Technik zur Induktion posttraumatischer Anfälle in einem Mausmodell über eine traumatische Gewichtsabnahmeverletzung

Zusammenfassung

Quelle: Shandra, O. et al., Induktion posttraumatischer Epilepsie in einem Mausmodell für repetitive diffuse traumatische Hirnverletzungen. J. Vis. exp. (2020)

Protokoll

Alle Verfahren, bei denen Tiermodelle zum Einsatz kommen, wurden vom örtlichen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss der JoVE überprüft.

1. Verfahren zur Gewichtsreduzierung

1. Stellen Sie die Maus in eine Induktionskammer. Stellen Sie den Sauerstoff- und Vakuumfluss auf 1 l/min und den Isoflurangasgehalt auf 3 % bis 5 % ein. Betäuben Sie die Maus für 5 Minuten.
2. Nehmen Sie die Maus aus der Induktionskammer und legen Sie sie auf eine Schaumstoffunterlage. Testen Sie, ob es keine Reaktion auf ein Einklemmen der Zehen oder des Schwanzes gibt.
3. Ein Analgetikum (0,1 mg/kg Buprenorphin) subkutan verabreichen. Wenn die Elektroenzephalographie (EEG) am selben Tag durchgeführt wird, verabreichen Sie das Buprenorphin subkutan in Kombination mit dem nichtsteroidalen entzündungshemmenden Carprofen (5 mg/kg).
4. Die Natriumlactatlösung (3 μl pro Gramm des Tiergewichts) ist vor oder nach dem letzten Aufprall subkutan zu verabreichen. Die Natriumlactatlösung kann mit den Analgetika gemischt werden, um eine schnelle Verabreichung in einer einzigen Injektion zu ermöglichen.
   HINWEIS: Die Natriumlactatlösung enthält eine Mischung aus Natriumchlorid, Kaliumchlorid, Calciumchlorid und Natriumlactat in Wasser. Dieser Schritt hilft, Flüssigkeiten und Elektrolyte zu ersetzen und die Genesung zu unterstützen.
5. Positionieren Sie den Kopf der Maus unter dem Gewichtsfallrohr (Abbildung 1A) und platzieren Sie eine flache Edelstahlscheibe (1,3 cm Durchmesser, 1 mm Dicke und 880 mg Gewicht) in der Mitte des Kopfes, zwischen der Linie der Augen und Ohren.
   HINWEIS: Diese Scheibe verteilt den Aufprall über die Oberfläche des Schädels (Abbildung 1B).
6. Entfernen Sie den Stift im Gewichtsfallrohr, um die 100 g Gewichtsstange aus einer Höhe von 50 cm zu lösen. Um die Scheinverletzung bei den Kontrollmäusen auszulösen, entfernen Sie die Gewichtsstange aus dem Rohr, um ein versehentliches Lösen des Stifts und einen Gewichtsabfall zu verhindern.
   HINWEIS: Der Kopf des Tieres muss flach positioniert werden, so dass der Stab auf der gesamten Oberfläche der Scheibe frei fällt.
7. Legen Sie das bewusstlose Tier zur Genesung auf den Rücken auf ein Heizkissen, das mit einem sterilen, polylinierten, saugfähigen Handtuch bedeckt ist. Die Erholungszeit des Aufrichtreflexes (d. h. die Zeit, die die Maus benötigt, um sich von ihrem Rücken aufzurichten) kann als Ablesung für die Zeit der Bewusstlosigkeit gemessen werden.

Ergebnisse

Abbildung 1: Das Mausmodell des repetitiven diffusen Schädel-Hirn-Traumas (SHT). (A) Gerät zum Absenken von Gewichten. (a1) Gewicht Fallrohr. (a2) Eine 100 g schwere Rute. (a3) Stift, der die Stange hält. (a4) Schnur, um die Stange anzuheben, wenn Sie die Höhe ändern oder die Stange aus dem Gewichtsfallrohr entferne...

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
Buprenorphin	von Pharmaceuticals, Cos. Inc., Spring Valley, NY, Vereinigte Staaten von Amerika	60969
C57BL/6 Mäuse	Harlan/Envigo Laboratories Inc		männlich, 12-16 Wochen alt
C57BL/6 Mäuse	Das Jackson Laboratorium		männlich, 12-16 Wochen alt
Carprofen	Zoetis Services LLC, Parsippany, NJ, USA	26357	HINWEIS: Dieses Medikament wird während der Gewichtsabnahme nur hinzugefügt, wenn die stereotaktische Elektrodenimplantation am selben Tag durchgeführt wird
Fluriso-Flüssigkeit für die Inhalationsanästhesie	MWI Veterinary Supply Co., USA	502017
Scheibe aus rostfreiem Stahl			Sonderanfertigung
Sterile, mit Poly gefütterte, saugfähige Handtücher	Kardinal Gesundheit, USA	3520