Messung der auditiven Hirnstammreaktion bei Mäusen

Zusammenfassung

Quelle: Lee, D., et. al. Modifizierte experimentelle Bedingungen für lärminduzierten Hörverlust bei Mäusen und Beurteilung der Hörfunktion und der Schädigung der äußeren Haarzellen. J. Vis. exp. (2023)

Dieses Video zeigt die Messung der auditorischen Hirnstammreaktion (ABR) bei einer Maus. Elektroden werden am Kopf, hinter dem Ohr und in der Nähe des Schwanzes einer anästhesierten Maus platziert. Es werden akustische Reize unterschiedlicher Intensität abgegeben und erzeugte elektrische Signale als Wellenformen aufgezeichnet.

Protokoll

Alle Verfahren, an denen Tiermodelle beteiligt sind, wurden vom örtlichen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss von JoVE überprüft.

1. Beurteilung der Hörschwelle auf der Grundlage der auditiven Hirnstammreaktion (ABR)

1. Verwenden Sie ein kommerzielles ABR-Testsystem, das speziell für Kleintiere entwickelt wurde.
2. Intraperitoneal injizieren Sie den Mäusen eine Mischung aus Tiletamin und Zolazepam (40 mg/kg) und Xylazin (9,3 mg/kg) zur Vollnarkose.
   HINWEIS: Die ABR-Bewertung dauert ~2 Stunden. Achten Sie darauf, dass Sie die Wärme über ein Heizkissen unterstützen und tragen Sie Augensalbe auf, um Trockenheit zu verhindern, während die Maus unter Narkose steht.
3. Messen Sie den ABR bei der Maus unter Vollnarkose. Platzieren Sie subdermale Nadelelektroden (12 mm) am Scheitelpunkt, hinter der Ohrmuschel des linken Ohrs und hinten in der Nähe des Schwanzes, um die Hörschwelle zu messen.
4. Präsentieren Sie akustische Reize mit einem Lautsprecher, der 1 cm vom linken Ohr des Tieres entfernt aufgestellt ist.
5. Verwenden Sie ein Oszilloskop, um die akustischen Reize zu steuern. Wählen Sie Sinuswelle für die Stimuli und 10 k für die Fensterskala. Drehen Sie den Regler Frequenz , um die gewünschte Frequenz der akustischen Reize zu erhalten.
6. Passen Sie die Stimulusintensität an, indem Sie den Regler amplitude oder AMLP am Funktionsgenerator drehen. Um die gewünschte Stimulusintensität zu erreichen, drehen Sie den AMLP -Regler auf eine geeignete Spannung, die aus der Kalibrierung berechnet wird.
7. Erfassen Sie die ABR-Messungen unter einer Reihe von Stimulus-Intensitäten, von 10 dB Schalldruckpegel SPL bis 100 dB SPL, mit einer Schrittweite von 10 dB.
   HINWEIS: Messen Sie die Hörschwelle in einer schalldichten Box. Es wurde angenommen, dass die minimale Stimulusintensität, die zu einer erkennbaren Welle V im gesammelten Signal führen könnte, die ABR-Schwelle ist (Abbildung 1). Überwachen Sie das Tier nach der ABR-Untersuchung, bis es sich von der Narkose erholt hat (~1 h).

Ergebnisse

Abbildung 1: ABR-Messung des Gehörs. Repräsentative ABR-Ergebnisse bei 12 kHz, erhoben am 13. Tag (1 Woche nach der Lärmbelastung). Die Welle V bei jeder Intensität ist beschriftet, wenn sie erkennbar ist.

Materialien