Neuropathologie

Um Hirnatrophie zu erkennen, beginnen Sie mit Objektträgern, die die deparaffinisierten Hirnschnitte aus neurodegenerativen Mausmodellen unterschiedlichen Alters enthalten.

Um diese NPs sichtbar zu machen, nehmen Sie einen entparaffinisierten, fixierten menschlichen Gehirnschnitt.

Füge doppelt destilliertes Wasser hinzu, um die Abschnitte zu waschen.

Behandeln Sie das Gewebe mit Osmiumtetroxid, um die Zellstrukturen, einschließlich Lipofuszin, zu stabilisieren.

Homogenisieren Sie das Gewebe, um Proteine in den Puffer freizusetzen. Die Proteaseinhibitoren blockieren die Proteaseaktivität und verhindern so den Proteinabbau.

Fügen Sie einen Ladepuffer hinzu, der ein Waschmittel, ein Reduktionsmittel und einen Tracking-Farbstoff enthält.

Inkubieren Sie mit einem proteolytischen Enzym, um die normalen Prionen zu verdauen, wobei die resistenten Aggregate intakt bleiben.

Inkubieren Sie mit Wasserstoffperoxidlösung, um endogene Peroxidasen zu hemmen und unspezifische Färbungen zu verhindern.

Diese Abschnitte enthalten neurofibrilläre Tangles – abnormale Aggregate des Tau-Proteins, die in Hippocampus-Neuronen vorkommen.

Um Heparansulfat sichtbar zu machen, beginnen Sie mit einem erkrankten menschlichen Hippocampus-Gewebeschnitt, der Amyloid-Plaques enthält.

Zentrifugieren Sie die Probe, um Zelltrümmer zu pelletieren und den Überstand aufzufangen.

Dieses Protokoll beschreibt die Extraktion von Proteinen aus neuronalen Krebszellen. Die Zellen werden mit einem Puffer gewaschen und durch enzymatischen und mechanischen Aufschluss lysiert. Der extrahierte proteinreiche Überstand wird nach der Zentrifugation aufgefangen.

Dieses Video demonstriert das Verfahren zur fluoreszierenden Färbung von kortikalen Neuronen von Ratten für die Mikroskopie. Es zielt auf F-Aktin und dendritische Proteine ab, um die strukturelle Integrität zu analysieren und die F-Aktin-Dichte zu berechnen, die für die Untersuchung der neuronalen Funktion und Gesundheit entscheidend ist.

Dieses Video zeigt das Protokoll zur Isolierung von Amyloidfibrillen aus Maushirngewebeextrakt mittels Dichtegradientenzentrifugation und Verdauung von Nicht-Amyloid-Proteinen.

Dieses Video zeigt die Generierung eines neuronalen Verletzungsmodells unter Verwendung von reaktiven Sauerstoffspezies (ROS) in primären Kleinhirn-Körnerneuronen der Maus. Es beschreibt den Prozess der Induktion von oxidativem Stress durch Zugabe hoher Konzentrationen von Wasserstoffperoxid. Die ROS-Exposition führt zu DNA-Strangbrüchen und genomischer Instabilität. Darüber hinaus beeinträchtigt die Oxidation zellulärer Proteine deren Funktionen, während die Lipidperoxidation die Integrität...

Dieses Video demonstriert eine Methode zur Bewertung der neurotoxischen Wirkungen von Nanopartikeln anhand von Mikroglia. Es werden die Schritte zur Aktivierung von Mikroglia mit Nanopartikeln, zum Filtern konditionierter Medien zur Isolierung von Mikroglia-abgeleiteten proinflammatorischen Zytokinen und zum Testen der Toxizität von hypothalamischen Neuronen mit den konditionierten Medien beschrieben.

Das Video zeigt die Induktion von Neurodegeneration in den segmentalen Nerven der Drosophila-Larve durch mechanische Verletzung. Die ventrale Kutikula von anästhesierten Larven wird mit einer Pinzette eingeklemmt, um die Segmentnerven zu verletzen. Die verletzten Larven werden mit Nahrung versorgt, wodurch die Verletzung zu einer Degeneration der Motoneuronen in den Nerven führen kann, was zu einer Störung ihrer neuromuskulären Verbindungen (NMJs) führt.

Dieses Video zeigt ein Verfahren zur Erstellung eines Rattenmodells der Parkinson-Krankheit, indem das Neurotoxin 6-Hydroxydopamin (6-OHDA) in das Gehirn injiziert wird. Die Neurotoxin-Infusion in das mediale Vorderhirnbündel (MFB) zielt spezifisch auf dopaminerge Neuronen ab, die für die motorische Kontrolle verantwortlich sind, was zu ihrer Zerstörung und Replikation von Parkinson-Symptomen führt.

In diesem Video wird ein schrittweises Protokoll für humane embryonale Stammzellen in neuronale Organoide demonstriert. Die Methode beinhaltet die Induktion der Bildung neuronaler Rosetten, gefolgt von einer kontrollierten Reifung und einer abschließenden Kultivierung auf einer hydrophoben Membran, um voll entwickelte neuronale Organoide zu erhalten.

Dieses Video zeigt die Differenzierung von humanen embryonalen Stammzellen (hESCs) in dopaminerge Neuronen, um ein Modell für die Untersuchung der Parkinson-Krankheit bereitzustellen. Die hES-Zellen werden in einem neuronalen Induktionsmedium in einer Mikrotiterplatte kultiviert, um 3D-Neurosphären zu bilden. Diese werden dann in einem neuronalen Induktionsmedium kultiviert, um die Differenzierung in dopaminerge Vorläuferneuronen zu fördern. Die endgültige Reifung der Neuronen erfolgt in einem...

Dieses Video zeigt eine In-vitro-Bewertung des neuronalen Wachstumskegelkollapses durch Amyloid-β (Aβ)-Aggregate. Die Behandlung der Neuronen mit Aβ-Aggregaten führt zu einer Destabilisierung des Zytoskeletts, die zum Kollaps der Wachstumskegel an der Spitze der Axone führt. Die behandelten Zellen werden mit Kontrollzellen verglichen, um das Ausmaß des Zusammenbruchs des Wachstumskegels zu beurteilen.

Das Video demonstriert ein Verfahren zur Präparation von menschlichen kortikalen Hirnschnitten von Alzheimer-Patienten zur Analyse der Abscheidung von Amyloid-beta (Aβ)-Peptiden mittels Matrix-gestützter Laser-Desorption/Ionisations-Bildgebungs-Massenspektrometrie (MALDI-IMS). Zu den Schritten gehören die Vorbereitung der Objektträger, die Behandlung des Gewebes zur Verbesserung der Ionisation und die Analyse der räumlichen Verteilung von Amyloid-Beta-Peptiden.

Dieses Video zeigt die Immunfärbung von Neuronen, die mit Alpha-Synuclein (αS)-Aggregaten behandelt wurden. Die Neuronen werden zunächst mit αS-Aggregaten behandelt. Anschließend werden sie fixiert, permeabilisiert und mit einer Blockierungslösung behandelt. Es werden Primärantikörper zugegeben, gefolgt von einem fluoreszenzmarkierten Sekundärantikörper und einer Kernfärbung. Anschließend wird die Probe montiert und unter einem Mikroskop betrachtet.

Dieses Video zeigt ein Verfahren zur Induktion von Netzhautdegeneration bei erwachsenen Zebrafischen mittels Laserverletzung. Der Laser zielt auf Photorezeptorzellen in der Netzhaut ab und löst den Zelltod und einen degenerativen Prozess aus. Diese Schädigung aktiviert Müller-Gliazellen (MG), was zu ihrer Dedifferenzierung in Stammzellvorläuferzellen führt, die die Regeneration der Netzhaut unterstützen.

Dieses Video zeigt das Verfahren zur Injektion monomerer Amyloid-Peptide in das Vorderhirn von erwachsenen Zebrafischen, um Amyloid-Toxizität zu erzeugen, die die neuronalen Schäden nachahmt, die bei der Alzheimer-Krankheit beobachtet...

Dieses Video demonstriert das Protokoll zur Messung der Odorantrezeptoraktivierung in transfizierten Zellen mit einem zyklischen Adenosinmonophosphat (cAMP)-Biosensor und Lumineszenzdetektion. Die Methode wird angewendet, um Rezeptor-Liganden-Interaktionen und Signalwege in olfaktorischen Neuronen zu untersuchen.

Dieses Video zeigt das Verfahren zur Injektion von Amyloid-Beta-Peptiden, Aluminiumchlorid und einem neuroinflammatorischen Wachstumsfaktor, die zusammen bei der Bildung von toxischen Amyloid-Plaques in der Hippocampus-Region helfen. Dies führt bei der Ratte zu Gedächtnisstörungen, die für die Alzheimer-Krankheit charakteristisch sind.

Dieses Video zeigt die präzise stereotaktische Infusion von Amyloid-Beta in den Gyrus dentatus, um ein Mausmodell der Alzheimer-Krankheit zu etablieren. Die genaue Koordinatenbestimmung und die kontrollierte Verabreichung von Amyloid-Beta-Proteinen führen zu einer neuronalen Degradation, stören die Gedächtnisverarbeitung und tragen zur Entwicklung der Alzheimer-Krankheit bei.

Dieses Video zeigt die Injektion von Alpha-Synuclein-Fibrillen in eine Maus, um eine Neuroinflammation zu induzieren. Die Fibrillen werden intraperitoneal in eine transgene Maus injiziert, die mutierte Alpha-Synuclein-Proteine exprimiert. Beim Erreichen des Zentralnervensystems dringen die Fibrillen in die Neuronen ein und induzieren die Aggregation der mutierten Proteine. Die Aggregate breiten sich auf benachbarte Neuronen, Mikroglia und Astrozyten aus. Die Erkennung der Aggregate löst bei...

Dieses Video zeigt das Verfahren zur in vivo-Bildgebung von C. elegans, die prionenähnliche Proteine exprimieren, die mit rot fluoreszierendem Protein markiert sind. Das Protokoll beinhaltet die Immobilisierung von Nematoden auf einem Agarose-Pad für die konfokale Zeitraffermikroskopie, um die Proteinaggregation und den Transport innerhalb und zwischen den Zellen aufzudecken. Diese Technik ist entscheidend für die Untersuchung der Proteinaggregation im Zusammenhang mit neurodegenerativen...

Dieses Video zeigt den Prozess der Injektion eines viralen Vektors in die Substantia nigra der Ratte, um die Parkinson-Krankheit zu modellieren. Es werden die Schritte zur Vorbereitung der Ratte, zur Mikroinjektion des viralen Vektors in die Substantia nigra und das Wiederherstellungsverfahren beschrieben.

Dieses Video erklärt den Prozess der Isolierung und Anreicherung von waschmittelunlöslichen Proteinaggregaten aus gefrorenem postmortalem menschlichem Hirngewebe. Es demonstriert die wichtigsten Schritte, einschließlich Homogenisierung, Waschmittelbehandlung, Beschallung und Ultrazentrifugation zur Trennung und Reinigung der unlöslichen Aggregate. Der letzte Schritt besteht darin, die Aggregate in Harnstoffpuffer für die weitere Analyse zu lösen.

Dieses Video zeigt die Bildgebung und Quantifizierung von Proteinaggregaten in genetisch veränderten Drosophila-Gehirnen. Das Gehirn wird fixiert, gewaschen und mit einem Antifading-Mittel behandelt, bevor es montiert wird. Die Bilder werden mit einem konfokalen Mikroskop aufgenommen und quantifiziert, um die Übertragung mutierter Proteinaggregate zu beobachten.

Dieses Video demonstriert ein Protokoll zur Untersuchung der Co-Lokalisation von Orexin- und Cannabinoid-Rezeptoren in normalem und ernährungsbedingter Adipositas (DIO) adultem Zebrafisch-Gehirngewebe mittels Immunfluoreszenz.

Dieses Video zeigt den Prozess der Quantifizierung der Alpha-Synuclein-Akkumulation in embryonalen Dopamin-Neuronen der Maus, die mit alpha-Synuclein-vorgeformten Fibrillen vorbehandelt wurden. Es werden die Schritte zur Fixierung, Färbung und Quantifizierung der Dopamin-Neuronen, die Alpha-Synuclein-Aggregate enthalten, mittels Immunfluoreszenz beschrieben.

