Eine intrazerebroventrikuläre Injektion zur Analyse der Verteilung des murinen Cytomegalievirus in einem neonatalen Mausgehirn

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Quelle: Kawasaki, H., et al. Intracerebroventrikuläre und intravaskuläre Injektion von Viruspartikeln und fluoreszierenden Mikrokügelchen in das Gehirn von Neugeborenen. J. Vis. Exp. (2016).

Dieses Video zeigt den intrazerebroventrikulären Injektionsprozess zur Untersuchung der Verteilung des murinen Cytomegalievirus (MCMV) im Gehirn von Neugeborenen. MCMV, das entwickelt wurde, um ein verstärktes grün fluoreszierendes Protein (EGFP) für die Sichtbarkeit zu exprimieren, wird in den lateralen Ventrikel des Gehirns eines Mäusewelpen injiziert. Das injizierte Virus zirkuliert durch die Zerebrospinalflüssigkeit und infiziert Zellen im periventrikulären Bereich, einschließlich der Marginalzone, des Plexus choroideus und der subventrikulären Zone.

Protokoll

1. ICV-Injektion von MCMV und fluoreszierenden Mikrokügelchen in neugeborene Mäuse

Halten Sie normal trächtige ICR-Mäuse in einer temperaturkontrollierten Einrichtung unter einem 12-stündigen Hell-Dunkel-Zyklus. Die Neugeborenen werden am Tag der Geburt mit P 0,5 bezeichnet.
Sterilisieren Sie eine 10-μl-Spritze und eine 27-g-Nadel mit 70 % Alkohol.
Laden Sie die Injektionslösung (5 μl), die MCMV oder fluoreszierende Mikrokügelchen enthält, in die Nadel, indem Sie vorsichtig am Kolben der Spritze ziehen.
Halten Sie die neugeborene Maus (P 0,5) fest, indem Sie die Maus für 3 - 4 Minuten auf Eis legen. Sobald das....

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Ergebnisse

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Abbildung 1: Injektionsstellen der neugeborenen Maus. (A, B) ICV-Injektion von 5 μl MCMV (ca. 5 × 10⁵ PFU) oder von 5 μl Mikrokügelchen (ca. 5,75 × 10⁹ Partikel). (A) Die Injektionsstelle befindet sich in der Mitte zwischen Ohr und Auge (etwa 0,7 - 1,0 mm lateral der sagittalen Naht und 0,7 - 1,0 mm kaudal vom neonatalen Bregma). (B) Eine 27-.......