2).
- Verbinden Sie die Elektrodenarray-Platine mit der Animal Stimulator Platform (ASP).
2. Elektrische auditive Hirnstammreaktion (eABR)
HINWEIS: Eine Tierstimulator-Plattform wird verwendet, um das Elektrodenarray elektrisch zu stimulieren. Andere aktuelle Quellen und Softwaresysteme können verwendet werden.
- Reinigen Sie die ABR-Elektroden mit 70%iger Ethanollösung. Platzieren Sie die Elektroden unter der Haut: aktiv (Ch1) auf dem Scheitelpunkt, Referenz (-) unterhalb der Ohrmuschel des ipsilateralen Ohrs und geschliffen im Hinterbein (Abbildung 2).
- Öffnen Sie die ASP-Software und definieren Sie das Paradigma der elektrischen Impulsstimulation. Wir verwenden einen ladungsbalancierten biphasischen Puls mit 50 μs/Phase und 10 μs Interphasenabstand bei 23,3 Pulsen pro Sekunde (pps). Die elektrische Stimulation erfolgt in einer monopolaren Elektrodenkonfiguration mit steigendem Strom. Insgesamt werden 400 Antworten auf jeder aktuellen Ebene gemittelt.
- Präsentieren Sie die elektrischen Impulsfolgen und zeichnen Sie die evozierte eABR-Reaktion kontinuierlich über den Tucker Davis Technologies (TDT)-Kopftisch, den Vorverstärker und den Hörprozessor auf.
- Plotten und analysieren Sie die eABR-Daten über ein maßgeschneidertes Matlab-Skript (Abbildung 3). Das Skript und ein Beispiel für eine Aufzeichnung finden Sie in der Ergänzung.