Dieses Video zeigt, wie man die Proteasomaktivität in verschiedenen subzellulären Kompartimenten der lateralen Amygdala aus angstkonditionierten und kontrollierten Rattengehirnen mit einem fluorogenen Peptid-Assay messen kann. Das Proteasom spaltet das fluorogene Peptidsubstrat und setzt fluoreszierende Moleküle frei, die mit einem Plattenleser quantifiziert werden, um die Proteasomaktivität in den nukleären und synaptischen Proteinfraktionen zu bewerten. Eine erhöhte Kernaktivität deutet auf...

Dieses Video zeigt den Prozess der Induktion von Levodopa-induzierten Dyskinesien in einem Parkinson-Rattenmodell durch die Verabreichung von Levodopa zusammen mit einem Dopamin-Umwandlungshemmer. Wiederholte Injektionen überstimulieren die Neuronen des Gehirns, was zu motorischen Funktionsstörungen führt.

Dieses Video zeigt die Induktion von orofazialen neuropathischen Schmerzen in einem Rattenmodell durch Ligatur des Nervus infraorbitalis. Dies führt zu Nervenschäden und Entzündungen, die eine abnormale Schmerzsignalisierung verursachen und chronische Schmerzzustände nachahmen, die zur Untersuchung des orofazialen Schmerztests verwendet werden können.

Dieses Video zeigt die Methode zum Nachweis alternder Neuronen in kortikalen Organoidschnitten durch Färbung der Beta-Galactosidase-Aktivität, die in seneszenten Zellen erhöht ist. Das Enzym spaltet ein Substrat, um ein blaues Produkt zu erzeugen, gefolgt von einer mikroskopischen Beobachtung der gefärbten Neuronen.

Dieses Video zeigt die Generierung eines fokalen Demyelinisierungs-Mausmodells unter Verwendung einer Zweipunkt-Injektion von Lysophosphatidylcholin (LPC). Der Schädel einer betäubten Maus wird freigelegt. Die Injektionskoordinaten werden bestimmt und ein Loch gebohrt, um LPC-Injektionen an den Zielstellen zu ermöglichen. LPC induziert die fokale Demyelinisierung von Neuronen über Entzündungen, während eine Zweipunktinjektion ihre Nachhaltigkeit gewährleistet.

Dieses Video zeigt den Prozess der Visualisierung eines mit Biocytin gefüllten Interneurons in einem Hippocampus-Schnitt einer Ratte und hebt seine neurochemische Identität durch den Einsatz spezifischer Antikörper und Fluoreszenzmikroskopie hervor.

Dieses Video zeigt die immunhistochemische Färbung des S-100-Proteins in rektalen Saugbiopsieschnitten. Antigen-gewonnene Schnitte werden blockiert und mit primären, gefolgt von sekundären Antikörpern gegen S-100, einen Marker des Morbus Hirschsprung, behandelt. Chromogenes Substrat wird hinzugefügt, um die Zielzellen zu färben. Die Proben werden dehydriert und montiert, bevor sie unter dem Mikroskop sichtbar gemacht werden.

Dieses Video zeigt die Methode zur Induktion der Demyelinisierung in Rückenmarksneuronen der Maus durch Lysolecithin-Injektionen, gefolgt von einer Remyelinisierung durch Migration und Differenzierung von Oligodendrozyten-Vorläuferzellen. Der Prozess beeinträchtigt die neuronale Signalübertragung und stellt sie dann allmählich wieder her.

Dieses Video zeigt den Prozess der Transduktion menschlicher neuronaler Zellen mit einem Lentivirus, das für ein mutiertes humanes Tau-Protein kodiert, das mit gelb fluoreszierendem Protein (YFP) markiert ist, um die Proteinaggregation zu untersuchen. Es werden die Schritte vom Eintritt des Virus bis zur Expression von mutiertem Tau beschrieben, die in der Bildung sichtbarer zytoplasmatischer Tau-Aggregate in den Neuronen gipfeln.

Dieses Video zeigt die Markierung neuronaler Zellen mit Antikörpern für mitochondriale Atmungskettenkomplexe, mitochondriale DNA-assoziierte Proteine und mitochondriale äußere Membranproteine, gefolgt von einer Durchflusszytometrie zur Quantifizierung ihrer Spiegel.

Dieses Video zeigt das Verfahren zur Messung der γ-Sekretase-Aktivität in genetisch veränderten menschlichen Zellen mit Hilfe eines Tetracyclin-induzierbaren Systems. Der Prozess umfasst die Induktion der APP-Genexpression mit Tetracyclin, die Erzeugung von Amyloid-β-Peptiden und die Aktivierung der Luciferase-Produktion. Anschließend wird die aus der Luciferase-Substrat-Reaktion resultierende Biolumineszenz gemessen, die die Aktivität der γ-Sekretase widerspiegelt.

Dieses Protokoll beschreibt die Verwendung der Immunhistochemie zur Identifizierung von Locus coeruleus-Regionen in Schnitten des Mausgehirns. Durch die gezielte Beeinflussung von Dopamin-β-Hydroxylase mit grün fluorophormarkierten Antikörpern werden Noradrenalin-produzierende Neuronen unter dem Mikroskop als grüne Fluoreszenz sichtbar gemacht.

Das Video zeigt den Prozess der Verwendung einer Mikrodialysesonde, um extrazelluläre Proteine aus der interstitiellen Flüssigkeit (ISF) eines Mäusegehirns zu sammeln. Eine Mikrodialysesonde, ausgestattet mit einer semipermeablen Membran mit hohem Molekulargewicht, wird über eine implantierte Führungskanüle in das Gehirn einer anästhesierten Maus eingeführt. Die Sonde, die mit Pumpen verbunden ist, ermöglicht es einem physiologischen Puffer, das Hirngewebe zu durchdringen und sich mit dem ISF...

Dieses Video zeigt die Methode, chronischen Stress bei einer Maus durch wiederholte Immobilisierung zu induzieren, was zu einer Corticosteron-Freisetzung und einer verminderten Glutamatrezeptoraktivität in Neuronen führt, was zu depressionsähnlichem Verhalten führt.

Dieses Video zeigt das Verfahren zur Präparation und Behandlung von Hemischeiben des Gehirns von Ratten mit einem neurotoxischen Peptid, um die Neurodegeneration nachzuahmen. Das Protokoll ermöglicht die Analyse neurodegenerativer Ereignisse durch direkten Vergleich von Kontroll- und behandelten Schnitten in derselben anatomischen Ebene.

Dieses Video zeigt die Verwendung von transfizierten Spinalganglienzellen zur Untersuchung der Neurotransmitterfreisetzung durch Stimulation mit einem Neuropeptidrezeptor-Agonisten.

Dieses Video zeigt die immunhistochemische Färbung cholinerger Fasern im Nucleus basalis der Meynert-Region von Schnitten aus dem Gehirn von Mäusen. Die Schnitte werden blockiert und mit primärer Cholin-Acetyltransferase behandelt, gefolgt von biotinylierten Sekundärantikörpern. Es werden Avidin-Biotin-Peroxidase-Komplexe zugesetzt, die an Sekundärantikörper binden, gefolgt von dem chromogenen Substrat. Die Schnitte werden dann dehydriert und montiert, bevor sie unter dem Mikroskop sichtbar...

Dieses Video zeigt die Bewertung der Dopaminaufnahme in Synaptosomen, die aus Mäusegehirnen gewonnen wurden. Es werden Schritte zur Vorbereitung von Synaptosomen auf die Dopaminaufnahme über Dopamintransporter, zur Behandlung mit unterschiedlichen Konzentrationen von radioaktiv markiertem Dopamin, zur Isolierung der Synaptosomen und zur Messung der Radioaktivität zur Quantifizierung der Dopaminaufnahme beschrieben.

Dieses Video zeigt das Verfahren zum Färben von fixierten Rattenhirnschnitten, die Biocytin-gefüllte Interneurone enthalten. Das Protokoll umfasst die Inkubation mit dem Avidin-Biotin-Komplex (ABC), die Färbung mit HRP und chromogenem Substrat, die Konservierung der Strukturen mit Osmiumtetroxid und die Einbettung des Gewebes in Harz für die Bildgebung.

Dieses Video zeigt den Nachweis der Serotoninrezeptor-RNA-Synthese mit Hilfe von Oligonukleotidsonden in Rattenhirngewebe, das vom Serotonin-Syndrom betroffen ist. Das Protokoll umfasst eine Gewebevorbehandlung, Sondenhybridisierung und enzymatische Detektion, um die RNA-Expression von Serotoninrezeptoren unter einem Mikroskop sichtbar zu machen und zu quantifizieren.

In diesem Video wurde ein Kleinhirnschnitt der Maus verwendet, um synaptische Wechselwirkungen zwischen parallelen Fasern, Kletterfasern und Purkinje-Zellen zu untersuchen, die für die motorische Kontrolle unerlässlich sind. Die Stimulation der Kletterfasern induzierte eine Langzeitdepression (LTD) in Purkinje-Zellen, die die synaptische Stärke schwächte und zu einer verminderten Reaktion auf parallele Faserstimulation führte.

Dieses Video zeigt die Immunfluoreszenzfärbung eines transgenen Drosophila-Gehirns für die Einzelzellbildgebung von Gliazellen. Das Gehirn exprimiert membrangesteuerte Proteine, die mit verschiedenen Kombinationen von antigenen Epitopen unter der Kontrolle eines glialspezifischen Rekombinasesystems fusioniert sind. Die isolierten und fixierten Gehirne werden mit primären Antikörpern gefärbt, die spezifisch für die antigenen Epitope sind, gefolgt von Fluorophor-konjugierten Sekundärantikörpern.

Dieses Video zeigt ein stereotaktisch geführtes chirurgisches Verfahren zur Ablation des auditorischen Kortex bei einer Ratte. Zu den Schritten gehören die Identifizierung anatomischer Orientierungspunkte bei einer anästhesierten Ratte, die in einem stereotaktischen Rahmen gesichert ist, die Schaffung eines Fensters am Schädel über dem auditorischen Kortex, die Aspiration der kortikalen Schichten und die postoperative Versorgung, um die Auswirkungen der Ablation auf die Klangverarbeitung zu...

In diesem Video beschreiben wir das Verfahren zur Durchführung einer Fluoreszenzfärbung mittels Fluoreszenzmikroskopie, um die Phalloidinfärbung von Neuralleistenzellen zu demonstrieren, die auf Hydrogelen unterschiedlicher Steifigkeit kultiviert wurden, um die Organisation des Zytoskeletts sichtbar zu machen und zu analysieren.

Dieses Video zeigt die Vernetzung von neuronalen Oberflächenproteinen mit Bis-Sulfosuccinimidylsuberat oder BS3. Das isolierte und gekühlte Gehirn der Maus wird koronal geschnitten. Aus den Schnitten wird die gewünschte Region extrahiert, zerkleinert und mit BS3 behandelt. BS3 vernetzt Oberflächenproteine wie GABA-Rezeptoren, so dass die internen Proteine unverändert bleiben. Die Reaktion wird mit Glycin abgeschreckt, bevor die Proben für die weitere Analyse verarbeitet werden.

Das Video demonstriert eine Technik zur Messung der Glukoseaufnahme in Drosophila larvalen Motoneuronen unter Verwendung eines intrazellulären Glukosesensors auf Basis des Fluoreszenzresonanz-Energietransfers (FRET). Nach dem Präparieren der Larven, um den ventralen Nervenstrang freizulegen, werden die Motoneuronen durch die Fluoreszenz sichtbar, die vom Donorfluorophor des Sensors emittiert wird. Bei Stimulation mit Glukose löst FRET zwischen den Donor- und Akzeptor-Fluorophoren des Sensors...

Dieses Video zeigt das Verfahren zur Immunfärbung eines fixierten Maushirngewebeschnitts mit fluoreszenzmarkierten Astrozyten unter Verwendung von Primär- und Sekundärantikörpern und die Aufnahme der Bilder der gefärbten Astrozyten durch konfokale Mikroskopie.

Dieses Video zeigt, wie Purkinje-Zellen aus einem menschlichen postmortalen Kleinhirngewebe mittels Laser-Capture-Mikrodissektion isoliert werden können.

Dieses Video zeigt ein detailliertes Schritt-für-Schritt-Protokoll zur Vorbereitung von gefrorenen Hirngewebeschnitten von Mäusen für nachgelagerte Analysen.

Dieses Video zeigt die Entwicklung eines proinflammatorischen und degenerativen Organkulturmodells für Bandscheibenerkrankungen im Frühstadium (IVD) unter Verwendung von TNF-α. Es wird das Verfahren zur Injektion von TNF-α in die Bandscheibe beschrieben und die Mechanismen erläutert, durch die TNF-α Entzündungen und Abbau der IVD induziert.

