Quelle: McFadden, T., et al. Quantifizierung der subzellulären Ubiquitin-Proteasom-Aktivität im Nagetiergehirn. J. Vis. Exp. (2019).
Dieses Video zeigt, wie man die Proteasomaktivität in verschiedenen subzellulären Kompartimenten der lateralen Amygdala aus angstkonditionierten und kontrollierten Rattengehirnen mit einem fluorogenen Peptid-Assay messen kann. Das Proteasom spaltet das fluorogene Peptidsubstrat und setzt fluoreszierende Moleküle frei, die mit einem Plattenleser quantifiziert werden, um die Proteasomaktivität in den nukleären und synaptischen Proteinfraktionen zu bewerten. Eine erhöhte Kernaktivität deutet auf Veränderungen in der Genexpression hin, während eine verringerte synaptische Aktivität auf eine Proteinstabilisierung hinweist, die für die Aufrechterhaltung des Langzeitgedächtnisses erforderlich ist.
