Immunhistochemische Färbung von Kryoschnitten aus koronalem Gewebe der Ratte auf Mikroglia und Neuronen

Zusammenfassung

Quelle: Evilsizor, M. N., et. al., Primer für Immunhistochemie an kryogeschnittenem Hirngewebe von Ratten: Beispielfärbung für Mikroglia und Neuronen. J. Vis. Exp. (2015)

Dieses Video zeigt ein schrittweises immunhistochemisches Färbeverfahren an kryosektioniertem Hirngewebe von Ratten, um die räumliche Anordnung von Mikroglia und Neuronen zu visualisieren.

Protokoll

Alle Verfahren mit Tierproben wurden von der zuständigen tierethischen Überprüfungskommission überprüft und genehmigt.

1. Tissue Staining
   <
   1. span style='background-color:transparent;color:#1a202c;'>In einer lichtdichten Färbebox erstellst du eine "Feuchtigkeitskammer" mit fusselfreiem Gewebe, das mit entionisiertem Wasser getränkt ist.
   2. Trocknen Sie die Ränder des Objektträgers mit einem fusselfreien Taschentuch, verwenden Sie e....

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
Name des Materials/ Ausrüstung
Fisherbrand Superfrost Plus Glass Slides	Fisher Scientific	22-034-979	Wird für die Gewebebefestigung
Oven	Thermo Scientific	51028112	Wird zum Trocknen
Mini Pap pen	Life Technologies	00-8877<
Andwin Scientific Tissue-tek Slide Staining Dish	Fisher Scientific<
Kimwipes	Fisher Scientific	06-666-A	Wird zum Trocknen von Objektträgern
Black Staining Box	Ted Pella	21050<
Normal Donkey Serum	Fisher Scientific	50-413-253	Wird für Block- und Antikörper-Inkubation
Mouse α-Pan-neuronal	Millipore	MAB2300	Wird für Primärantikörper
Rabbit α-Iba1	Wako Chemical	019-19741	Wird für Primärantikörper
Donkey α-Rabbit 594	Jackson ImmunoResearch	711-585-152	Wird für Sekundärantikörper
Donkey α-mouse 488	Jackson ImmunoResearch	715-545-150	Wird für Sekundärantikörper
Fluoromount-G	Southern Biotech	0100-01	Wird für Deckgläser
Coverslips	Fisher Scientific	12544E	Wird für Deckgläser
Axio Observer.Z1 und LSM 710 (Laserscanning, confocal)	Carl Zeiss	N/A	Wird für Imaging
Axioskop A2	Carl Zeiss	N/A	Wird für Imaging verwendet

verwendet von Gewebe verwendet td style='width:230pt;'> td style='width:230pt;'>22-149-429<td style='width:230pt;'>Wird für alle Waschvorgänge während des Färbens verwendet, sowie für den Hoechst-Schritt verwendet td style='width:230pt;'>Wird zum Blockieren und Färben von Schritten verwendet verwendetverwendet verwendet verwendet verwendet verwendet verwendet verwendet