Dieses Video zeigt die Dissoziation von gefrorenem Rattenhirngewebe in eine einzellige Suspension durch enzymatische Verdauung und mechanische Verreibung. Die präparierten Zellen werden fixiert und mit Ethanol für nachgelagerte Anwendungen wie Durchflusszytometrie oder Genexpressionsanalyse permeabilisiert.

Das Video zeigt die Analyse des Palmitoylierungszustands von Zellmembranproteinen, die aus Hirngewebe von Mäusen isoliert wurden. Der Prozess beinhaltet das Freilegen der nicht-palmitoylierten Cysteine und deren Blockierung, dann unter Verwendung eines Polymers, das an die palmitoylierten Cysteine bindet, was bei der Beurteilung des Palmitoylierungszustands der isolierten Proteine hilft.

Dieses Video zeigt ein Verfahren zur Herstellung von Polymer-Mikrokügelchen, die neurotoxische Amyloid-beta-sezernierende Zellen verkapseln. Die Zell-Polymer-Suspension wird durch eine Mikrokügelchen-Herstellungsvorrichtung verarbeitet, wobei die Polymergelierung durch Kalziumvernetzung erreicht wird, wodurch kugelförmige Mikrokügelchen um die Zellen herum gebildet werden. Das Polymer ermöglicht die Zellproliferation und ermöglicht gleichzeitig eine kontrollierte, langfristige...

Das Video zeigt ein Schritt-für-Schritt-Verfahren zum symmetrischen Präparieren eines fixierten postmortalen menschlichen Gehirns und bereitet kleinere Gewebeblöcke für die weitere Analyse vor.

Dieses Video zeigt das Verfahren zur Beurteilung der mitochondrialen Kalziumretentionskapazität durch Überwachung von Echtzeitänderungen der Fluoreszenz bei der Kalziumaufnahme der Mitochondrien. Dieser Assay ist nützlich für die Untersuchung der mitochondrialen Funktion und kalziumbezogener Prozesse, einschließlich Apoptose und neurodegenerativer Erkrankungen.

Dieses Video zeigt die Wirkung einer kontinuierlichen Infusion von Medikamenten in das Gehirn von Mäusen auf den Blutzuckerspiegel. Der Glukosestoffwechsel wird beurteilt, indem Blut aus dem Schwanz einer nüchternen Maus entnommen und der Glukosespiegel vor und nach der oralen Glukoseverabreichung gemessen wird. Die Insulintoleranz wird durch Injektion von Insulin in die Maus bewertet, wobei der Glukosespiegel in bestimmten Abständen aufgezeichnet wird.

In diesem Video wird eine anästhesierte Ratte einem Augeneingriff unterzogen, bei dem magnetische Kügelchen unter einem Magnetfeld in die Vorderkammer injiziert werden, um den Iridokornealwinkel zu blockieren. Diese Blockade verstopft das Trabekelwerk, verhindert den Abfluss des Kammerwassers und führt zu einem erhöhten Augeninnendruck, wodurch die Ganglienzellen der Netzhaut und der Sehnerv geschädigt werden. Dabei entwickelt sich ein glaukomähnlicher Zustand.

Quelle: Kummari, E., et. al., Laser Capture Microdissection - Eine Demonstration der Isolierung einzelner Dopamin-Neuronen und des gesamten ventralen tegmentalen Bereichs., J. Vis. Exp. (2015)In diesem Video demonstrieren wir das immunhistochemische Protokoll für Dopamin-Neuronen in Hirngewebeschnitten für die anschließende Laser-Capture-Mikrodissektion.

Quelle: Bennett, S. A., et al., Charakterisierung posttranslationaler Modifikationsveränderungen in neurodegenerativen Proteinopathiemodellen für Hefe. J. Vis. Exp. (2019). Dieses Video zeigt das Verfahren zur Beurteilung von Histonmodifikationen in Hefezellen, die neurodegenerative Proteine überexprimieren. Die Schritte umfassen Zelllyse, Zentrifugation, Elektrophorese, Membrantransfer und antikörperbasierten Nachweis modifizierter Histone.

Quelle: Yan, Z., et al. Bewertung der Anti-Depressions-Wirkung von Xiaoyaosan bei chronisch gestressten Mäusen. J. Vis. Exp. (2019). Das Video zeigt den Prozess der Etablierung eines Mausmodells für chronische stressinduzierte Depressionen und die Bewertung depressiver Verhaltensweisen. Die chronische Anwendung verschiedener Stressoren löst die Freisetzung von Corticosteron aus, was zu einer neuronalen Übererregung und schließlich zum neuronalen Tod führt, was bei den Mäusen zu...

Quelle: Bétemps, D., et al., Nachweis von krankheitsassoziiertem α-Synuclein durch verstärkten ELISA im Gehirn transgener Mäuse, die humanes A53T-mutiertes α-Synuclein überexprimieren. J. Vis. Exp. (2015). Dieses Video zeigt das Verfahren zum Nachweis des neurodegenerativen krankheitsassoziierten Proteins α-Synuclein im Hirngewebe von transgenen Mäusen mittels ELISA. Die Schritte umfassen die Homogenisierung des Gewebes, die Zentrifugation und den ELISA-Nachweis des α-Synuclein-Proteins zur...

Quelle: Wulf, M., et.al. Lasermikrodissektionsbasiertes Protokoll für die LC-MS/MS-Analyse des proteomischen Profils von Neuromelanin-Granula. J. Vis. Exp. (2021). Dieses Video zeigt die Analyse von Peptidproben aus Neuromelanin-Granula (NMGs), die aus menschlichem postmortalem Hirngewebe isoliert wurden. Die Peptide werden zunächst mittels Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC) getrennt und anschließend mittels Massenspektrometrie analysiert, um ihr Masse-Ladungs-Verhältnis (m/z) zu...

Quelle: Zhi, L. et al., Messung der Sauerstoffverbrauchsrate in akuten striatalen Schnitten von erwachsenen Mäusen. J. Vis. Exp. (2022). Dieses Video zeigt, wie die mitochondriale Sauerstoffverbrauchsrate (OCR) in striatalen Hirnschnitten von Mäusen gemessen werden kann. Es beschreibt die Schritte zur Vorbereitung der Gewebeplatte und der Sensorpatrone, zum Laden in den Flussmittelanalysator und erklärt die zellulären Prozesse, die OCR-Mustern zugrunde liegen.

Quelle: Josiah, S. S., et al. Untersuchung der Funktionen und Aktivitäten des neuronalen K-Cl-Co-Transporters KCC2 mittels Western Blotting. J. Vis. exp. (2022). Das Video zeigt die Schritte zum Nachweis und zur Quantifizierung des phosphorylierten Kaliumchlorid-Cotransporter-2-Proteins (KCC2) in einem Zelllysat. Dieser Prozess umfasst Immunpräzipitation, um phosphoryliertes KCC2 zu isolieren, und Chemilumineszenz, um das isolierte Protein zu quantifizieren.

Quelle: Lani-Louzada, R., et al. Vollkreis-Kauterisation des limbalen Gefäßplexus bei chirurgisch induziertem Glaukom bei Nagetieren. J. Vis. exp. (2022). Dieses Video zeigt die Quantifizierung von retinalen Ganglienzellen aus chemisch fixierten Netzhäuten von Ratten, die einer Vollkreiskauterisierung des limbalen Gefäßplexus unterzogen wurden. Der Prozess umfasst die Permeabilisierung, die Antikörperfärbung und die nukleäre Gegenfärbung, gefolgt von der Visualisierung unter einem...

Quelle: Jensen, V. N., et al. Wiederholte Messung der Aktivität und Ventilation der Atemmuskulatur in Mausmodellen für neuromuskuläre Erkrankungen. J. Vis. Exp. (2017). Dieses Video zeigt die Methode zur gleichzeitigen Aufzeichnung von Plethysmographie- und Elektromyographie-Signalen in einem frei beweglichen ALS-Mausmodell. Das Verfahren umfasst die Verwendung von implantierten Elektroden und einem Transmitter, um die Muskelaktivität zu erfassen, sowie eine Plethysmographie-Kammer zur...

Quelle: Jiang, X., et al. Induktion und Evaluierung eines Mausmodells der experimentellen Myopie. J. Vis. Exp. (2019)Dieses Video zeigt ein Verfahren zur Induktion von Kurzsichtigkeit bei einer Maus durch die Installation eines benutzerdefinierten Linsenrahmens. Der Rahmen wird mit Zahnkleber am freiliegenden Schädel befestigt und konkave Linsen werden eingesetzt, um den Brennpunkt hinter die Netzhaut zu verschieben. Diese Anordnung stimuliert die Dehnung des Augapfels, was zu Kurzsichtigkeit...

Quelle: Jolly, S., et.al. Kombination von Doppelfluoreszenz-In-situ-Hybridisierung mit Immunmarkierung zum Nachweis der Expression von drei Genen in Hirnschnitten von Mäusen. J. Vis. Exp. (2016). Dieses Video zeigt die Verwendung von Doppelfluoreszenz-in-situ-Hybridisierung, um die Expression von zwei RNA-Zielen in Hirnschnitten von Mäusen sichtbar zu machen. Das Protokoll umfasst den sequentiellen Nachweis von RNA mit Sonden, die mit Fluoresceinisothiocyanat und Digoxigenin markiert sind,...

Quelle: Baleriola, J., et. al., Nachweis axonal lokalisierter mRNAs in Hirnschnitten mittels hochauflösender In-situ-Hybridisierung. J. Vis. Exp. (2015)Dieses Video zeigt den Nachweis von mRNA in cholinergen Axonen in fixierten Maus-Hippocampus-Schnitten mittels Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung und Antikörperfärbung. Die Fluoreszenzmikroskopie zeigt die räumliche Lokalisierung von sondenmarkierten mRNAs und Cholinacetyltransferase in cholinergen Neuronen.

Quelle: Zhang, J., et al. Hochauflösende quantitative Immungold-Analyse von Membranrezeptoren an retinalen Bandsynapsen. J. Vis. Exp. (2016)Dieses Video zeigt eine elektronenmikroskopische Technik zur Visualisierung der Lokalisierung von Neurotransmitterrezeptoren in retinalen Synapsen. Die Netzhautschnitte enthalten retinale Ganglienzellen, die membrangebundene Neurotransmitterrezeptoren aufweisen und mit der Choleratoxin-Untereinheit B (CTB) markiert sind. Nach der Markierung der Marker mit...

Quelle: de March, C. A. et. al., Echtzeit-In-vitro-Überwachung der Aktivierung des Odorantrezeptors durch einen Odorant in der Dampfphase. J. Vis. Exp. (2019)Dieses Video demonstriert die Methode zur Überwachung der Echtzeitaktivierung von Geruchsrezeptoren in rekombinanten Säugetierzellen mittels Lumineszenzmessung. Die Bindung von Odorierungsstoffen löst die Aktivierung von G-Proteinen und die cAMP-Produktion aus und aktiviert Glosensorproteine, die bei der Substratbindung Lumineszenz abgeben...

Quelle: Alluri, H., et al. Sauerstoff-Glukose-Entzug und Reoxygenierung als In-vitro-Ischämie-Reperfusions-Verletzungsmodell zur Untersuchung der Blut-Hirn-Schranken-Dysfunktion. J. Vis. Exp. (2015). Das Video zeigt die fluoreszierende Lokalisierung von Tight-Junction-Proteinen und Stressfasern in mikrovaskulären Endothelzellen (RBMECs) des Rattengehirns. In der gestressten Monoschicht werden fluoreszenzmarkierte Antikörper verwendet, um die Tight-Junction-Proteine zu markieren, während...

Quelle: Eid, L. & Parent, M. Vorbereitung von nicht-menschlichem Primaten-Hirngewebe für die Immunhistochemie und Elektronenmikroskopie vor der Einbettung. J. Vis. Exp. (2017). Dieses Video zeigt die Präparation von aldehydfixiertem Hirngewebe von nicht-menschlichen Primaten mittels Pre-Embedding-Immunhistochemie für die Elektronenmikroskopie. Es werden die Schritte zur Immunmarkierung eines bestimmten neuronalen Proteins beschrieben, gefolgt von einer Peroxidasereaktion, die einen farbigen...

Quelle: Evilsizor, M. N., et. al., Primer für Immunhistochemie an kryogeschnittenem Hirngewebe von Ratten: Beispielfärbung für Mikroglia und Neuronen. J. Vis. Exp. (2015)Dieses Video zeigt ein schrittweises immunhistochemisches Färbeverfahren an kryosektioniertem Hirngewebe von Ratten, um die räumliche Anordnung von Mikroglia und Neuronen zu visualisieren.

