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Alle Verfahren, an denen Tiermodelle beteiligt sind, wurden vom örtlichen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss von JoVE überprüft.
1. Vorbereitung von Mäusen auf das experimentelle Verfahren
HINWEIS: Für das experimentelle Verfahren wurden gesunde männliche C57BL/6J-Mäuse im Alter von 12 Wochen ausgewählt, wobei jede Maus zwischen 18 und 22 g wog.
- Haltung der Mäuse einzeln in Käfigen in einem typischen Labortierraum ohne spezifische Krankheitserreger (LSF) (22 ± 1 °C, 12 h/12 h Dunkel-/Hell-Zyklus, relative Luftfeuchtigkeit: 30–40%) für eine Woche vor dem CUMS-Eingriff.
- Teilen Sie alle Mäuse nach dem Zufallsprinzip entsprechend ihrem Körpergewicht in eine Kontrollgruppe und eine Modellgruppe ein. Jede Gruppe besteht aus 15 Mäusen.
- Vor Beginn des Versuchs nummerieren Sie die Mäuse in jeder Gruppe mit einem Markierungsstift am Schwanz.
2. Induktion von Depressionen bei Mäusen
HINWEIS: Um eine Depression auszulösen, wurden die Mäuse in der Modellgruppe und zwei Behandlungsgruppen 21 Tage lang chronischem unvorhersehbarem mildem Stress (CUMS) unterzogen. Der Plan kann je nach praktischer Situation geändert werden, aber es sollte der Grundsatz befolgt werden, dass derselbe Stressor nicht ständig verwendet werden kann.
- Setzen Sie Mäuse täglich an 21 aufeinanderfolgenden Tagen zwei der folgenden sieben Stressfaktoren aus. Unser Modellierungsplan sieht wie folgt aus:
- Setzen Sie Mäuse am Montag Nahrungsentzug (leeren Sie das Futter jedes Käfigs für 24 Stunden, 8:00 Uhr bis 8:00 Uhr) und Wasserentzug (Entfernen Sie die Trinkflasche aus jedem Käfig für 24 Stunden, 8:00 Uhr bis 8:00 Uhr) aus.
- Setzen Sie die Mäuse am Dienstag Fesselstress aus (halten Sie die Mäuse 3 Stunden lang von 8:00 bis 11:00 Uhr in einer kleinen Plastikwanne fest) und leeren Sie die Käfige (entfernen Sie die Polsterung in jedem Käfig für 11 Stunden, 8:00 bis 19:00 Uhr).
- Setzen Sie die Mäuse am Mittwoch nassen und schmutzigen Käfigen aus (gießen Sie Wasser in jeden Käfig und halten Sie sie 24 Stunden lang feucht, 8:00 bis 8:00 Uhr) und überfüllten Käfigen (setzen Sie fünf Mäuse 24 Stunden lang von 8:00 bis 8:00 Uhr in einen Käfig).
- Setzen Sie die Mäuse am Donnerstag Fesselstress und eiskaltem Schwimmen aus (zwingen Sie jede Maus, 5 Minuten lang in einem Klarglasaquarium mit Eiswasser zu schwimmen).
- Setzen Sie die Mäuse am Freitag nassen und verschmutzten Käfigen und Nahrungsentzug aus.
- Setzen Sie die Mäuse am Samstag Fesselstress und überfüllten Käfigen aus.
- Setzen Sie Mäuse am Sonntag leeren Käfigen und eiskaltem Schwimmen aus.
- Notieren Sie wöchentlich den Fellzustand und das Körpergewicht bis zum Ende der Modellierung (Tag 21). Berechnen Sie die Gesamtpunktzahl des Fellzustands als Summe der Punktzahlen von sieben verschiedenen Körperteilen: Kopf, Hals, Rückenfell, Bauchfell, Vorderpfoten, Schwanz und Hinterpfoten. Eine Punktzahl von eins deutet auf ein gepflegtes Fell hin, und eine Punktzahl von null deutet auf ein ungepflegtes Fell hin.