Multispektrale diffuse Reflexionsbildgebung des zerebralen Blutflusses und der Gewebestruktur von Ratten

Zusammenfassung

Quelle: Nishidate, I., et al. Gleichzeitige Bewertung der zerebralen Hämodynamik und der Lichtstreueigenschaften des In vivo Rattengehirns mittels multispektraler diffuser Reflexionsbildgebung. J. Vis. Exp. (2017)

Dieses Video demonstriert den Einsatz von multispektraler diffuser Reflexionsbildgebung zur Analyse des zerebralen Blutflusses, des Sauerstoffgehalts und der Gewebestrukturveränderungen bei einer anästhesierten Ratte und bietet Einblicke in die Hämodynamik und Morphologie des Gehirns unter verschiedenen Bedingungen.

Protokoll

Alle Verfahren, an denen Tiermodelle beteiligt sind, wurden vom örtlichen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss von JoVE überprüft.

1. Aufnahme von Beispielbildern
   Hinweis: Bilder der diffus reflektierten Lichtintensität des exponierten Rattengehirns bei neun Wellenlängen werden unter den gleichen Aufnahmebedingungen aufgenommen und auf der Festplatte eines PCs gespeichert.
   1. Platzieren Sie die Ratte vorsichtig auf dem Tisch und stellen Sie die Tischhöhe langsam so ein, dass die Kamera auf die Oberfläche des Gehirns der Ratte fokussieren kann.
   2. Wählen Sie den Befehl "Speichern" aus dem Dateimenü, um ein Bild in einer Datei zu speichern.
   3. Ändern Sie die Filterposition, indem Sie das Filterrad drehen.
   4. Speichern Sie ein Bild in den anderen Wellenlängen gemäß dem oben beschriebenen Verfahren. Der Dateiname sollte die Probe und die Wellenlänge angeben (z.B., R500, R520, R540 ... R760).
2. Aufnahme von dunklen Bildern
   HINWEIS: Die CCD-Kamera (Charged-Coupled Device) kann als Reaktion auf ein elektrisches Signal eine Lichtintensität erzeugen. Es gibt jedoch eine geringfügige Leistung aufgrund von Rauschen in den Stromkreisen und Detektoren, selbst wenn kein Licht in den Detektor eintritt. Dies wird als Dunkelstromrauschen bezeichnet. Um die spektrale Intensität des Lichts genau zu messen, sollte die Dunkelstromkomponente als Dunkelbild aufgezeichnet und dann vom gemessenen Signal subtrahiert werden. Das dunkle Bild ist ein Bild, das mit blockiertem Hellpfad aufgenommen wurde.
   1. Schalten Sie die Lichtquelle der Halogenlampe aus.
   2. Blockieren Sie den Lichtweg zum CCD-Kamerasystem mit einer Abschirmplatte.
   3. Wählen Sie den Befehl "Speichern" aus dem Dateimenü, um ein Bild in einer Datei zu speichern. Der Dateiname sollte die Probe identifizieren (, z. B. Dark).

Materialien