Quelle: Kirchner, K.N., et al., Eine hydrophobe Gewebereinigungsmethode für Hirngewebe von Ratten. J. Vis. Exp. (2020). Dieses Video zeigt die Methode der hydrophoben Gewebereinigung einer Gewebeprobe des Rattenhirns. Die Probe wird sequentiell in Methanol dehydriert, mit einem Dichlormethan-Methanol-Gemisch behandelt, um Lipide und Pigmente aufzulösen, und zur vollständigen Gewebereinigung auf Dibenzylether übertragen, was eine detaillierte Bildgebung ohne Dünnschnitte ermöglicht.

Um diese Bakterien nachzuweisen, wird ein entparaffinisierter, rehydrierter, bakterieninfizierter menschlicher Gehirnschnitt mit exponierten Proteinantigenen und inaktivierter endogener Phosphatase entnommen.

Das Virus infiziert pyramidale Neuronen in der Großhirnrinde, und exprimierte virale Proteine lokalisieren sich in intrazytoplasmatischen granularen Strukturen, die als Einschlusskörper bekannt sind.

Waschen Sie, um das Paraffin zu entfernen, und rehydrieren Sie dann das Gewebe mit abnehmenden Alkoholkonzentrationen.

Dieses Video zeigt die Isolierung von Zelloberflächen- und intrazellulären Proteinen aus einer Astrozytenkultur. Die Astrozytenkultur wird auf Eis gelegt, um die Endozytose zu hemmen, und dann werden die Proteine auf der Zelloberfläche mit einem Biotinylierungsreagenz markiert. Die Zellen werden lysiert, um die biotinylierten Zelloberflächenproteine und nicht-biotinylierten intrazellulären Proteine freizusetzen. Schließlich werden Streptavidin-beschichtete Kügelchen verwendet, um die...

Dieses Video zeigt den intrazerebroventrikulären Injektionsprozess zur Untersuchung der Verteilung des murinen Cytomegalievirus (MCMV) im Gehirn von Neugeborenen. MCMV, das entwickelt wurde, um ein verstärktes grün fluoreszierendes Protein (EGFP) für die Sichtbarkeit zu exprimieren, wird in den lateralen Ventrikel des Gehirns eines Mäusewelpen injiziert. Das injizierte Virus zirkuliert durch die Zerebrospinalflüssigkeit und infiziert Zellen im periventrikulären Bereich, einschließlich der...

Dieses Video zeigt die Etablierung eines in vitro Modells für Zika-Virusinfektionen in einem sich entwickelnden Gehirn. Menschliche zerebrale Organoide, die Rosetten von Stammzellen, neuralen Vorläuferzellen (NPCs) und Neuronen enthalten, sind mit dem Zika-Virus infiziert. Das Virus infiziert NPCs und löst Apoptose aus, wodurch die Entwicklung von Organoiden gestört wird.

Das Video zeigt die Mikroinjektion von Lipopolysacchariden (LPS) in das Gehirn von Zebrafischlarven, um Neuroinflammation zu induzieren. Die Larven werden auf eine mit Agarose ausgekleidete Schale gelegt, die Nadel wird in die Hirnventrikel eingeführt und das LPS injiziert. Das injizierte LPS löst eine Immunantwort aus, die zu Neuroinflammation führt.

Dieses Video zeigt die Bewertung der mitochondrialen Gesundheit in genetisch veränderten Astrozyten, die ein fluoreszierendes Protein in ihren Mitochondrien exprimieren. Das Protein hilft dabei, Veränderungen der mitochondrialen Gesundheit zu verfolgen, da seine Fluoreszenz von grün zu rot wechselt, was auf Stress oder Schäden hinweist. Die Bilder werden anhand verschiedener Parameter erfasst und analysiert.

Dieses Video zeigt das Verfahren zur Injektion chimärer HIV-Viren in die Hirnrinde einer Ratte, wo sich die Virus-RNA in das Wirtsgenom integriert, repliziert und ausbreitet, um eine aktive HIV-Infektion im experimentellen Modell zu etablieren.

Dieses Video zeigt die Generierung eines Mausmodells mit einer ZNS-Infektion. Einem säugenden Welpen wird das Virus sowohl intrakraniell als auch intraperitoneal injiziert. Das Virus breitet sich aus, infiziert das ZNS und verursacht neuronalen Zelltod und Entzündungen. Der Welpe wird im Verlauf der Krankheit auf Symptome einer Infektion untersucht.

Dieses Video zeigt die Erzeugung von Neuroinflammation in einem Mausmodell. Eine betäubte Maus mit Mikrowunden wird entnommen und ein Inokulum mit Pseudotollwutvirus (PRV) auf die Wunden aufgebracht. Das Virus infiziert die peripheren Nerven, breitet sich auf die Spinalganglien (DRG) aus und infiziert weiter das Rückenmark und das Gehirn. Eine Infektion von Neuronen im Nervensystem führt zu einer Immunreaktion, die neuronale Schäden hervorruft, die zu Neuroinflammation führen.

Das Video zeigt die intrazerebrale Injektion von Zika-Virussuspension in eine erwachsene Maus, um Neurodegeneration zu induzieren. Eine anästhesierte Maus wird in einem stereotaktischen Rahmen gesichert und ein Loch in den freiliegenden Schädel gebohrt, das zur Injektion verwendet wird. Eine Suspension des Zika-Virus wird in das Hirngewebe injiziert. Die Virusinfektion verursacht Entzündungen, die zu Neurodegeneration führen.

Dieses Video zeigt die Quantifizierung der infektiösen Bakterienlast aus dem perfundierten Mäusegehirn, das mit Listeria monocytogenes infiziert ist.

Dieses Video demonstriert eine Methode zur Untersuchung der Permeation durch ein in vitro Blut-Hirn-Schranken-Modell (BHS) unter Verwendung von Astrozyten und Endothelzellen auf einem Membraneinsatz, mit freiem FITC und FITC-beladenem Ferritin. FITC-Ferritin band an Rezeptoren auf Endothelzellen und überquerte die Membranbarriere zur unteren Kammer, während freies FITC eine eingeschränkte Permeation zeigte und in der oberen Kammer verblieb.

Dieses Video zeigt ein Verfahren zur Infektion menschlicher fetaler neuraler Stammzellen mit dem Zika-Virus. Die infizierten Zellen können für weitere Studien verwendet werden.

Dieses Video zeigt ein In-vitro-Modell zur Untersuchung von Krankheitserregern, die die Blut-Hirn-Schranke (BHS) überwinden. Mikrovaskuläre Endothelzellen, die Tight Junctions exprimieren, bilden eine Endothelschicht in der oberen Kammer, während Neuronen, Astrozyten und Mikroglia das Hirnparenchym in der unteren Kammer darstellen, das durch eine poröse Membran getrennt ist. Die Virusinfektion im BHS-Modell ahmt den Erreger nach, der vom Blut ins Gehirn gelangt. Bei der Einführung eines...

Quelle: Funes, S., et. al., Humane Mikroglia-ähnliche Zellen: Differenzierung von induzierten pluripotenten Stammzellen und In-vitro-Lebendzell-Phagozytose-Assay unter Verwendung humaner Synaptosomen. J. Vis. Exp. (2022)Dieses Video zeigt einen Assay zur Untersuchung der phagozytischen Kapazität von Mikroglia-ähnlichen Zellen unter Verwendung von pH-empfindlichen Fluoreszenzfarbstoff-markierten Synaptosomen.

Tauchen Sie das Gewebe in Xylol, um das Paraffin aufzulösen.

Injizieren Sie intravenös Fluorophor-markiertes Albumin, das die geschädigte BHS durchquert und das Gehirn erreicht.

Das Gewebe weist Amyloidfibrillen und krankhafte Proteinaggregate in den Hirngefäßwänden auf, die Schlüsselindikatoren für neurologische Erkrankungen sind.

MCCH zeichnet sich durch eine verminderte Durchblutung des Gehirns aus. Dadurch wird die Sauerstoff- und Nährstoffversorgung der Endothelzellschicht der zerebralen Blutgefäße eingeschränkt und die Zellen geschädigt.

Suspendieren Sie das Zellgemisch in einer extrazellulären Matrix oder EZM-Lösung.

Machen Sie einen Halsschnitt, um die beidseitigen Arteria carotis communis freizulegen und locker zu ligieren.

Dieses Video zeigt die Methode zur Induktion einer experimentellen autoimmunen Enzephalomyelitis (EAE) durch Injektion von Myelin-abgeleiteten Peptiden mit einem Adjuvans, um autoreaktive T-Zellen zu aktivieren, die ins Gehirn wandern. Pertussis-Toxin wird verabreicht, um die Durchlässigkeit der Blut-Hirn-Schranke zu erhöhen, so dass diese T-Zellen und andere Immunzellen in das Gehirn eindringen können. Diese Immunzellen verursachen eine Demyelinisierung, die zu einer gestörten...

Dieses Video zeigt ein Verfahren zur Beurteilung der Störung der Blut-Hirn-Schranke in einem EAE-Mausmodell. Fluoreszierende Farbstoffe unterschiedlicher Größe werden retroorbital injiziert und zirkulieren durch die Blutgefäße des Gehirns. Der kleinere Farbstoff dringt durch Lücken in das Hirngewebe ein, während der größere Farbstoff nur dann eintritt, wenn die Störung schwerwiegend ist, was mit dem Ausmaß der Barriereschädigung korreliert.

Dieses Video zeigt ein Verfahren zur Induktion von Gewebeschäden oder Infarkten in den Pons einer anästhesierten Ratte mittels elektrischer Stimulation.

In diesem Video werden befruchtete Zebrafischembryonen unter einem Stereomikroskop dechorioniert und dann einem Cholesterinsynthesehemmer ausgesetzt, was zur Entwicklung von Blutgefäßrissen und Hirnblutungen in den Larven führt. Hämorrhagische Larven, die an deutlichen roten Flecken zu erkennen sind, werden anschließend zur weiteren Analyse unter einem Mikroskop getrennt.

Dieses Video zeigt den Prozess der Induktion von Störungen der Blut-Hirn-Schranke (BHS) und zerebralen Mikroblutungen in einem Rattenmodell unter Verwendung von Lipopolysaccharid (LPS). Es zeigt die Abfolge von Immunantworten, die zu einer erhöhten BHS-Permeabilität und einer anschließenden Schädigung des Hirngewebes führen.

Dieses Video zeigt einen Assay zum Nachweis von zerebralen Mikroblutungen (CMHs) in einem Rattenmodell. CMHs sind Hirnblutungen aufgrund einer Störung der Blut-Hirn-Schranke, die durch ausgelaufene rote Blutkörperchen (RBCs) gekennzeichnet sind. In einem Rattenmodell wird fixiertes Hirngewebe kryogeschützt, geschnitten und mit Hämatoxylin-Eosin für Erythrozyten gefärbt, was eine mikroskopische Visualisierung von CMHs ermöglicht. Ausgetretene Erythrozyten erscheinen unter dem Mikroskop...

Das Video zeigt das Verfahren zur Erstellung eines Mausmodells zur Untersuchung von hypoxisch-ischämischen Hirnverletzungen bei Neugeborenen. Es beschreibt die Schritte zur chirurgischen Induktion einer Ischämie und zur Unterwerfung des Tieres unter Hypoxie, um die Hirnschädigung zu verschlimmern. Schließlich wird gezeigt, wie die resultierenden Hirnläsionen beurteilt werden können, um sicherzustellen, dass das Mausmodell für weitere wissenschaftliche Untersuchungen vorbereitet wird.

Dieses Video zeigt, wie man den extrazellulären Raum in einem Gehirnschnitt charakterisiert, indem ionenselektive und Iontophorese-Mikroelektroden verwendet werden, um elektrische Signale zu messen und zu vergleichen. Dieser Prozess hilft bei der Bestimmung des Volumenanteils und des Verdrillungsgrades des Raums.

In diesem Video wird ein mit Glutamatoxidase beschichtetes Multielektrodenarray (MEA) in das Hirngewebe einer anästhesierten Maus implantiert. Die Glutamatlösung wird in den extrazellulären Raum injiziert, wo das MEA den Glutamatspiegel detektiert, was eine Echtzeitüberwachung der Glutamataufnahme durch die Astrozyten ermöglicht.

