Multispektrale diffuse Reflexionsbildgebung des zerebralen Blutflusses und der Gewebestruktur von Ratten

Zusammenfassung

Quelle: Nishidate, I., et al. Gleichzeitige Bewertung der zerebralen Hämodynamik und der Lichtstreueigenschaften des In vivo Rattengehirns mittels multispektraler diffuser Reflexionsbildgebung. J. Vis. Exp. (2017)

Dieses Video demonstriert den Einsatz von multispektraler diffuser Reflexionsbildgebung zur Analyse des zerebralen Blutflusses, des Sauerstoffgehalts und der Gewebestrukturveränderungen bei einer anästhesierten Ratte und bietet Einblicke in die Hämodynamik und Morphologie des Gehirns unter verschiedenen Bedingungen.

Protokoll

Alle Verfahren, an denen Tiermodelle beteiligt sind, wurden vom örtlichen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss von JoVE überprüft.

1. Aufnahme von Beispielbildern
   Hinweis: Bilder der diffus reflektierten Lichtintensität des exponierten Rattengehirns bei neun Wellenlängen werden unter den gleichen Aufnahmebedingungen aufgenommen und auf der Festplatte eines PCs gespeichert.
   1. Platzieren Sie die Ratte vorsichtig auf dem Tisch und stellen Sie die Tischhöhe langsam so ein, dass die Kamera auf die Oberfläche des Gehirns der Ratte fokussieren kann.
   2. Wählen Sie den Befehl "Speichern" aus dem Dateimenü, um ein Bild in einer Datei zu speichern.
   3. Ändern Sie die Filterposition, indem Sie das Filterrad drehen.
   4. Speichern Sie ein Bild in den anderen Wellenlängen gemäß dem oben beschriebenen Verfahren. Der Dateiname sollte die Probe und die Wellenlänge angeben (z.B., R500, R520, R540 ... R760).
2. Aufnahme von dunklen Bildern
   HINWEIS: Die CCD-Kamera (Charged-Coupled Device) kann als Reaktion auf ein elektrisches Signal eine Lichtintensität erzeugen. Es gibt jedoch eine geringfügige Leistung aufgrund von Rauschen in den Stromkreisen und Detektoren, selbst wenn kein Licht in den Detektor eintritt. Dies wird als Dunkelstromrauschen bezeichnet. Um die spektrale Intensität des Lichts genau zu messen, sollte die Dunkelstromkomponente als Dunkelbild aufgezeichnet und dann vom gemessenen Signal subtrahiert werden. Das dunkle Bild ist ein Bild, das mit blockiertem Hellpfad aufgenommen wurde.
   1. Schalten Sie die Lichtquelle der Halogenlampe aus.
   2. Blockieren Sie den Lichtweg zum CCD-Kamerasystem mit einer Abschirmplatte.
   3. Wählen Sie den Befehl "Speichern" aus dem Dateimenü, um ein Bild in einer Datei zu speichern. Der Dateiname sollte die Probe identifizieren (, z. B. Dark).

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
150-W Halogenlampen-Lichtquelle	Hayashi Watch Works Co., Ltd, Tokio, Japan	LA-150SAE
Lichtleiter	Hayashi Watch Works Co., Ltd, Tokio, Japan	LGC1-5L1000
Sammellinse	Hayashi Watch Works Co., Ltd, Tokio, Japan	SH-F16
Interferenzfilter l@500nm	Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Japan	#65088
Interferenzfilter l@520nm	Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Japan	#65093
Interferenzfilter l@540nm	Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Japan	#65096
Interferenzfilter l@560nm	Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Japan	#67766
Interferenzfilter l@570nm	Edmund Optics Japan Ltd, Tokio, Japan	#67767
Störfilter l@580nm	Edmund Optics Japan Ltd, Tokio, Japan	#65646
Störfilter l@600nm	Edmund Optics Japan Ltd, Tokio, Japan	#65102
Störfilter l@730nm	Edmund Optics Japan Ltd, Tokio, Japan	#65115
Störfilter l@760nm	Edmund Optics Japan Ltd, Tokio, Japan	#67777
Motorisiertes Filterrad	Andover Corporation, NH, USA	FW-MOT-12.5
16-Bit-gekühlte CCD-Kamera	Bitran, Japan	BS-40
Videozoomobjektiv	Edmund Optics Japan Ltd, Tokio, Japan	VZMTM300i
Spectralon weißer Standard mit 99 % diffusem Reflexionsgrad	Labsphere Incorporated, North Sutton, NH, USA	SRS-99-020