Induktion von Hörverlust bei Mäusen durch anhaltende Schallbelastung mit hoher Lautstärke

Zusammenfassung

Quelle: Lee, D. et. al., Modifizierte experimentelle Bedingungen für lärminduzierten Hörverlust bei Mäusen und Bewertung der Hörfunktion und der Schädigung der äußeren Haarzellen. J. Vis. Exp. (2023)

Dieses Video zeigt den Ablauf des lärmbedingten Hörverlusts bei Mäusen. Schall mit hoher Lautstärke schädigt die Haarzellen im Innenohr und stört die Hörbahnen, was zu Hörschäden führt.

Protokoll

Alle Verfahren, bei denen Tiermodelle zum Einsatz kommen, wurden vom örtlichen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss der JoVE überprüft.

1. Induktion von lärminduziertem Hörverlust (NIHL) bei Mäusen

1. Bereiten Sie den Käfig für die Versuchsmäuse vor
   1. Verwenden Sie dazu einen Rattenfallenkäfig mit den Maßen 14 cm × 17 cm × 24 cm. Schneiden Sie vier Stücke Wellpappplatten in die entsprechenden Größen zu, damit sie in den Käfig passen (13 cm × 23 cm und 13 cm × 16 cm).
   2. Um zu verhindern, dass sich die Mäuse die Füße durch das Maschengitter aufschneiden, legen Sie zwei der Stücke an die Unterseite bzw. auf die Rückseite. Platzieren Sie die beiden anderen Teile senkrecht ineinander, um den Raum im Käfig in Viertel zu unterteilen.
2. Führen Sie diese Studie in einer schalldichten Box durch. Stellen Sie einen Lautsprecher 8,5 cm vor dem Käfig auf und platzieren Sie sowohl den Lautsprecher als auch den Käfig in einer schalldichten Box.
3. Öffnen Sie die CLIO-Anwendungssoftware.
4. Bewegen Sie den Cursor auf das Lautsprechersymbol und klicken Sie dann auf TwoSin. Geben Sie den Wert von Freq 1 in 1000 Hz und Freq 2 in 6000 Hz ein und klicken Sie auf OK , um die Wiedergabe des Sounds zu starten.
5. Ändern Sie auf der Registerkarte Leq Dezibel Volt (dBV) in Dezibel Schalldruckpegel (dBSPL). Nachdem Sie die Uhrzeit auf der Softwareoberfläche eingestellt haben, klicken Sie auf die grüne Dreiecksschaltfläche, um den Ton abzuspielen.
6. Platzieren Sie ein Mikrofon in einem Abstand von 8,5 cm vor dem Lautsprecher, um den Geräuschpegel zu kalibrieren (Abbildung 1). Stellen Sie den Geräuschpegel auf 125 dB SPL-A ein und überwachen Sie ihn kontinuierlich für mindestens 3 Minuten, um sicherzustellen, dass der Geräuschpegel ausreichend stabil ist. Verwenden Sie einen Generator, einen Analysator und einen Verstärker, um das Rauschen zu erzeugen und zu steuern. (Abbildung 2)
   HINWEIS: Führen Sie diesen Schritt in einer schalldichten Box aus, um Schäden am Gehör des Bedieners zu vermeiden.
7. Setzen Sie vier männliche C57BL/6J-Mäuse in den Käfig (eine für jedes Viertel), um die Lärmbelastung zu gewährleisten. Weisen Sie die Mäuse während der Lärmbelastung in jedem Quartal nach dem Zufallsprinzip zu. Platzieren Sie ein Mikrofon auf der Oberseite des Käfigs, um den Geräuschpegel während der Lärmbelastung zu überwachen (Abbildung 3).
   HINWEIS: Führen Sie diesen Schritt in einer schalldichten Box durch, um Schäden am Gehör des Bedieners zu vermeiden.
8. Setzen Sie die Mäuse dem Rauschen bei Frequenzen von 1 kHz und 6 kHz kontinuierlich für 6 Stunden pro Tag an 5 aufeinanderfolgenden Tagen aus.

Ergebnisse

Abbildung 1: Spannungsberechnung aus der Kalibrierung. Für jede spezifische Frequenz wird der Wert der ausgewählten Spannung (horizontale Achse) in die Kalibrierkurve eingegeben, um den entspreche...

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
1/4" CCP Free-field Standard Microphone Set	GRAS	428158	Für Lärmbelastung
Rattenfallenkäfig<		14 cm x 17 cm x 24cm
Soundverstärker, MT-1000<		Für Lärmbelastung
Klangerzeuger/-analysator/sonstiges, FW-02	CLIO	620300719	For noise exposure
Soundproof	IEA Electro-Acoustic Technology		For noise exposure and ABR
Speaker	IEA Electro-Acoustic Technology		Für Lärmbelastung

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