In diesem Video wird ein genetisch veränderter Mauswelpe, der das Ccm2-Gen trägt, flankiert von loxP-Stellen und Cre-Rekombinase, die an einen Östrogenrezeptor fusioniert ist, verwendet, um zerebrale kavernöse Malformationen (CCMs) zu induzieren. Die Verabreichung von 4-Hydroxytamoxifen aktiviert Cre in Endothelzellen, was zur Deletion von Ccm2 und zur Bildung von CCMs im Gehirn führt.

Dieses Video demonstriert das Verfahren zur Isolierung von Gehirnzellen und infiltrierten Immunzellen aus ischämischem Gehirngewebe von Mäusen durch enzymatische Verdauung, gefolgt von der Entfernung von Zelltrümmern und Myelin durch Dichtegradientenzentrifugation, um Entzündungsreaktionen in der Schlaganfallforschung zu untersuchen.

Das Video zeigt die Induktion von Subarachnoidalblutungen durch endovaskuläre Perforation in einem Mausmodell. Bei der anästhesierten Maus wird ein Schnitt in der Halsregion gemacht, um Zugang zur Arteria carotis communis und ihrer Bifurkation zu erhalten. Ein Filament wird durch die Arterien eingeführt, um einen intrakraniellen Arterienast zu perforieren und eine Subarachnoidalblutung auszulösen.

Dieses Video zeigt eine Methode zur Erstellung eines Rattenmodells für intraventrikuläre Blutungen bei Neugeborenen. Bei diesem Verfahren wird einem anästhesierten Rattenwelpen Hämoglobin in die Seitenkammer des Gehirns injiziert. Das Hämoglobin verursacht oxidativen Stress und setzt Häm frei, wodurch eine intraventrikuläre Blutung simuliert wird. Die daraus resultierende Schädigung des Hirngewebes, die durch reaktive Sauerstoffspezies und entzündliche Zytokine verursacht wird, führt zu einer...

Dieses Video zeigt das Verfahren der Durchführung eines permanenten distalen Verschlusses der mittleren Hirnarterie (MCAO) mit der Arteria carotis communis (CCA) bei gealterten Ratten, um einen ischämischen Schlaganfall zu modellieren. Dies blockiert den Blutfluss zum Gehirn, was zum neuronalen Tod führt und ein Modell zur Untersuchung von Schlaganfallmechanismen und möglichen Behandlungen erstellt.

Dieses Video zeigt das Verfahren zur Etablierung eines Rattenmodells für Subarachnoidalblutungen. Einer anästhesierten Ratte werden Sonden implantiert, um den Hirndruck und den zerebralen Blutfluss zu messen. Die Zielstelle wird identifiziert und die Nadel in einer prä-chiasmatischen Position eingeführt. Anschließend wird autologe Blut in den Subarachnoidalraum injiziert, wodurch der Hirndruck erhöht und der zerebrale Blutfluss verringert wird, wodurch das Modell etabliert wird.

Dieses Video zeigt eine experimentelle Untersuchung der Lymphozytentransmigration über ein Blut-Hirn-Schranke (BHS)-Endothelmodell. In vitro wird eine Monoschicht aus mikrovaskulären Endothelzellen (HBMECs) des menschlichen Gehirns erzeugt, und mononukleäre Zellen des peripheren Blutes (PBMCs), die Lymphozyten enthalten, werden der Monoschicht hinzugefügt. Die Zellen werden dann inkubiert, um eine Lymphozytentransmigration zu ermöglichen, und die migrierten Zellen werden mittels...

Dieses Video zeigt die Beurteilung der Infarktzone und des Hirnödems in Hirnschnitten von Ratten, die einem Verschluss der mittleren Hirnarterie ausgesetzt waren. Die Identifizierung von Infarktgebieten erfolgt mittels Redoxfärbung, während ein Blaufilter und eine Schwellenwertfunktion in der Bildanalysesoftware die Infarktzone und das Ödem in der betroffenen Hemisphäre quantifizieren.

Dieses Video zeigt eine Methode zur Bestimmung des transendothelialen elektrischen Widerstands (TEER) in mikrovaskulären Endothelzellen des Mausgehirns in vitro. Ein hoher TEER-Wert deutet auf intakte Endothelzellverbindungen hin, während die Zugabe von aktivierten T-Zellen den TEER-Wert senkt, was eine Störung der Verbindungsbarriere widerspiegelt.

Dieses Video zeigt ein Verfahren zur sympathischen Denervierung der Nierenarterie in einem Angiotensin-II-induzierten hypertensiven Mausmodell, bei dem Phenol verwendet wird, um die Funktion des sympathischen Nerven zu stören und den Blutdruck zu senken.

Dieses Video zeigt den Prozess der Induktion eines ischämischen Schlaganfalls in einem Rattenmodell durch Verschluss der mittleren Hirnarterie (MCA) mit einem Gewindebolzen. Das Verfahren beinhaltet die Liligation der Halsschlagadern, das Einführen eines Gewindebolzens in die äußere Halsschlagader und das Blockieren des Blutflusses von der MCA zum Gehirn, was zum neuronalen Tod führt und einen ischämischen Schlaganfall nachahmt.

Dieses Video zeigt das Verfahren zur Replikation eines thrombotischen Schlaganfalls in einem Mausmodell, indem die rechte Arteria carotis communis blockiert und die Maus einer sauerstoffarmen Umgebung ausgesetzt wird. Dieser Prozess reduziert den Blut- und Sauerstofffluss zum Gehirn, was zur Bildung von Blutgerinnseln und Hirnschäden führt.

Dieses Video zeigt die präzise Technik zur Induktion eines Schlaganfalls der weißen Substanz bei einer anästhesierten Maus durch Injektion eines Stickstoffmonoxid-Inhibitors an bestimmten Gehirnkoordinaten innerhalb der weißen Substanz. Dies führt zu einer Verengung der Blutgefäße und einer Hemmung der Blutversorgung, was zu neuronalen Schäden und einem Hirnschlag führt.

Quelle: Wanderer, S., et al. Arterieller Pouch Mikrochirurgisches Bifurkations-Aneurysma-Modell beim Kaninchen. J. Vis. Exp. (2020)Dieses Video zeigt die Erstellung eines experimentellen Aneurysmamodells bei einem Kaninchen unter Verwendung eines mit Elastase behandelten Gefäßbeutels. Nach der Entfernung eines Segments des rechten CCA wird der Beutel mit Elastase behandelt und dann mit dem linken CCA vernäht, um den Blutfluss wiederherzustellen. Die dadurch entstehende Belastung der...

Quelle: Sharma, T. P., et al., Translaminares autonomes Systemmodell für die Modulation des intraokularen und intrakraniellen Drucks in den hinteren Segmenten menschlicher Spender. J. Vis. Exp. (2020). Dieses Video zeigt das Verfahren zur Vorbereitung eines menschlichen Auges zur Untersuchung der Auswirkungen des translaminaren Drucks auf die Signalübertragung von retinalen Ganglienzellen durch Simulation des intraokularen und intrakraniellen Drucks in einem translaminaren autonomen System.

Quelle: Lani-Louzada, R., et al., Full-Circle Cauterization of Limbal Vascular Plexus for Surgically Induced Glaucoma in Nagetiers. J. Vis. Exp. (2022)Dieses Video zeigt die Induktion und Überwachung eines erhöhten Augeninnendrucks (IOD) in einem Rattenmodell. Bei diesem Verfahren werden die limbalen Blutgefäße kauterisiert, was zu einem Gefäßverschluss und einem erhöhten Augeninnendruck führt. Die Ratte kann sich dann erholen, und der Augeninnendruck wird zum Vergleich sowohl in den...

Quelle: Jungen, C., et al. Einfluss intrakardialer Neuronen auf die kardiale Elektrophysiologie und Arrhythmogenese in einem ex vivo Langendorff-System. J. Vis. exp. (2018). Das Video zeigt eine ex vivo-Technik zur Stimulation des intrakardialen Nervensystems, um die Anfälligkeit des Herzens für Herzrhythmusstörungen zu beurteilen. Mit Hilfe eines Perfusionsapparaturs wird ein isoliertes Mausherz mit einem sauerstoffhaltigen Puffer perfundiert. Das intrakardiale Nervensystem wird dann mit hoher...

Quelle: Hakim, M. A. et al., Isolierung und funktionelle Analyse des arteriolären Endothels des Maus-Hirn-Parenchyms. J. Vis. Exp. (2022). Dieses Video zeigt die funktionelle Analyse einer arteriolären Endothelröhre, die aus einem Mausgehirn isoliert wurde. Es werden die Schritte zur Messung des intrazellulären Kalziumspiegels und des Membranpotentials sowohl zu Studienbeginn als auch als Reaktion auf pharmakologische Stimulation beschrieben.

Quelle: Tang, X. et. al., Massive pontine Blutung durch doppelte Injektion von autologem Blut. J. Vis. Exp. (2021)Dieses Protokoll beschreibt die kontrollierte Infusion von autologem Blut in die pontine Region des Gehirns einer Ratte, um eine massive pontine Blutung zu modellieren. Der Zweck besteht darin, eine lokalisierte Gehirnblutung zu simulieren, indem der lokale Druck erhöht wird.

Quelle: Alluri, H., et.al. Sauerstoff-Glukose-Entzug und Reoxygenierung als In vitro Ischämie-Reperfusions-Verletzungsmodell zur Untersuchung der Blut-Hirn-Schranken-Dysfunktion. J. Vis. Exp. (2015). Das Video zeigt die Auswirkungen von Sauerstoff-Glukose-Entzug und anschließender Reoxygenierung auf mikrovaskuläre Endothelzellen (RBMECs) des Rattengehirns, indem hypoxische und nährstoffarme Bedingungen simuliert werden. Diese Bedingungen führen zu einer ATP-Depletion, einem erhöhten...

Quelle: Gucciardo, E., et. al., Ein Ex-vivo-Gewebekulturmodell für fibrovaskuläre Komplikationen bei proliferativer diabetischer Retinopathie. (2019)Dieses Video beschreibt ein Immunfärbeprotokoll für ex vivo-Kulturen von fibrovaskulärem Gewebe, das in Fibringel eingebettet ist. Dies ermöglicht eine detaillierte Visualisierung von Gefäßveränderungen, die mit der proliferativen diabetischen Retinopathie...

Quelle: Talley Watts, L., et al. Rose Bengal Photothrombose durch konfokale optische Bildgebung In vivo: Ein Modell des Schlaganfalls mit einem Gefäß. J. Vis. Exp. (2015)Dieses Video zeigt eine Technik, um die Bildung von Blutgerinnseln in einem Mäusegehirn zu induzieren. Eine anästhesierte Maus mit einem Schädelfenster und einem ausgedünnten Schädel erleidet eine Photothrombose durch die Aktivierung eines lichtempfindlichen Farbstoffs unter Verwendung von hochintensivem Licht. Dieser Prozess...

Quelle: Kuts, R. et al. Laserinduzierte Hirnverletzung im motorischen Kortex von Ratten. J. Vis. Exp. (2020)Dieses Video zeigt die Beurteilung der Integrität der Blut-Hirn-Schranke (BHS) nach einer laserinduzierten Hirnverletzung bei Ratten. Ein Tracking-Farbstoff wird in die Schwanzvene injiziert, so dass er zum Gehirn zirkulieren und durch die geschädigte BHS in das Gewebe gelangen kann. Das Gehirn wird dann extrahiert und verarbeitet, um den Farbstoff freizusetzen. Die Fluoreszenzintensität...

Astrozyten sezernieren Signalmoleküle, die die Reifung und Differenzierung von Stammzellen zu Neuronen und Astrozyten fördern.

Dieses Video zeigt eine Methode, um die Migration von Interneuronen als Reaktion auf chemoattraktive Signale von periventrikulären Endothelzellen (PVECs) zu testen. Die Interneurone befinden sich in einem zentralen Kompartiment, mit PVECs und Kontrollzellen auf beiden Seiten. Eine erhöhte Migration in Richtung PVECs deutet auf eine positive Reaktion auf ihre chemoattraktiven Signale hin.

Dieses Video zeigt die Immunfluoreszenzfärbung von Kleinhirn-Organoidschnitten, um spezifische Zielantigene zu identifizieren, die in verschiedenen Kleinhirnneuronen exprimiert werden und auf die Reifung von Organoiden hinweisen.

Dieses Video zeigt die Methode zur Identifizierung von Neuronen aus einer Mischkultur aus Kleinhirn-Körnerneuronen und Gliazellen unter Verwendung der dualen Färbung mit Fluoresceindiacetat (FDA) und Propidiumiodid (PI), wobei lebende Neuronen grün und tote Neuronen rot erscheinen.

