Induktion von zerebralen Mikroblutungen in einem Rattenmodell mit Lipopolysaccharid

Zusammenfassung

Quelle: Li, D., et al. Subakute zerebrale Mikroblutungen, die durch Lipopolysaccharid-Injektion bei Ratten induziert werden. J. Vis. Exp. (2018).

Dieses Video zeigt den Prozess der Induktion von Störungen der Blut-Hirn-Schranke (BHS) und zerebralen Mikroblutungen in einem Rattenmodell unter Verwendung von Lipopolysaccharid (LPS). Es zeigt die Abfolge von Immunantworten, die zu einer erhöhten BHS-Permeabilität und einer anschließenden Schädigung des Hirngewebes führen.

Protokoll

Alle Verfahren, an denen Tiermodelle beteiligt sind, wurden vom lokalen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss von JoVE überprüft.

>1. Materialien

1. Vorbereitung der LPS-Injektion
   1. 25 ml destilliertes Wasser zu 25 mg LPS-Pulver aus Salmonella typhimurium bis zu einer Endkonzentration von 1 mg/ml hinzufügen. Lagern Sie die Injektion in einem sterilen Röhrchen bei 4 °C.
      Vorsicht: LPS ist giftig.

>2. Tiere

1. Verabreichen Sie LPS an männliche Sprague-Dawley-Ratten (SD) im Alter von 10 Wochen (Durchschnittsgewicht: 280 ± 20 g) durch intraperitoneale Injektion.
   Vorsicht: Wenn Ratten von einer anderen Organisation gekauft werden, sollte die Anpassungsphase nicht weniger als 7 Tage betragen.

>3. LPS-Injektionen

1. Injizieren Sie jeder Ratte intraperitoneal LPS in einer Dosis von 1 mg/kg und bringen Sie die Ratten in ihren Heimatkäfig zurück.
   Anmerkung: Eine Anästhesie ist nicht notwendig.
2. Sechs Stunden später injizieren Sie den Ratten die gleiche Dosis LPS-Injektion.
3. Sechzehn Stunden später injizieren Sie den Ratten die gleiche Dosis LPS.
   Vorsicht: Die Injektion von LPS in einer Dosis von 1 mg/kg an Ratten kann zu einer Mortalitätsrate von 5 % führen. Die Sterblichkeitsrate könnte bei jüngeren oder älteren Ratten oder trächtigen weiblichen Ratten weiter ansteigen.
4. Bringen Sie die Ratten nach der LPS-Injektion in ihre Käfige zurück und verschaffen Sie ad libitum Zugang zu Futter und Getränken.
   Anmerkung: Ratten zeigen eine ausgeprägte systemische Entzündungsreaktion, so dass die Käfige während des gesamten Experiments sauber bleiben müssen. Ratten sollten nach der ersten LPS-Injektion häufig (2x täglich) auf Gewicht, allgemeines Aussehen und Verhalten überwacht werden. Wenn die Ratten beginnen, eine gebeugte Haltung, Bewegungsunwilligkeit, einen signifikanten Gewichtsverlust (>20%) oder Porphyrinflecken zu zeigen, sollten sie vor dem 7-Tage-Endpunkt der Studie human eingeschläfert werden.

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
Lps	Sigma-Aldrich	Nr. L-2630	zur Induktion von Entzündungen
Phosphatpuffer-Kochsalzlösung (PBS)	Solarbio	Nr. P1022	eine Art Pufferlösung, die häufig im Experiment verwendet wird

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