Dieses Video zeigt ein detailliertes Immunfärbeprotokoll zur Visualisierung phänotypischer Defekte in den Pilzkörpern mutierter Drosophila-Gehirne. Das Protokoll beinhaltet die Verwendung von Antikörpern gegen Fas2, ein Protein, das an der axonalen Führung beteiligt ist und die richtige morphologische und funktionelle Entwicklung des Pilzkörpers erleichtert.

Dieses Video zeigt das Verfahren zum Färben neu proliferierter neuraler Stammzellen in Hirngewebeschnitten mittels EdU-Inkorporation, gefolgt von Immunfluoreszenz zur Visualisierung spezifischer Proteine, was das Verständnis der Zelldynamik und -proliferation verbessert.

Dieses Video zeigt die Immunfluoreszenzfärbung von Kryoschnitten aus embryonalem kraniofazialem Gewebe der Maus, wobei die Fluoreszenzmikroskopie verwendet wird, um die Expression von Kernmarkern zu beurteilen und die Zellproliferation und Signalaktivität zu bestimmen.

Dieses Video zeigt, wie neuronale Vesikel mit spezifischen fluoreszierenden Proteinen markiert werden, um ihre Bewegung zu visualisieren. Zuerst wird ein Plasmid, das für ein fluoreszierendes Protein kodiert, mit einem Transfektionsmittel inkubiert und dann in eine Kultur von Neuronen eingeführt. Anschließend werden Bilder der Neuronen aufgenommen und analysiert, um die Bewegung der Vesikel zu verfolgen.

Dieses Video zeigt die Messung der Retinsäure (RA)-Sekretion aus Neurosphärenzellen mit Hilfe von RA-Reporterzellen. Es werden die Schritte beschrieben, die bei der Co-Kultivierung von Neurosphärenzellen mit RA-Reporterzellen und der Durchführung eines kolorimetrischen RA-Assays zur Messung des RA-Spiegels erforderlich sind.

Dieses Video zeigt die Immunfärbung des embryonalen murinen Magen-Darm-Trakts, um die Verteilung der neuronalen Population mittels Immunfluoreszenz und konfokaler Mikroskopie zu visualisieren und zu analysieren.

Dieses Video zeigt die virale Markierung und Transplantation von Zellen der medialen ganglionären Eminenz (MGE) für in vivo-Studien. Es beschreibt die Schritte, die bei der Transduzierung von MGE-Zellen mit einem viralen Reporter, der Transplantation dieser transduzierten Zellen in den Kortex eines Maus-Welpen und der Ermöglichung der Reporterexpression in bestimmten Interneuronen-Subtypen erforderlich sind.

Dieses Video zeigt die Isolierung von Oxytocin-Rezeptor-reichen Kernen aus dem Gehirn von neonatalen Ratten. Das koronale Schneiden, gefolgt von der Identifizierung und präzisen Stanzung von Oxytocin-Rezeptor-reichen Hirnkernen, ermöglicht die effektive Extraktion von Oxytocin-Rezeptor-reichen Kernen für die weitere Analyse.

Quelle: Pericoli, G. et. al., Lebend-3D-Zell-Immunzytochemie-Assays des pädiatrischen diffusen Mittellinienglioms. J. Vis. Exp. (2021)Dieses Video zeigt die Live-Zellbildgebung zur Beobachtung der Migration von pädiatrischen diffusen Mittelliniengliomzellen mittels immunhistochemischer Markierung mit Anti-CD44-Antikörpern.

Quelle: Jantzie, L. L., et. al. Modellierung der Frühgeborenen-Enzephalopathie unter Verwendung der pränatalen Hypoxie-Ischämie mit intraamniotischem Lipopolysaccharid bei Ratten. J. Vis. Exp. (2015)Dieses Video zeigt ein Protokoll zur Induktion hypoxisch-ischämischer und entzündlicher Zustände bei fötalen Ratten durch Einschränkung des uterinen Blutflusses und Injektion von LPS, Modellierung von Neuroinflammation und gestörter Gehirnentwicklung, die für Frühgeburtenstudien relevant sind.

Quelle: Larpthaveesarp, A., et. al. Transientes Modell des Verschlusses der mittleren Hirnarterie des neonatalen Schlaganfalls bei P10-Ratten. J. Vis. exp. (2017)Dieses Video zeigt die Etablierung des Modells des Verschlusses der mittleren Hirnarterie bei einem Rattenwelpen. Die Arteria carotis interna (ICA) wird freigelegt und eine Ligatur wird gesichert, um den Blutfluss zu begrenzen. Durch die ICA wird ein Verschluss eingeführt, um die Arteria cebraralis media zu erreichen. Der Welpe darf...

Die Krankheit löst autoreaktive Immunzellen aus, die Myelinproteine angreifen und die Myelinscheide, die die neuronalen Axone umgibt, abbauen.

Die Kontrollsektion zeigt Axone mit dicht gepackten Myelinscheiden, die konzentrische Plasmamembranschichten enthalten. Der verletzte Abschnitt weist ein dekompaktiertes Myelin mit großen Lücken auf.

Stress beeinträchtigt die Funktion der Oligodendrozyten und stört die lipidreiche Myelinscheide, die die neuronalen Axone im medialen präfrontalen Kortex, einer Gehirnregion, die Emotionen reguliert, umgibt.

Dieses Video zeigt die Immunpräzipitation von DNA-Fragmenten, die mit Zielprotein aus Stammzell-abgeleiteten Motoneuronen-Lysaten vernetzt sind, unter Verwendung von Zielprotein-spezifischen Antikörper-beschichteten Magnetbeads.

Dieses Video zeigt ein Protokoll zur Beurteilung der strukturellen Integrität neuromuskulärer Verbindungen in den dorsalen Längsmuskeln von Drosophila. Bei dem Verfahren werden Neuronen und Muskeln mit zwei unterschiedlichen Antikörpern gefärbt und die Fluoreszenzmuster zwischen mutierten und Wildtyp-Fliegen verglichen. Eine Verringerung der neuronalen Färbung bei mutierten Fliegen deutet auf eine Neurodegeneration hin, während die Muskelstruktur intakt bleibt.

Dieses Video demonstriert die Bewertung der neurodegenerativen Wirkungen einer Testchemikalie auf Caenorhabditis elegans mit fluoreszenzmarkierten Neuronen. Normale Neuronen zeigen eine helle Fluoreszenz von intakten Somas und Fortsätzen, während verminderte Fluoreszenz, geschwollenes Soma und punktuelle Fortsätze auf Neurodegeneration hinweisen.

Dieses Video zeigt eine Methode zur Etablierung eines Small-Fiber-Neuropathiemodells bei Mäusen unter Verwendung des TRPV1-Agonisten Resiniferatoxin (RTX). Es beschreibt die Schritte bei der Verabreichung von RTX an Mäuse und erklärt, wie RTX den neuronalen Tod in sensorischen Neuronen mit kleinem Durchmesser induziert und damit das Neuropathiemodell etabliert.

In diesem Video wird ein Mausmodell für Multiple Sklerose mit Hilfe der experimentellen autoimmunen Enzephalomyelitis (EAE) erstellt. Der Maus wird eine Emulsion injiziert, die ein neuronales Peptid und ein Adjuvans enthält, wodurch eine Immunantwort ausgelöst wird, die autoreaktive T-Zellen aktiviert. Darauf folgt eine Injektion von Pertussis-Toxin (PTX), um die Durchlässigkeit der Blut-Hirn-Schranke zu erhöhen, so dass die autoreaktiven T-Zellen das Gehirn infiltrieren können. Diese...

Dieses Video zeigt das Verfahren zur Induktion von Lähmungen durch Übertragung von aktivierten Th17-Zellen, die auf Aquaporin-4 abzielen, in ein Mausmodell. Im zentralen Nervensystem interagieren die aktivierten Th17-Zellen mit Aquaporin-4-exprimierenden Astrozyten und lösen eine Immunantwort aus, die bei der Maus zu einer Lähmung von Schwanz und Gliedmaßen führt.

Dieses Video zeigt den Prozess der Beurteilung der motorischen Dysfunktion in einem Mausmodell durch die Verabreichung von Pertussis-Toxin und einem Inokulum, das Myelin-imitierende Peptide und Adjuvantien enthält, gefolgt von Laufbandtests, um die motorische Funktion zu beurteilen und die daraus resultierenden Nervenschäden aufgrund von Immunaktivierung und Demyelinisierung zu bewerten.

Dieses Video zeigt den Treppentest zur Beurteilung der motorischen Funktion bei einer Hemiparkinson-Ratte mit einer Läsion der rechten Gehirnhälfte. Die Läsion stört die Dopamin-Signalübertragung und beeinträchtigt die Kontrolle der linken Pfote, was dazu führt, dass mehr Kügelchen auf der linken Treppe verbleiben, was auf eine motorische Dysfunktion hinweist.

Dieses Video zeigt die Verwendung eines radialen Lokomotionsassays zur Bewertung der motorischen Dysfunktion in C. elegans, die entweder Wildtyp- oder ALS-mutiertes humanes TDP-43-Protein exprimieren. Würmer mit unterschiedlicher Wildtyp- oder mutierter TDP-43-Expression werden kriechen gelassen, und ihre Bewegung wird anhand der radialen Strecke gemessen, die vom zentralen Punkt auf der Assay-Platte zurückgelegt wird. Der Assay unterscheidet zwischen leichten, mittelschweren und schweren...

Dieses Video zeigt die Beurteilung des Muskels mit kultivierten Motoneuronen, Schwann-Zellen und Myotuben, gefolgt von einer Behandlung mit einem neuromuskulären Blocker zur Hemmung der Kontraktion. Farbcodierte Zeit-Bewegungs-Grafiken zeigen eine farbcodierte Zeit-Bewegungs-Grafik. Rot steht für die schnellste Bewegung und Blau für die langsamste.

Dieses Video demonstriert die Visualisierung von Protein-Protein-Wechselwirkungen an der neuromuskulären Verbindung (NMJ) von Drosophila mit Hilfe des Proximity Ligation Assay (PLA). Nach der Isolierung der Körperwände werden interagierende Proteine mit Primärantikörpern und PLA-konjugierten Sekundärantikörpern untersucht. Die Nähe der interagierenden Proteine erleichtert die Ligation von Sonden mit Konnektor-Oligonukleotiden, wodurch zirkuläre DNA gebildet wird, die dann durch...

Quelle: Wagner, K. et al., Untersuchung des Membranproteintransports in Drosophila-Photorezeptorzellen unter Verwendung von eGFP-markierten Proteinen. J. Vis. exp. (2022). Dieses Video zeigt die Visualisierung des Membranproteintransports in Drosophila-Photorezeptorzellen unter Verwendung von eGFP-markierten TRPL-Proteinen. Es beschreibt die Vorbereitung transgener Fliegen für die Bildgebung, die Aufnahme von Fluoreszenzbildern von Photorezeptorzellen und die Quantifizierung des TRPL-Transports...

Quelle: Deseure, K., et al. Chronic Constriction Injury of the Rat's Infraorbital Nerv (IoN-CCI) zur Untersuchung von trigeminalen neuropathischen Schmerzen. J. Vis. Exp. (2015). Dieses Video zeigt eine Methode zur Induktion von neuropathischen Schmerzen in einem Rattenmodell durch Verengung des Nervus infraorbitalis. Nach dem Freilegen des Nervus infraorbitalis und dem Binden von Ligaturen, um ihn zu verengen, erhöht die Immunantwort an der Verletzungsstelle die Erregbarkeit benachbarter...

Quelle: Brakkee, E. M., et al. Chirurgie und Verhaltenstests im Tibianeurom-Transpositionsmodell bei Ratten. J. Vis. Exp. (2023). Dieses Video zeigt ein Verfahren zur Generierung eines TNT-Modells (Tibianeurinom-Transposition) der Ratte. Nachdem der Nervus tibialis im Hinterbein einer anästhesierten Ratte freigelegt wurde, wird der Nerv durchtrennt. Legen Sie als Nächstes einen subkutanen Tunnel an, fädeln Sie den durchtrennten Nerv durch den Tunnel und nähen Sie ihn fest. In Ermangelung eines...

Quelle: Lee, D. et. al., Modifizierte experimentelle Bedingungen für lärminduzierten Hörverlust bei Mäusen und Bewertung der Hörfunktion und der Schädigung der äußeren Haarzellen. J. Vis. Exp. (2023)Dieses Video zeigt den Ablauf des lärmbedingten Hörverlusts bei Mäusen. Schall mit hoher Lautstärke schädigt die Haarzellen im Innenohr und stört die Hörbahnen, was zu Hörschäden führt.

Quelle: Lee, D., et. al. Modifizierte experimentelle Bedingungen für lärminduzierten Hörverlust bei Mäusen und Beurteilung der Hörfunktion und der Schädigung der äußeren Haarzellen. J. Vis. exp. (2023)Dieses Video zeigt die Messung der auditorischen Hirnstammreaktion (ABR) bei einer Maus. Elektroden werden am Kopf, hinter dem Ohr und in der Nähe des Schwanzes einer anästhesierten Maus platziert. Es werden akustische Reize unterschiedlicher Intensität abgegeben und erzeugte elektrische Signale...

Quelle: Olmstead, D. N., et al., Axotomie des Gesichtsnervs bei Mäusen: Ein Modell zur Untersuchung der Reaktion von Motoneuronen auf Verletzungen. J. Vis. Exp. (2015). Dieses Video zeigt das Verfahren der Gesichtsnervenquetschung an einer Maus, bei dem durch stumpfe Dissektion durch wichtige Orientierungspunkte der Stamm des Nervus facialis am Foramen stylomastoideus freigelegt wird. Eine Pinzette wird dann verwendet, um den Nervenstamm zu komprimieren, was zu axonalen Schäden führt und die...

Quelle: Cheah, M., et al. Injektion des Spinalwurzelganglion und Dorsale Root Crush Injury als Modell für die Regeneration des sensorischen Axons. J. Vis. exp. (2017). Dieses Video zeigt ein Schritt-für-Schritt-Verfahren zur Injektion einer Virussuspension in die Spinalganglien (DRGs) und zur Induktion einer kontrollierten axonalen Verletzung über einen dorsalen Wurzelcrush bei einer anästhesierten Ratte. Das Protokoll umfasst die Freilegung der DRGs, die Verabreichung eines wachstumsfördernden...

Um den apoptotischen Zelltod mit dem TUNEL-Assay nachzuweisen, behandeln Sie die Hirnscheibe mit dem Enzym Proteinase-K.

Visualisieren Sie mit Hilfe der Fluoreszenzmikroskopie den verletzten Nerv, der eine fortschreitende Zunahme von axonalen Schwellungen und Diskonnektoren aufweist.

Die Wirkstoffverkapselung erhöht die Spezifität der Tumorzellen und reduziert die Neurotoxizität.

Dieses Video zeigt die Verabreichung von traumatischen Hirnverletzungen (TBI) bei Mäusen. Nach der Freilegung des Schädels wird die SHT-Stelle markiert. Die Maus wird dann unter dem TBI-Gerät positioniert. Der Aufprall wird abgegeben, indem der Metallstab angehoben wird und er frei auf den Schlagkörper fallen kann, der in Kontakt mit dem Schädel steht.

Dieses Video zeigt die Immunfluoreszenzfärbung von Hippocampus-Neuronen von Ratten, die in einem mikrofluidischen Chip kultiviert wurden, um die neuronale Reifung und Konnektivität zu analysieren.

Dieses Video zeigt die Generierung eines neuronalen Verletzungsmodells in primären Kleinhirngranulaneuronen der Maus. Es werden die Schritte beschrieben, die bei der Induktion von neuronalen Verletzungen unter Verwendung von NMDA, einem exzitatorischen Neurotransmitter-Rezeptor-Agonisten, und Glycin, einem Co-Agonisten, erforderlich sind. NMDA und Glycin binden an spezifische neuronale Rezeptoren, was zu deren Überstimulation führt und zu einem massiven intrazellulären Kalziumeinstrom führt,...

Dieses Video zeigt die Immunfluoreszenzfärbung eines Maushirnschnitts, um die Verteilung eines spezifischen präsynaptischen Proteins zu quantifizieren. Der Prozess umfasst das Blockieren unspezifischer Stellen, das Aufbringen von Primärantikörpern für das Zielprotein und einen Referenzmarker, gefolgt von der Markierung von Sekundärantikörpern und der nuklearen Gegenfärbung. Der Referenzmarker gewährleistet eine genaue Quantifizierung, indem er eine konsistente Ausgangsbasis liefert, und die...

Dieses Video demonstriert eine Methode zur Untersuchung von Hirnverletzungen von Zebrafischlarven mit Hilfe der groß angelegten Rastertransmissionselektronenmikroskopie (STEM), einer Technik, die Elemente der Rasterelektronenmikroskopie (REM) und der Transmissionselektronenmikroskopie (TEM) kombiniert, um hochauflösende Bilder zu erzeugen. Es beschreibt die Schritte bei der Vorbereitung von Proben und der Aufnahme von hochauflösenden MINT-Bildern zur Identifizierung von Hirnverletzungen.

Dieses Video zeigt ein chirurgisches Protokoll an einem Rattenmodell, das die Schritte von der Anästhesievorbereitung bis zur Einleitung einer Gesichtsnervenverletzung detailliert beschreibt. Dieses Protokoll ist nützlich für die Untersuchung der Nervenregeneration und chirurgischer Techniken in der medizinischen Forschung.

Dieses Video zeigt das Verfahren zur Auslösung einer traumatischen Hirnverletzung mit offenem Schädel bei einer Maus, indem man einen Schädelschnitt in der Mittellinie macht, den Schädel durchbohrt und den Knochenlappen entfernt, um die Hirnrinde freizulegen, und hohen Druck ausübt, um ein Trauma auszulösen. Die Wunde wird dann vernäht, um das Mausmodell für nachfolgende Experimente vorzubereiten.

Dieses Video zeigt das Verfahren zur Induktion des Hirntods in einem Mausmodell, indem der kontrollierte Hirndruck durch einen Ballonkatheter erhöht wird, wodurch der natürliche Hirntod nachgeahmt wird.

Dieses Video zeigt ein Verfahren zur Erzeugung präziser, kontrollierter Hirnverletzungen im motorischen Kortex von Ratten mit Hilfe eines Lasers.

Dieses Video demonstriert die Biotinylierung und Fluoreszenzmarkierung von modifizierten Sialglykoproteinen in primären neuralen Stamm- und Vorläuferzellen sowie Neuronen und deren Visualisierung mittels Fluoreszenzmikroskopie.

In diesem Video wird ein Stoßrohrgerät verwendet, um eine Stoßwelle zu erzeugen, indem eine Polymermembran durch kontrollierte Druckbeaufschlagung gerissen wird. Die Schockwelle trifft auf Gehirnschnitte, die sich in einem gesicherten Beutel befinden, und führt zu einem Schädeltrauma des Hirnschnitts.

Dieses Video zeigt das Verfahren zur Vorbereitung kultivierter Neuronen für die optische Analyse von recycelten synaptischen Vesikel. Der Prozess umfasst die Fluoreszenzmarkierung von synaptischen Vesikelproteinen und die Immunfärbung, um die recycelten Vesikel in den Neuronen zu markieren und sichtbar zu machen.

Dieses Video zeigt den Prozess der Induktion von Dehnungsverletzungen an humanen induzierten pluripotenten Stammzell-abgeleiteten Neuronen (hiPSCNs). Die Zellen werden in einer bodenlosen Multiwell-Platte entnommen, an der eine Silikonmembran befestigt ist. Kontrollierte mechanische Belastung wird auf die Membran ausgeübt, um eine Störung des Zytoskeletts und eine Schädigung der Zellmembran zu induzieren, wodurch ein Phänotyp einer Dehnungsverletzung in den Zellen induziert wird.

Dieses Video zeigt ein Verfahren zur Zufügung einer traumatischen Verletzung mit geschlossenem Kopf bei anästhesierten Drosophila-Fliegen mit einer Angriffsvorrichtung mit einem gasbetriebenen Impaktor. Die Verletzung beeinträchtigt die neuronale Funktion und beeinträchtigt die Gehfähigkeit.

Dieses Video zeigt die Prozedur der kortikalen Stichverletzung bei Mäusen, einschließlich der Exposition des Schädels und der Entstehung von Hirnläsionen. Es induziert eine reaktive Astrogliose, eine neuroprotektive Reaktion von Astrozyten, um ZNS-Trauma, Entzündungen und Reparaturmechanismen zu untersuchen.

Das Video demonstriert eine Methode zur Erstellung eines Mausmodells für traumatische Hirnverletzungen (TBI) mit Hilfe eines lateralen Flüssigkeitsperkussionsgeräts (LFPI). Bei der Betäubung der Maus wird das Gehirn freigelegt, indem ein Fenster auf dem Schädel geschaffen wird. Eine mit Kochsalzlösung gefüllte Kanüle wird am Fenster befestigt und dann mit dem LFPI verbunden. Das Pendel des Geräts wird losgelassen, um einen Druckimpuls zu erzeugen, der ein Schädel-Hirn-Trauma zufügt.

Dieses Video zeigt das Verfahren zur Induktion eines Schädel-Hirn-Traumas (TBI) in einem Mausmodell. Eine anästhesierte Maus mit freiliegendem Schädel wird entnommen, um eine Öffnung im Schädel zu schaffen, und dann wird mit einem Aufprallgerät eine kontrollierte kortikale Verletzung induziert. Die Verletzung schädigt das Hirngewebe, was zu einer Beeinträchtigung der kognitiven Funktion und der motorischen Koordination führt.

Dieses Video zeigt das chirurgische Verfahren zur Durchführung einer thorakalen Rückenmarkshemisektion bei Ratten. Es werden die Schritte zur Freilegung des T8-Rückenmarkssegments, zur Durchführung der Hemisektion zur Störung der Nervenbahnen auf einer Seite und zur postoperativen Versorgung beschrieben.

Dieses Video zeigt eine Methode zur Induktion einer gezielten neuronalen Schädigung in Drosophila-Larven mit Hilfe eines Hochleistungslasers. Nachdem die Larve unter einem Mikroskop positioniert wurde, sucht ein Laser mit geringer Leistung nach fluoreszierenden Neuronen, und dann wird die Laserleistung erhöht, um lokalisierte Schäden zu induzieren. Die Verletzung wird durch eine erhöhte Fluoreszenz und einen Krater an der Verletzungsstelle bestätigt.

Das Video zeigt die Verwendung eines High-Impact Trauma (HIT)-Geräts zur Induktion eines geschlossenen Kopf-Schädel-Hirn-Traumas (SHT) bei Drosophila. SHT verursacht ein mechanisches Hirntrauma, das die neuronale Funktion beeinträchtigt und im Laufe der Zeit zu Neurodegeneration und Mortalität führt.

Dieses Video zeigt die Induktion eines penetrierenden Schädel-Hirn-Traumas im Drosophila-Gehirn. Neu geschlüpfte Fliegen werden selektiert, anästhesiert und unter einem fluoreszenzbestückten Stereomikroskop positioniert. Der GFP-exprimierende Pilzkörper wird identifiziert und ein Minutien-Stift wird eingeführt, um eine Verletzung zu verursachen. Die Fliegen dürfen sich für weitere Studien erholen.

Quelle: Shandra, O. et al., Induktion posttraumatischer Epilepsie in einem Mausmodell für repetitive diffuse traumatische Hirnverletzungen. J. Vis. exp.

Dieses Video zeigt die Induktion eines Schädel-Hirn-Traumas (TBI) bei einer Ratte mit einem Gerät zur lateralen Flüssigkeitsperkussionsverletzung (FPI). Bei dem Verfahren wird ein Loch in den Schädel einer anästhesierten Ratte gebohrt, um die Dura mater freizulegen, an der eine Kanüle befestigt wird. Die Ratte wird dann mit dem Gerät verbunden, das eine Druckwelle erzeugt, die das Gehirn erreicht und ein Schädel-Hirn-Trauma nachahmt, indem es den Tod von Nervenzellen und Gefäßschäden...

Quelle: Yang, Z., et.al. Ein Modell für repetitive Gehirnerschütterungen bei Mäusen. J. Vis. Exp. (2016). Dieses Video zeigt die Induktion von wiederholten Gehirnerschütterungen bei einer Maus mit Hilfe eines elektromagnetischen Aufprallgeräts. Bei dem Verfahren wird die Aufprallspitze zwischen der interfrontalen und der lambdoiden Naht am Schädel einer anästhesierten Maus positioniert und mit einer Sondenspitze die Aufpralltiefe genau eingestellt. Der Aufprall wird mit einer kontrollierten...

Quelle: Logsdon, A. F., et al. Druckwellenmodell mit niedriger Intensität zur präklinischen Beurteilung von leichten traumatischen Hirnverletzungen mit geschlossenem Kopf bei Nagetieren. (2020)Dieses Video zeigt die Induktion eines leichten Schädel-Hirn-Traumas mit geschlossenem Kopf in einem Mausmodell unter Verwendung eines unter Druck stehenden Gasschockrohrs. Die erzeugte Druckwelle reißt die Polyestermembran auf und gibt eine Schockwelle an den Kopf der Maus ab, die zu einer schnellen...

Quelle: Macheda, T., et. al. Elektromagnetisch gesteuertes Modell mit geschlossenem Kopf für leichte traumatische Hirnverletzungen bei Mäusen. J. Vis. Exp. (2022)Dieses Video zeigt das Verfahren zur Induktion einer geschlossenen Kopfverletzung in einem Mausmodell unter Verwendung eines stereotaktischen Rahmens. Der kontrollierte Aufprall repliziert eine leichte traumatische Hirnverletzung und ermöglicht es den Forschern, neurologische Auswirkungen und die Genesung zu untersuchen, indem sie die...

Quelle: Elzat, E. Y. Y., et al., Etablierung eines Modells für Rückenmarksverletzungen bei Mäusen auf der Grundlage einer minimal-invasiven Technik. J. Vis. Exp. (2022). Dieses Video zeigt die Methode zur Induktion einer Prellungsverletzung im Rückenmark T9 in einem Mausmodell unter Verwendung einer koaxialen Plattform für Rückenmarksverletzungen. Auf das Rückenmark auf T9-Niveau wird ein Gewicht fallen gelassen, das eine Prellung verursacht, die sofort eine Verfärbung und Schwellung des...

Quelle: Lakshman, N., et al. Ein Neurosphären-Assay zur Bewertung der endogenen Aktivierung neuronaler Stammzellen in einem Mausmodell mit minimaler Rückenmarksverletzung. J. Vis. exp. (2018). Dieses Video zeigt die Aktivierung und Migration von neuralen Stammzellen (NSCs) in einem Modell für Rückenmarksverletzungen der Maus. Um das Rückenmark freizulegen, wird einer anästhesierten Maus ein Wirbel aus dem Brustbereich der Wirbelsäule entnommen. In der weißen Substanz des Rückenmarks wird dann...

Quelle: Kumar, S., et. al. Mausmodell von Druckgeschwüren nach Rückenmarksverletzung. J. Vis. Exp. (2019)Dieses Video zeigt eine detaillierte Induktion von Rückenmarksverletzungen bei Mäusen. Die anästhesierte Maus wird präpariert, um T9-T10-Wirbel freizulegen, und ihre Dornfortsätze werden entfernt. Das freiliegende Rückenmark wird dann durchtrennt, um die Verletzung zuzufügen. Anschließend wird das Operationsgebiet geschlossen und die Maus kann sich erholen.

Dieses Video zeigt eine Methode zur Bewertung der Zielprotein-Internalisierung in den kortikalen Astrozyten der Maus mittels Biotinylierung, gefolgt von Zelllyse, Streptavidin-basierter Proteinextraktion, Denaturierung und Western-Blot-Analyse, um die erfolgreiche Internalisierung zu bestätigen.

Dieses Video zeigt eine Methode zur Bewertung der Proteinaktivität mit Hilfe von Hippocampus-Neuronen über gemusterten Proteinzonen. Neuronen zeigen eine Abstoßung in den Testproteinzonen und eine Bindung in den Kontrollproteinzonen, was die Auswirkungen attraktiver oder abstoßender Proteinaktivität unterstreicht.

Dieses Video zeigt die Induktion eines Glaukoms bei einer anästhesierten Ratte durch Injektion von hypertoner Kochsalzlösung in die Episkleralle. Die Kochsalzlösung gelangt über den Schlemm-Kanal in das Trabekelwerk und verursacht Gewebenarben, die den Abfluss des Kammerwassers blockieren und den Augeninnendruck erhöhen. Der erhöhte Druck schädigt die Ganglienzellen der Netzhaut, was zum Glaukom führt.

Homogenisieren Sie das Gewebe mit einem Homogenisator, um Proteine freizusetzen, einschließlich Glutaminsäure-Decarboxylase oder GAD-Enzymisoformen, die für die Gehirnfunktion unerlässlich sind.

Dieses Video zeigt die Prozedur des chirurgischen Zugangs zum Sehnerv bei einem anästhesierten Tier und die präzise Abgabe von Lysolecithin, um eine fokale Demyelinisierung zu induzieren und neuropathologische Zustände für weitere Studien zu schaffen.

Inkubieren Sie die Scheibe in aCSF, das fluoreszierende falsche Neurotransmitter oder FFNs enthält.

Dieses Video zeigt die Induktion von Handling-induzierten Anfällen bei einer Maus, die mit dem Theilerschen Murinen Enzephalomyelitis-Virus (TMEV) infiziert war. Die infizierte Maus, die über übererregbare Neuronen verfügt, wird äußeren physikalischen Reizen ausgesetzt. Diese Exposition verursacht Stress, was zu einer abnormalen elektrischen Aktivität in den Neuronen führt, was zu Krampfanfällen führt.

Dieses Video zeigt das Verfahren zur Induktion hitzeinduzierter Anfälle bei einer transgenen Maus mit epilepsiebedingten Genmutationen, indem die Körpertemperatur in einer kontrollierten Kammer allmählich erhöht wird. Dieses Protokoll wird verwendet, um Anfallsmechanismen und mögliche Therapien für Epilepsie zu untersuchen.

Dieses Video zeigt die Induktion von iktalen Ereignissen in koronalen kortikalen Schnitten von einer transgenen Maus, die lichtaktivierte Kationenkanäle in kortikalen exzitatorischen Pyramidenneuronen exprimiert. Die Scheibe wird in eine Aufzeichnungskammer gelegt, und eine Aufzeichnungselektrode wird in die oberflächliche kortikale Schicht eingeführt. Bei der Perfusion mit einem anfallsauslösenden Medikament, das die Kaliumkanäle blockiert, werden die Neuronen übererregbar und erzeugen...

Dieses Video zeigt den Prozess der Induktion von Epilepsie bei Mäusen mit Pentylentetrazol (PTZ)-Injektionen, einem GABA-A-Rezeptor-Antagonisten. Die wiederholte intraperitoneale Verabreichung von PTZ senkt die Anfallsschwelle progressiv, indem sie den Einstrom von Chloridionen hemmt, die inhibitorische Neurotransmission stört und zu einer Übererregbarkeit in Neuronen führt, die Anfälle auslösen. Dieser Prozess führt zum Anzünden und zur Entwicklung von spontanen Anfällen, die eine chronische...

Quelle: Soukupová, M., et al. Mikrodialyse von exzitatorischen Aminosäuren während EEG-Aufzeichnungen bei frei beweglichen Ratten. J. Vis. Exp. (2018)Dieses Video zeigt die Beurteilung der extrazellulären exzitatorischen Neurotransmitterspiegel bei Ratten mit chronischer Epilepsie-Induktion. Nach der Implantation einer Mikrodialysesonde in das Gehirn und der Bestätigung des Fehlens von Anfällen mittels Elektroenzephalographie (EEG) wird extrazelluläre Flüssigkeit gesammelt, um erhöhte...

Quelle: Schönherr, S., et. al. Kombinierte optogenetische und Gefrierfraktur-Replikat-Immunmarkierung zur Untersuchung der inputspezifischen Anordnung von Glutamatrezeptoren in der Maus-Amygdala. J. Vis. exp. (2016)Dieses Video zeigt die Immunmarkierung von gefrierfrakturierten Nachbildungen von Hirngewebe von Mäusen für die Elektronenmikroskopie. Die gebrochenen und beschichteten Repliken werden verdaut, um Rezeptoren freizulegen. Primäre und goldmarkierte Sekundärantikörper werden...

In diesem Video werden Glioblastom- und Mikrogliazellen mit einer Polymermatrixlösung vermischt und in einen porösen Kammereinsatz überführt, wo sich ein Gel bildet, das die Zellen einbettet. Mikroglia stimulieren die Wanderung von Glioblastomzellen durch den porösen Einsatz und ahmen die Invasion von Tumorzellen in das umgebende Gewebe nach. Die Zellen werden dann fixiert und für die weitere Analyse vorbereitet.

In diesem Video wird eine Methode demonstriert, die den Transfer von fluoreszenzmarkierten Mitochondrien in Glioblastom-Stammzellen (GSCs) durch Zentrifugation ermöglicht. Die erfolgreiche Aufnahme und funktionelle Integration der Donormitochondrien wird durch die Detektion der Fluoreszenz mittels konfokaler Mikroskopie bestätigt.

Quelle: Guyon, J., et al. Ein 3D-Sphäroidmodell für Glioblastome. J. Vis. exp. (2020)Das Video zeigt die Erstellung eines dreidimensionalen Sphäroidmodells der Tumorzellinvasion. Sphäroide werden aus menschlichen Hirntumorzellen gebildet und in eine Kollagenmatrix eingebettet. Die Tumorzellen an der Peripherie der Sphäroiden nehmen einen invasiven Phänotyp an, sezernieren Proteasen, um das Kollagen abzubauen, und dringen vor, um in die umgebende Matrix einzudringen.

Quelle: Lim, M., et al. Modellierung der Hirnmetastasierung durch Injektion von Krebszellen in die innere Halsschlagader. J. Vis. Exp. (2022)In diesem Video wird eine anästhesierte Maus einem chirurgischen Eingriff unterzogen, bei dem Krebszellen in die Arteria carotis communis (CCA) injiziert werden, um eine gezielte Abgabe an das Gehirn zu ermöglichen. Das Verfahren beinhaltet ein präzises Nähen und Manipulieren der Halsschlagadern, um die injizierten Zellen in Richtung der Arteria carotis...

Quelle: Ear, P. H., et. al. Etablierung und Charakterisierung von neuroendokrinen Dünndarmtumor-Sphäroiden. J. Vis. Exp. (2019)Dieses Video zeigt die Immunfluoreszenzfärbung von neuroendokrinen Dünndarmtumor-Sphäroiden. Die Sphäroide werden fixiert, permeabilisiert und blockiert und anschließend mit primären und sekundären Antikörpern inkubiert. Ein Farbstoff wird hinzugefügt, um die Zellkerne zu färben, bevor sie montiert und unter einem Fluoreszenzmikroskop sichtbar gemacht werden.

Quelle: Mudduluru, G., et. al. Impedanzbasierte Echtzeitmessung der Migration und Invasion von Krebszellen. J. Vis. Exp. (2020)Dieses Video zeigt einen impedanzbasierten Assay zur Messung der Invasion und Migration von Glioblastom-Zellen. Die Zellen bauen die extrazelluläre Matrix ab, bewegen sich durch mikroporöse Membranen und haften an Elektroden, wodurch eine Impedanz erzeugt wird. Diese Echtzeitanalyse spiegelt ihr invasives Potenzial für Anwendungen in der Krebsforschung wider.

Quelle: Bolcaen, J., et. al., PET- und MRT-gesteuerte Bestrahlung eines Glioblastom-Rattenmodells mit einem Mikrobestrahlungsgerät. J. Vis. Exp. (2017)Dieses Video zeigt das Verfahren zur Etablierung eines Glioblastom-Rattenmodells durch stereotaktische Injektion von Hirntumor-verursachenden Glioblastomzellen in den präfrontalen Kortex.

Quelle: Mendez, F. M. et al., Native Chromatin Immunoprecipitation using Murine Brain Tumor Neurospheres. J. Vis. Exp. (2018). Dieses Video zeigt die Isolierung von Protein-DNA-Komplexen aus Neurosphärenzellen, die aus einem Maushirntumor stammen, mittels nativer Chromatin-Immunpräzipitation. Es beschreibt die Schritte für die Chromatinvorbereitung, die Immunpräzipitation, das Waschen und den Proteinverdau, um DNA für die nachgelagerte Analyse freizusetzen.

Quelle: Núñez, F. J., et al. Bewertung von Biomarkern bei Gliomen durch Immunhistochemie an paraffineingebetteten 3D-Gliom-Neurosphärenkulturen. J. Vis. exp. (2019). Dieses Video demonstriert eine immunhistochemische Technik zur Markierung von Tumor-Biomarkern in paraffineingebetteten Hirntumor-Neurosphären. Die Neurosphärenabschnitte werden einer Paraffinentfernung und Rehydrierung unterzogen, gefolgt von einer Behandlung, um Biomarkerstellen freizulegen. Primär- und Sekundärantikörper werden...